C端带Myc和多聚组氨酸双重标签基因的改构体J-HNP-1在COS-7细胞的转染表达

目的改构α-防御素-1(HNP-1)使其成为一端带J链的改构体J-HNP-1分子,并探索建立能有效表达和分泌J-HNP-1,其表达产物又易于被检测和分离纯化的哺乳动物细胞表达系统。方法利用重组PCR技术,使HNP-1一端带上J链;将J-HNP-1 DNA片段插入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中,构建出C端带Myc和6×His的rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1;将此重组真核表达载体导入COS-7细胞,分别从mRNA和蛋白质水平分析J-HNP-1的表达情况,并同步检测细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性。结果采用RT-PCR法从被转染的细胞中扩增出1条约786bp的片段,其大小与预测相符;采用Western印迹法,用抗His抗体检测到细胞可溶性蛋白及培养上清在相对分子质量约24×103处有强反应条带显示;细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性检测显示,经rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清均有明显的抗菌活性。结论α-防御素-1(HNP-1)被成功改构成杀菌肽J-HNP-1;所建立的J-HNP-1哺乳动物细胞表达载体系统能有效表达和分泌活性J-HNP-1。     

前S1蛋白抗原测定在乙型肝炎诊疗中的应用评价

目的进一步评价前S1蛋白抗原测定在乙型肝炎诊断疗效和预后等方面的作用.方法通过ELISA方法对380例急慢性乙型肝炎患者进行PreS1Ag测定,同时用ELISA法测定HBV病毒血清标志物和用PCR法测定HBV-DNA.结果 "大三阳"患者PreS1Ag阳性率为90.09%,"小三阳"患者PreS1Ag阳性率为50%,PreS1Ag与HBV-DNA、HBeAg相一致.PreS1Ag随着HBV的清除而消长.对23例经拉米夫定治疗的患者进行动态观察,PreS1Ag消除率达85%.结论前S1蛋白抗原测定在乙型肝炎诊疗中有很大的应用价值.     

免疫缺陷性皮肤病

20061317CRF07-DC亚型HIV的gag-pol区基因序列分析/关琪(辽宁沈阳医学院奉天医院检验科),王素芬,张卓然…∥中国艾滋病性病.-2006,12(1).-7~92株艾滋病病毒1型(HIV-1)CRF07-BC亚型病毒的完整gag基因和部分pol基因重组及耐药位点分析显示:与新疆地区流行的模式病毒毒株非常接近。未发现基因重组断点的变化,因而不存在天然耐药情况,适用于抗逆转录类药物的应用。图1表2参7(杨亚琴)20061318HIV抗体筛查实验阳性、确认实验可疑和阴性标本的对比分析/黑发欣(北京市疾控中心性病艾滋病防治所),张启云,孙伟东…∥中国艾滋病性病.-2006,12(1…     

皮质发育障碍模型的建立及其致痫敏感性的研究

目的:建立皮质发育障碍模型,探讨皮质发育障碍模型的敏感性。方法:在SD大鼠孕17d腹腔注入1,3-二氯乙烯-亚硝基脲(BCNU)制作皮质发育障碍模型;Nissl染色观察P60d仔鼠病理变化;选取P60d雄性仔鼠,腹腔注射氯化锂-毛果芸香碱,分别比较两组大鼠癫发生的潜伏期、持续状态时间和死亡率。结果:同龄仔鼠脑组织湿重实验组比对照组显著减轻(P<0.01);Nissl染色显示皮质变薄、皮质层次紊乱、海马区域异位细胞异常聚集;有皮质发育障碍的仔鼠注射氯化锂-毛果芸香碱后,癫发生的潜伏期显著缩短(P<0.01),癫持续状态时间延长(P<0.01),死亡率显著升高(P<0.05)。结论:BCNU致皮质发育障碍模型具有癫易感性。     

IL-1Ra和IL-10真核表达质粒载体的构建及其表达检测

目的:构建人IL-1Ra和人IL-10真核表达质粒载体并检测其表达。方法:用双酶切方法切取PCDI-IL-1Ra和PCDI-IL-10质粒中包含人IL-1Ra和人IL-10 CDS全长序列的cD-NA片段,并分别连接到真核表达质粒pcDNA3.1上,然后用壳聚糖转染上述质粒到原代软骨细胞,RT-PCR检测其mRNA水平的表达。结果:成功将人IL-1Ra和IL-10 CDS全长序列的cDNA片段克隆到真核表达载体,mRNA水平检测到目的基因的表达明显提高。结论:真核表达质粒可以用于外源基因的原代软骨细胞导入和表达,为进一步的基因治疗研究提供依据。     

温骨祛痹巴布剂对各种疼痛的治疗作用

我科于2004年7月-2006年3月间,应用温骨祛痹巴布剂治疗肩周炎、软组织损伤、腰肌劳损等引起的疼痛,取得了良好的效果,现将该药治疗疼痛的疗效观察总结报道如下。1资料与方法1.1一般资料共选择112例患者,均有疼痛、肿胀及皮下瘀血等症状,其中男65例,女47例;年龄18～49岁,平均31.     

体外培养骨髓单个核细胞分泌促血管生长因子的实验研究

目的分析体外培养的骨髓单个核细胞持续分泌促血管生长因子的能力。方法从大鼠胫骨及股骨采集骨髓,密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞进行体外培养,并连续收集4周培养上清液。酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定培养上清液中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和白介素-1β(IL-1β)等因子水平。结果第1、2、3、4周骨髓单个核细胞体外培养上清液中VEGF分别为(24.40±7.99)pg/m、l(89.28±5.13)pg/m、l(115.24±10.08)pg/m、l(157.00±15.64)pg/m l;bFGF含量分别为(52.72±2.13)pg/m、l(48.10±6.41)pg/m、l(44.71±3.21)pg/m、l(25.61±2.42)pg/m l;IL-1β含量分别为:(31.28±5.44)pg/m、l(71.87±3.01)pg/m、l(55.77±11.94)pg/m、l(41.75±9.14)pg/m。l结论体外培养骨髓单个核细胞可持续分泌VEGF、bFGF、IL-1β等多种促血管生长因子。     

IL—1β诱导体外培养的猪甲状腺细胞凋亡的实验研究

本文研究白细胞介素-1β(IL-1β)诱导体外培养的猪甲状腺细胞凋亡的实验，旨在探讨细胞因子对甲状腺细胞凋亡的作用。实验运用了甲状腺细胞原代培养技术和吖橙橙染色从形态学上测定细胞凋亡的发生，结果表明经IL—1β诱导后体外培养的猪甲状腺细胞有明显的凋亡特征—凋亡小体。     

CTLA4-Ⅰg对老年支气管哮喘病人CD4^＋CD45RO^＋T细胞功能的影响

目的 研究老年支气管哮喘病人周围血CD4^＋CD45RO^＋T细胞表达IL4及IL-13的情况及CTLA4-Ⅰg对其影响。方法 用ELISA方法测定老年支气管哮喘病人CD4^＋CD45RO^＋T细胞产生IL-4和IL-13的水平及CTLA4-Ⅰg对其影响。结果 老年支气管哮喘病人CD4^＋CD45RO^＋T细胞分泌IL4、IL-13增多，IL-13增多较IL-4更为明显（P〈0．01），CTLA4-Ⅰg可有效抑制老年哮喘病人CD4^＋CD45RO^＋T细胞分泌IL-4和IL-13（P〈0．01）。结论 CD4^＋CD45RO^＋T细胞产生的IL-4和IL-13在老年哮喘发病中起重要作用，CTLA4-Ⅰg可有效抑制IL-4和IL-13的分泌。     

高血压脑出血微创治疗中再出血的防治

应用YL-1型血肿碎吸针，依CT定位，穿刺碎吸血肿，损伤小、操作简便，已在全国推广应用。但其本身无止血作用，如操作方法不当，术中及术后再出血发生率较高，再次出血病人预后极差，临床上应重视再出血的防治。