中医药临床系统生物学研究体系与实践

中医药临床系统生物学是为适应中医药临床研究和转化医学的需要,以推动"系统-系统"模式的中医药现代化和国际化为目标,在中医药整体观和系统论指导下,整合运用多种系统生物学技术,通过对病、证诊疗方法和药物临床合理应用方法的创新研究来为临床服务,提高临床诊治水平的学科。针对现行研究中存在的"方、证、病割裂,基因、蛋白质、代谢物分离"等问题,我们提出构建以多层面生物标志物群为特征的临床系统生物学研究体系。整合的生物标志物群包括中医证候指标、临床生化及影像学指标、系统生物学标志物群多个层面,系统生物学指标包含基因、蛋白质、代谢物多个层次的标志物群。建立的整合生物标志物体系可应用于疾病早期预警、临床诊治、指导个性化用药、疾病预后以及药物评价。以近年来我们开展的糖尿病肾病中医药临床系统生物学研究为例,开展了包含中医证候指标和临床病理生化指标研究,还包括整体代谢指纹特征谱以及七大类百余种磷脂、15种脂肪酸、21种嘌呤嘧啶、8种硫醇氨基酸的定量指标和14种糖尿病肾病相关基因在内的系统生物学研究,初步得出整合生物标志物群(IBS),应用于糖尿病肾病气阴两虚证的辅助诊断和糖肾方临床疗效评价,可为系统生物学应用于中医药临床研究和实践应用提供参考。以临床疗效为导向的中医药现代化研究是中医药发展的最佳途径。     

抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌患者及对炎症因子,T细胞亚群水平及血清肿瘤标志物的影响

目的:探讨抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌及对患者炎症因子,T细胞亚群水平及血清肿瘤标志物影响。方法:选取郑州大学附属肿瘤医院肿瘤内科非小细胞肺癌Ⅳ期老年患者84例,患者或家属签字同意,积极配合此次研究,按随机数字表法分组,对照组患者(42例)予以单纯吉非替尼治疗,研究组患者(42例)予以吉非替尼联合抗瘤增效方治疗,观察并记录所有患者治疗前后生存质量、炎症因子及T细胞亚群水平,同时对比临床疗效及不良反应状况。结果:对照组有效率低于研究组(P0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后生存质量、炎症因子及T细胞亚群水平均发生变化,研究组治疗后躯体功能,角色功能,社会功能,情绪功能评分高于对照组,研究组治疗后白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2),白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平高于对照组,研究组治疗后CD8+水平低于对照组,CD4+及CD4+/CD8+水平高于对照组(P0.05);治疗后,对照组血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)升高,治疗组VEGF下降(P0.05);与治疗前比较,两组患者癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA),糖抗原(carbohydrate antigen-125,CA125)及细胞角蛋白19片段21-1(cytokeratin 19 fragments,CYFRA21-1)差异无统计学意义,组间比较差异无统计学意义;两组患者不良反应较轻,无药物不良反应。结论:抗瘤增效方联合吉非替尼治疗老年非小细胞肺癌疗效确切,能提高生活质量及免疫功能。     

妊娠期常用中药遗传安全性研究概况

在回顾中医妇科妊娠期安全用药理论的基础上,对近十年来妊娠期常用中药的遗传安全性研究进行整理和分析:(1)中医历来重视妊娠期用药的安全性,自古即有妊娠禁忌药的记载;(2)遗传安全性试验的技术、方法日趋成熟;(3)目前中药的安全性研究已逐渐展开,在妊娠期常用方药中,单味药研究较少;复方几乎空白;(4)中药遗传安全性研究的技术和方法尚未统一,安全性评价也无公认标准,构建符合中医药自身特点的安全性评价体系迫在眉睫,妊娠期广泛使用的方药遗传安全性研究是亟待解决的问题.     

加味五子衍宗方含药脑脊液对β淀粉样蛋白诱导海马神经元损伤的保护作用

目的研究加味五子衍宗方及其总多糖、总黄酮含药脑脊液对β淀粉样蛋白诱导的原代大鼠海马神经元损伤的保护作用。方法体外原代培养大鼠胎鼠海马神经元,并将加味五子衍宗方的提取物(总方、总多糖、总黄酮)对大鼠进行灌胃给药,然后抽取含药脑脊液,将含药脑脊液与20μmol/L的Aβ25-35共同作用海马神经元24h后,分别检测正常对照组、Aβ25-35损伤组、空白脑脊液保护组、加味五子衍宗方含药脑脊液(总方、总多糖、总黄酮)保护组的海马神经元活力、凋亡率以及凋亡相关蛋白(caspase-3,PARP,Bcl-2,Bcl-XL,JNK1/2,p38MAPK)的变化情况。结果加味五子衍宗方不同提取物(总方、总多糖、总黄酮)的含药脑脊液对Aβ25-35所诱导的海马神经元毒性均有保护作用,且总黄酮、总多糖含药脑脊液的保护作用明显高于总方含药脑脊液(P0.05或P0.01),但是加味五子衍宗方不同组分(总方、总多糖、总黄酮)的含药脑脊液对凋亡相关蛋白的调控机制并不一致。结论加味五子衍宗方中的部分黄酮类和多糖类成分可以透过血脑屏障并进入脑脊液,同时这些成分对β淀粉样蛋白所致的神经损伤有一定的保护作用。     

戚广崇运用冬令膏方调治男性更年期综合征经验

针对男性更年期综合征肾虚、天癸渐竭的根本病机,戚广崇教授运用冬令膏方择时补肾,侧重温补,并注意使心、肝、脾诸脏的功能恢复。中老年人随着年龄增长,气血不畅、瘀血内生较为常见,是更年期男性走向衰老的重要因素。戚老师以通为补,常以活血化瘀法祛瘀生新。膏方治疗本病起效相对较慢,戚老师用药的药性温和,且注重膏方的气味和口味,故配伍后使药效缓和,有利于长期服用,循循而进,缓图以取效。     

升麻药材及其颗粒的HPLC指纹图谱质量控制研究

摘要：目的 建立升麻药材及其颗粒的HPLC指纹图谱,为升麻药材及其颗粒的质量控制以及工艺评价提供依据。方法 采用 C18 色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min－ 1,检测波长254 nm,柱温30 ℃。结果 所建立的HPLC指纹图谱能够对升麻药材及其颗粒各组分进行良好分离,具有较好的精密度、重复性和稳定性;并对图谱中的6个主峰进行了化学指认。结论 采用HPLC建立的指纹图谱方法简单,重复性好,能够准确分析升麻药材及其颗粒的物质组成以及有效物质群的变化,可用于升麻药材及其颗粒的质量控制和工艺评价。     

Haigis公式系数优化对提高人工晶状体度数预测准确性研究

目的 比较采用Haigis公式优化和非优化系数计算白内障手术植入人工晶状体术前预测与术后实际屈光度的差别.方法 诊断为年龄相关性白内障,取22 mm≤眼轴≤24 mm患者81例(127只眼),IOL Master测量眼部参数,使用不同系数Haigis公式对植入相应人工晶状体进行术前屈光度预测,根据不同系数分为优化和未优...     

Mechanisms of the Bushen Huoxue formula in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology-molecular targets

Background:Osteoarthritis is a common degenerative disease with a high incidence, high disability rate, and poor prognosis. Clinical studies have shown that Bushen Huoxue formula can relieve joint swelling and pain and improve limb function and joint mobility, but there is a lack of high-quality scientific basis. Using network pharmacology and molecular docking technology to study the mechanism of Bushen Huoxue formula in the treatment of osteoarthritis.Methods:First, the active ingredients and corresponding target predictions of the formula were obtained through the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform and the China National Knowledge Infrastructure. Meanwhile, the osteoarthritis disease targets were obtained through the genome annotation database platform (GeneCards) and the DrugBank database, and the target proteins obtained above were standardized using the Uniprot (https://www.uniprot.org) database standardization of names. Then, the Venn diagram was created by taking the intersection of the active ingredient and the target of the disease, and the “active ingredient-target” network was constructed and analyzed using Cytoscape 3.7.2 software. At the same time, the intersecting targets were imported into the Search Tool for the Retrieval of Interaction Gene/Proteins database to build a protein-protein interaction network and to screen the core targets; the intersecting targets were visualized by using the Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery 6.8 database for gene ontology functional analysis and the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway enrichment analysis, and construct the “active ingredient-target-pathway” network. Finally, the main active ingredients of the formula for tonifying the kidney and invigorating the blood were validated by molecular docking with the core targets.Results:A total of 194 active ingredients and 365 targets of the Bushen Huoxue formula were collected, 776 targets for osteoarthritis diseases and 96 targets for the intersection of active ingredients and diseases. The Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes enrichment analysis yielded 104 relevant pathways, including tumor necrosis factor signaling pathways, cancer signaling pathways, nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor signaling pathways, Toll-like receptors signaling pathways, and osteoclast differentiation, apoptosis, T-cell receptor signaling pathway, and other related pathways. The molecular docking results showed good binding of the main active ingredients to the core targets.Conclusion:This study shows that the treatment of osteoarthritis involves multicomponent, multitarget, and multipathway processes. The mechanism of anti-inflammatory, antioxidant, inhibition of cartilage matrix degradation, and reduction of subchondral bone destruction may be an important mechanism for the therapeutic effect.     

补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的骨修复作用

目的:观察补肾方对激素性股骨头坏死(SONFH)大鼠股骨头骨修复的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,补肾方高、中、低剂量组和阳性药健骨生丸组。除正常组外其余各组臀肌注射21 mg·kg-1甲泼尼龙琥珀酸钠,1 d 1次,连续3 d,建立单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型。各给药组从第4天开始,分别给予5.3,10.6,21.2 g·kg-1的补肾方和1.68 g·kg-1健骨生丸,给药6周后取血和股骨头,HE染色观察股骨头组织的病理学改变,Micro-CT扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析,ELISA检测血清骨形成标志物骨钙素(BGP)和降钙素(CT)含量。结果:模型组大鼠股骨头表现出大量空骨陷窝和脂肪细胞、骨小梁变窄或断裂、骨髓腔内血细胞减少、可见大量坏死区等组织病理学改变;还可见股骨头塌陷、骨质减少、骨小梁稀疏等影像学改变,骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁模式因子、骨小梁数量、骨密度等骨计量学参数降低而骨小梁分离度升高,血清BGP和CT含量也显著降低;与模型组比较,补肾方中、高剂量组能明显改善大鼠股骨头组织病理学改变程度,补肾方高、中、低剂量组均显著抑制骨坏死程度,中、高剂量组还显著升高血清BGP和CT的含量(P0.05,P0.01);健骨生丸组的作用与补肾方中剂量组的作用相当。结论:补肾方组能明显改善SONFH大鼠股骨头组织病理学和影像学改变,增加血清中BGP及CT的含量,这一促进骨修复的作用可能是其防治激素引起的股骨头骨坏死的机制之一。     

运脾温阳方及其拆方对脾虚大鼠小肠病理结构影响的研究

[目的]讨论运脾温阳颗粒及其拆方对大黄致脾虚大鼠胃肠激素干预的研究。[方法]测定100％大黄煎液造成的脾虚泄泻大鼠脏器指数、小肠病理改变的影响。[结果]与正常组比较,模型组大鼠大部分小肠黏膜中到重度绒毛变矮变小甚至消失,黏膜上皮中到重度大片坏死,上皮细胞消失,腺体破坏亦比较严重;运脾温阳方及其拆方对小肠病变均有不同程度的恢复作用,大部分恢复正常。结论：运脾温阳方及其拆方通过增加脾虚大鼠脏器指数、改善小肠病理结构发挥作用