肺脏缺血预处理的蛋白质组学研究

目的 研究大鼠肺组织缺血预处理（IP）的蛋白质组变化。方法 20只SD大鼠，随机分为预处理组和对照组，每组10只。常规开胸后建立左上肺缺血再灌注模型，全部大鼠均遭受了缺血再灌注损伤（IRI），但预处理组在缺血再灌注前给予IP干预，对所有样本总蛋白质进行二维凝胶电泳分离，差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析后Mascot软件搜索SWISS—PROT和NCBI数据库进行鉴定。结果 本研究建立了分辨率较高、重复性较好的鼠肺缺血再灌注损伤的双向凝胶电泳参考图谱，45个蛋白质点表达存在差异，其中包括巯基特异性抗氧化荆（TSA）和6个热休克蛋白家族在内的30个蛋白质点得到了鉴定。结论 蛋白质组学是研究IRI和IP肺脏保护机制的很有前途的工具。TSA在IP对肺脏IRI的保护机制中起重要作用。     

Effects and potential mechanisms of Danzhi Xiaoyao Pill (丹栀逍遥丸) on proliferation of MCF-7 human breast cancer cells in vitro

Objective： To investigate the effects of 50% ethyl alcohol （EtOH） extracts from Danzhi Xiaoyao Pill （丹栀逍遥丸, DXP） on the proliferation of MCF-7 human breast cancer cells and potential mechanisms. Methods： ATP-Lite assay was performed to test the proliferation of the MCF-7 breast cancer cell line; and antioxidant activity was measured by the oxygen radical absorbance capacity （ORAC）. The effects of DXP on nitric oxide （NO） production were tested by lipopolysaccharide （LPS）- stimulated RAW 264.7 murine macrophages using the Griess reaction. Results： The 50% EtOH DXP extracts displayed a cytotoxic response on MCF-7 cells at 0.10, 0.25 and 0.50 mg/mL dosedependently with the proliferation inhibited by more than 85%. The ORAC value of the DXP was 820μ moL Trolox equivalent/g, about 40% of the vitamin C value. DXP extracts had significant inhibitory effect on NO production at the concentration from 0.0625 mg/mL to 0.5 mg/mL （P〈0.05, P〈0.01）. Conclusion： The extracts of DXP could significantly inhibit the proliferation of MCF-7 cells, with the effect possibly related to its antioxidant activity and the inhibition of NO production.     

黄精多糖对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖和抗氧化作用的影响

目的研究黄精多糖(PSP)对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的保护作用及对其氧自由基代谢的影响。方法采用四氧嘧啶腹腔注射法,建立糖尿病小鼠模型;测定小鼠的血糖,胸腺、肝脏、脾脏和肾脏重量;化学比色法分别检测血清和肝脏中的T-SOD、GSH-Px活性及MDA含量。结果与模型组比较,PSP(0.5、1g/kg,ig×14d)能明显降低糖尿病小鼠血糖(P<0.05),显著提高糖尿病小鼠的胸腺、脾脏和肝脏指数,提高血清和肝脏组织中的T-SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量。结论PSP对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

虾青素对小鼠急性乙醇肝损伤的保护作用

目的:研究虾青素对乙醇所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用。方法:雄性小鼠60只,随机分为正常对照组、急性乙醇肝损伤模型组、联苯双酯阳性对照组(15 mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10,15,20 mg/kg)共6组。测定并比较各组小鼠肝脏系数,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性与丙二醛(MDA)含量;测定肝组织中SOD,GSH-px活性,MDA含量以及组织病理系数。结果:各剂量虾青素均能升高急性乙醇肝损伤小鼠血清与肝组织中SOD,GSH-px活性(P<0.01),降低血清ALT,AST活性(P<0.01),降低血清与肝组织MDA含量(P<0.01),并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤。结论:虾青素对乙醇所致急性肝损伤具有预防性保护作用。     

山奈酚、芹菜素、大豆苷元对H2O2诱导的心肌细胞凋亡的影响

目的 观察不同种类黄酮类化合物山萘酚(KA)、芹菜素(AP)、大豆苷元(DA)对H2O2诱导的心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响.方法 取Wistar大鼠新生乳鼠心肌细胞做原代培养,MTT法检测几种黄酮的细胞毒浓度;H2O2(100μmol/L)诱导心肌细胞凋亡;Tunel法、流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组化方法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达.结果 MTT法显示各组药物在5、30μmol/L没有显著的细胞毒作用.KA、AP、DA均显著减小H2O2诱导的细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值(P＜0.05),其中KA效果最显著(P＜0.01).结论 这些黄酮类化合物有抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡作用,其机制与其抗氧化活性有关,可能是通过调节Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,起到心肌细胞保护作用,其中KA效果最好.     

黄连对正常小鼠红细胞的影响及其抗氧化属性研究

目的:观察黄连对正常小鼠红细胞溶血、红细胞抗氧化系统及其功能的影响,同时评价黄连和小檗碱的氧化还原属性.方法:整体动物实验:正常小鼠灌服黄连1.2 g·kg-1,3d后取血,分别测定血浆游离血红蛋白、血清间接胆红素含量和外周血网织红细胞数量,红细胞膜葡萄糖六磷酸脱氢酶( G6PD)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、全血抗氧化能力(T-AOC)及红细胞膜谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量,检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶,Ca2+ -Mg2+-ATP酶的活性,并观察其对红细胞流动性和变形性的影响;电生化实验采用循环伏安法测定黄连和小檗碱在玻璃碳电极上的伏安行为;体外红细胞实验观察黄连对正常小鼠红细胞自氧化溶血率的影响.结果:口服1.2g·kg-1黄连对正常小鼠的血浆游离血红蛋白、血清间接胆红素、外周血网织红细胞的计数均无明显影响,对红细胞膜SOD,G6PD和全血T-AOC的活性及红细胞膜MDA,GSH无明显改变,也不影响红细胞膜Na+ -K+ -ATP酶,Ca2+ -Mg2+ -ATP酶活性,同时对红细胞流动性及变形性亦无明显影响;黄连分别在-0.27 V和0.60V有2个氧化峰,小檗碱在0.56V处有1个氧化峰,回扫时二者均无还原峰;0.125 ～2 g·L-1黄连体外可以明显抑制小鼠红细胞的自氧化溶血.结论:正常剂量的黄连不能引起正常小鼠红细胞溶血,也不影响红细胞膜抗氧化系统及其功能,黄连具有抗氧化(还原)属性.     

山楂叶悬钩子根抗氧化活性成分研究

目的:研究山楂叶悬钩子根抗氧化活性成分.方法:综合利用硅胶减压柱色谱、凝胶柱色谱分离方法分离纯化山楂叶悬钩子根中化学成分,运用多种波谱技术(UV,1 H-NMR,13C-NMR,MS)鉴定化合物结构,进一步通过DPPH法评价各化合物的抗氧化活性.结果:从山楂叶悬钩子根中分离得到9个化合物,分别为蔷薇酸(1),山柰酚-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(2),吐曼酸(3),2α,19α,24-三羟基乌苏-12-烯-3-氧-28-酸(4),2α-羟基齐墩果酸(5),乌苏酸(6),胡萝卜苷(7),β-谷甾醇(8),白藜芦醇苷(9).抗氧化实验结果表明化合物2和9在50 mg·L-时对DPPH自由基清除能力分别为95.60％,75.23％.结论:化合物1～8为首次从该植物中分离得到,化合物2和9具有明显的抗氧化活性.     

灯盏细辛的抗氧化活性研究

目的:研究灯盏细辛6个化合物的抗氧化活性.方法:以灯盏细辛为原料,采用有机溶剂提取法和色谱柱法对灯盏细辛中化学成分进行提取与分离,利用核磁共振等波谱学方法进行结构鉴定,体外法检测6个化合物对1-二苯基-2-苦味酰肼自由基清除法( DPPH),2,2′-联氨-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基清除法(ABTS),O2·自由基和·OH自由基的清除能力,并以维生素C(Vc)为阳性对照,结果:6个化合物者对DPPH,ABTS,O-2·,·OH自由基均具有清除作用,且与浓度呈良好的量效关系,6个化合物清除自由基能力与Vc相似.结论:灯盏细辛中的6个化合物均具有较强的抗氧化活性.     

加减补肺汤联合甲强龙对IPF大鼠抗氧化作用的影响

目的:观察加减补肺汤联合甲强龙对博来霉素诱导的特发性肺纤维化(IPF)大鼠抗氧化作用,探讨其作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,甲强龙组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),加减补肺汤组(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),联合用药1组,联合用药2组,每组10只。除正常组外其余各组大鼠采用气管内一次性滴注博来霉素复制IPF模型(1 mg/只),造模24 h后,开始ig或im给药,持续到处死动物的前1 d,模型组ig等体积的生理盐水。计算IPF大鼠肺系数,观察肺组织形态学改变,测定各组大鼠肺组织匀浆中羟脯氨酸(Hyp),丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,取固定部位肺组织分别进行苏木素-伊红(HE)染色。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺泡炎细胞浸润及肺间质纤维化程度明显,肺系数明显升高,肺组织中Hyp,MDA含量明显升高、肺组织中SOD的活性明显降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组均可改善IPF大鼠的生存状态,甲强龙组、加减补肺汤组和联合用药1组可明显改善IPF大鼠肺泡炎细胞浸润及肺间质纤维化程度,显著降低肺系数(P0.01,P0.05),降低肺组织中Hyp,MDA含量、升高肺组织中SOD的活性。结论:联合用药1组对降低IPF大鼠肺组织中肺系数,Hyp和MDA的含量,升高肺组织中SOD活性,优于单独给药,其机制可能是减少脂质过氧化物的释放而达到抗氧化作用。