萨木萨克油的质量标准研究

目的建立萨木萨克油的质量标准。方法采用TLC法鉴别丁香和大蒜;采用HPLC法检测大蒜素的含量。色谱柱:Wondasil C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-1mL·L~(-1)甲酸(75∶25);柱温:30℃;流速:1.0mL·min~(-1);检测波长:210nm。结果薄层色谱法对丁香和大蒜的鉴别效果好,重复性好,阴性对照无干扰,其线性范围为9.99~199.85μg·mL~(-1)(r=0.999 8),回收率为100.9%(RSD=1.2%)。结论该方法操作简单、准确、重复性好,可用于萨木萨克油的质量控制。     

大蒜素抑制成纤维细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的机制

文题释义：大蒜素：是从葱科葱属植物大蒜的鳞茎(大蒜头)中提取的一种有机硫化合物,也存在于洋葱和其他葱科植物中。学名二烯丙基硫代亚磺酸酯。成纤维细胞：是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。根据不同功能活动状态,可将细胞划分为成纤维细胞和纤维细胞,成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。背景：研究报道大蒜素具有抗纤维化作用,可抑制过度增生的成纤维细胞增殖和胶原合成能力,但大蒜素抑制成纤维细胞增殖及诱导其凋亡的确切机制尚未明确。目的：探讨大蒜素抑制硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞增殖、迁移并诱导其凋亡的作用机制,为防治硬膜外粘连提供新思路。方法：培养人体硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞至对数增长期,用不同质量浓度梯度大蒜素处理24 h。采用荧光显微镜观察细胞形态,CCK-8试验检测细胞增殖,划痕试验及Transwell试验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot及实时定量PCR技术检测细胞增殖、凋亡相关蛋白和基因表达水平。结果与结论：①大蒜素处理24 h后,成纤维细胞萎缩变形,体积变小,细胞核固缩、碎裂;②细胞增殖能力和迁移率均呈剂量依赖性下降(P < 0.01);③G₁期细胞比例呈剂量依赖性升高(P < 0.01),而S期和G₂期呈剂量依赖性下降(P < 0.01),流式细胞仪结果显示凋亡细胞比例呈剂量依赖性升高(P < 0.01);④与对照组(未加入大蒜素处理组)相比,细胞核增殖抗原及Bcl-2在蛋白与mRNA水平的表达均显著降低(P < 0.01),而Bax表达显著增高(P < 0.01);⑤说明大蒜素具有抑制硬膜外瘢痕来源的成纤维细胞增殖、迁移并促其凋亡的作用,可能与调控细胞核增殖抗原、Bcl-2及Bax表达有关。ORCID: 0000-0001-5479-5484(朱守雷)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Differential effects of alliin and allicin on apoptosis and senescence in luminal A and triple-negative breast cancer: Caspase, ΔΨm,and pro-apoptotic gene involvement

Breast cancer is the most frequent cancer in women worldwide, and drug resistance is common in all breast cancer types. The combination of natural products with chemotherapies has attracted attention, as it was found that natural compounds enhance the effects of standard cancer chemotherapeutic drugs and protect from side effects. Into the different natural products, garlic has been recognized for its antitumor properties. It is suggested that its anticancer effects are associated with its organo-sulfur compounds, especially alliin and allicin. Here, we evaluated the effects of both molecules on cell death, senescence, and their senolytic potential in luminal A and triple-negative breast cancer cells. MCF-7 (luminal A) and HCC-70 (triple-negative) cells were cultured and treated with different concentrations of alliin or allicin. Then, cell viability was determined using the WST-1 reagent. Apoptosis and caspase activity were evaluated by flow cytometry; ΔΨm was assessed using a JC-10 fluorometric assay kit. Apoptosis-related genes were evaluated by RT-PCR. Proliferation was measured using bromodeoxyuridine incorporation. We also evaluated clonogenicity, senescence (β-Galactosidase Staining), and the senolytic effect of the compounds. Our results showed that allicin has antiproliferative, anticlonogenic, and senolytic effects. In addition, allicin decreased cell viability and induced apoptosis by loss of ΔΨm, caspase-3, caspase-8, and caspase-9 activation, upregulation of NOXA, P21, and BAK, as well as downregulation of BCL-XL expression. Contrary to allicin, alliin promoted clonogenicity, induced senescence, and did not exhibit pro-apoptotic effects in breast cancer cells.     

大蒜素诱导卵巢癌细胞株OVCA-3凋亡

目的:探讨大蒜素诱导卵巢癌细胞株OVCA-3凋亡规律。方法:应用DNA断裂点标记（TUNEL）法、DNA凝胶电泳以及光镜等技术观察有关细胞的凋亡情况。结果:0.01-100μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞2h及10μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞不同时间,锥虫蓝染色阳性率均在18.5％以下。TUNEL显示：1-100μg/ml的大蒜素作用OVCA-3细胞2h,即出现典型的细胞凋亡特征;50μg/ml时凋亡率为65.9％。结论:一定剂量范围内的大蒜素可在直接杀伤作用较小的情况下明显诱导OVCA-3细胞凋亡,不会因细胞坏死而引起炎症反应,这对于大蒜素应用于临床将有重要意义。     

大蒜素调节Bcl-2/Bax促进宫颈癌U14细胞凋亡的研究

目的探讨大蒜素对小鼠宫颈癌U14细胞凋亡的影响及作用机制。方法体外培养U14细胞,将细胞分为对照组(不加大蒜素处理组)和大蒜素组(质量浓度分别为5、10和20mg.L-1)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法测定大蒜素作用24、48、72h时对U14细胞的增殖抑制率;膜联蛋白A5-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测U14细胞的凋亡率;逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测U14细胞Bcl-2和Bax mRNA和蛋白的表达水平。结果 5、10和20mg.L-1大蒜素组对U14细胞增殖的抑制率:24h时分别为(6.6±1.41)%、(23.5±2.79)%和(58.9±1.65)%,48h时分别为(25.5±2.89)%、(47.9±8.78)%和(69.5±3.72)%,72h时分别为(58.9±1.66)%、(78.9±1.19)%和(92.6±7.33)%,均显著高于对照组(P<0.05),且细胞增殖抑制率呈浓度和时间依赖性。5、10和20mg.L-1大蒜素组作用24h后,细胞凋亡率分别为(9.22±0.55)%、(22.34±1.53)%和(35.73±1.98)%,与对照组的(3.23±0.35)%比较差异有统计学意义(P<0.05),且呈浓度依赖性。与对照组比较:10、20mg.L-1组Bcl-2mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而10、20mg.L-1组Bax mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。结论大蒜素可能通过上调Bax表达,下调Bcl-2的表达诱导U14细胞凋亡。     

沉默 MDR1 基因表达逆转白血病耐药HT9细胞对大蒜素的耐药性

目的:利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体沉默耐药细胞HT9中MDR1基因表达,从而逆转人早幼粒白血病细胞株HT9对大蒜素的耐药性。方法:根据MDR1基因序列设计shRNA片段,构建靶向MDR1基因的pSilencer3.1-shMDR1表达载体,稳定转染HT9细胞,real-time PCR检测细胞中MDR1 mRNA的表达,Western blotting检测HT9细胞中P-糖蛋白(MDR1基因编码)的表达,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测经大蒜素处理后HT9细胞的凋亡,电镜观察细胞超微结构变化,流式细胞术检测细胞周期。结果:成功构建靶向MDR1的表达载体pSilencer3.1-shMDR1,稳定转染HT9细胞形成HT9-shMDR1细胞系,HT9-shMDR1细胞中MDR1 mRNA表达显著降低[(0.027±0.002)vs(0.110±0.005),P<0.01],P-糖蛋白表达也明显降低[(0.856±0.014)vs(1.454±0.027),P<0.05]。大蒜素对HT9-shMDR1细胞的IC50较对未转染组HT9细胞明显降低[(26.66±0.59)vs(52.75±0.64)μg/ml,P<0.01],HT9-shMDR1细胞对大蒜素耐药的相对逆转率为(49.45±1.86)%。与未转染组HT9细胞相比,经大蒜素处理后HT9-shMDR1细胞凋亡的DNA片段更为明显,电镜下可见细胞凋亡特有的半月体形成。大蒜素处理不影响未转染组HT9细胞和对照质粒转染后HT9细胞(HT9-neo细胞)的细胞周期,但大蒜素处理使HT9-shMDR1细胞的S期细胞比例减少[(31.40±2.13)%vs(53.80±1.87)%,P<0.01],G2/M期细胞比例增多[(35.62±2.06)%vs(9.37±2.09)%,P<0.01]。结论:靶向MDR1的干扰表达载体pSilenc-er3.1-shMDR1能够抑制MDR1基因的表达,从而逆转HT9细胞对大蒜素的耐药性。     

大蒜素对尼古丁致人牙周膜成纤维细胞氧化毒性的保护作用

目的 研究大蒜素对尼古丁所致人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)氧化毒性的保护作用.方法 1)建立尼古丁对HPDLCs氧化毒性的模型,采用水溶性四氮唑(WST)比色法选出可有效抑制HPDLCs存活率的尼古丁质量浓度X,用于后续实验.2)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组(大蒜素质量浓度分...     

有关2010年版中国药典大蒜质量标准的几点建议

通过文献综述阐述大蒜的活性成分———蒜氨酸、蒜酶和大蒜辣素及三者之间的关系;介绍国外药典收载大蒜及相关制剂含量测定的指标,简述大蒜素的由来及结构。对2010年版中国药典大蒜质量标准中含量测定的方法提出疑问,并提出修改建议。     

枸杞和大蒜素对小鼠巨噬细胞功能的影响

用枸杞水提液及大蒜素和枸杞混合液,大蒜素胶囊液、鲜蒜提取液多次灌胃小鼠,均可提高小鼠巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数,均能增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能和细胞免疫功能。     

大蒜素注射液对临床常见耐药菌的抗性分析

目的 :观察大蒜素注射液对临床常见耐药菌的抑制杀菌效果。方法 :将大蒜素注射液运用琼脂平板稀释法,对临床常见的泛耐药(或全耐药)鲍曼不动杆菌(PDR-Ab)和铜绿假单胞菌(PDR-Pa)进行最低杀菌浓度(MBC)试验。结果:20株PDR-Ab中19株MBC为2 mg/m L,1株MBC为0.125 mg/m L;15株PDR-Pa的MBC分别为2 mg/m L 4株,1 mg/m L 3株,0.5 mg/m L 4株,0.25 mg/m L 3株,0.125 mg/m L 1株。结论 :大蒜素注射液对两组实验菌有效好杀菌效果,对PDR-Pa的效果优于PDR-Ab。