雷公藤甲素对U251细胞自噬活性的影响及机制研究

目的 探讨雷公藤甲素对U251细胞自噬活性的影响及机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测雷公藤甲素对U251细胞的增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);免疫荧光化学法测定细胞中LC3-Ⅱ表达,Western blot法测定LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、磷酸化P70、磷酸化Erk、磷酸化AKT蛋白的表达.结果 雷公藤甲素作用于U251细胞后,细胞增殖受抑制,24 h的IC50为0.73 μmol/L,48 h的IC50为0.27μmol/L.免疫荧光法测定6、12、24 h后LC3-Ⅱ水平增高;Western blot法测定LC3-Ⅱ水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值随时间增高;Beclin-1水平增高,磷酸化P70、磷酸化Erk表达降低、磷酸化AKT无明显变化.结论 雷公藤甲素可抑制U251细胞增殖并促进自噬,并可通过上调Beclin-1表达和抑制mTOR的活性来促进自噬.     

糖皮质激素受体在3种人成骨肉瘤细胞株MG63、U2-OS及HOS中表达及差异

目的 研究糖皮质激素受体（glucocorticoid receptors,GR）在人成骨肉瘤细胞株MG63、U2-OS及HOS的表达及差异.方法 人成骨肉瘤细胞株MG63、U2-OS及HOS购买于ATCC,常规方法培养细胞.待细胞株生长良好时,检测3种细胞株的细胞骨架、黏附力等细胞特性,通过realtime RT-PCR和Western blot法检测GR表达情况.结果 3种人成骨肉瘤细胞株有不同细胞特性,GR在3种人成骨肉瘤细胞株中表达存在差异.结论 GR在不同功能的人成骨肉瘤细胞株中表达不同.     

硫化氢抑制骨肉瘤U2OS细胞的体外生长

【目的】 探讨硫化氢单独及与顺铂联用对骨肉瘤细胞生长的影响及其可能机制?【方法】 分别用0.2?0.4?0.6?0.8?1.0?2.0?3.0?4.0?5.0 mmol/L NaHS(硫化氢载体)单独或与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,CCK-8比色法法检测细胞存活率;分别用0.4及1.0 mmol/L NaHS作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,1.0 mmol/L NaHS单独或与20 mg/L顺铂联用作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,细胞单克隆形成法检测各组单克隆数;1.0 mmol/L NaHS与20 mg/L顺铂共同作用骨肉瘤U2OS细胞24 h,Western-Blot法检测Bcl-2?Bax?NFκB蛋白的表达?【结果】硫化氢对U2OS细胞生长的影响:0.2?0.4?0.6?0.8 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P > 0.05); 1?2?3?4?5 mmol/L NaHS作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(90.01 ± 7.49)%?(88.00 ± 4.12)%?(87.26 ± 4.05)%?(85.40 ± 4.39)%和(82.99 ± 4.65)%,与对照组比较,能不同程度抑制U2OS细胞的生长(P 0.05)?NaHS与顺铂联用对骨肉瘤细胞的影响:分别用0.8?1?2?3?4?5 mmol/L NaHS联合20 mg/L顺铂共同作用U2OS细胞24 h,细胞存活率分别为(54.13 ± 4.03)%?(54.09 ± 1.13)%?(50.37 ± 4.56)%?(41.44 ± 3.95)%?(40.00 ± 4.34)%和(36.35 ± 3.90)%,与单用顺铂组(59.76 ± 3.15%)比较,存活率下降(P < 0.05)?NaHS+顺铂组细胞单克隆数为231.00 ± 13.52,与顺铂组(285.67 ± 11.59)比较,细胞单克隆数下降(P < 0.01); NaHS+顺铂组NFκB蛋白表达及Bcl-2/Bax蛋白表达比值较顺铂组下降?【结论】 1 mmol/L浓度以上的NaHS能抑制骨肉瘤细胞的生长,0.8 mol/L浓度以上的NaHS通过减少NFκB入核,增加细胞的凋亡,从而增强顺铂对骨肉瘤细胞的抑制作用?     

超氧化物歧化酶和U74389G对新生鼠高氧肺损伤的治疗作用

目的:探讨抗氧化剂治疗高氧肺损伤的疗效及机制.方法:将新生SD大鼠随机分为对照组、高氧组、SOD组和U74389G组,每组14只.复制高氧肺损伤模型,用SOD和U74389G进行治疗.黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,TUNEL法检测细胞凋亡,观察肺病理变化以及放射状肺泡计数(RAC).结果:高氧组的肺系数、MDA含量和凋亡指数显著高于对照组,RAC明显减少(均 P<0.01);U74389G组及SOD组与高氧组相比,肺系数下降、MDA含量减少、SOD活性增高、凋亡指数下降,RAC升高( P<0.01,P<0.05).高氧组肺组织严重水肿,中性粒细胞浸润,SOD组肺组织病理改变明显减轻,U74389G较高氧组有所减轻.SOD组在缓解肺系数、降低SOD活性及抑制凋亡方面优于U74389G组(P<0.01,P<0.05); U74389G组在抑制MDA含量方面优于SOD组(P<0.01),而两组间RAC差异无显著性.结论:抗氧化剂U74389G和SOD能减轻高氧肺损伤.     

嵌合腺病毒体外对人白血病细胞U937的感染及生长抑制作用

目的研究嵌合腺病毒Ad5f11pTPEGFP对人白血病细胞U937的感染及生长抑制作用。方法以空载体腺病毒Ad5GFP作为对照,将嵌合腺病毒Ad5f11pTPEGFP感染人白血病细胞株U937,通过荧光倒置显微镜、流式细胞术和透射电镜分析病毒对U937细胞的感染性和复制活性;应用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析细胞的增殖反映该病毒对细胞的杀伤作用;通过AnnexinV-APC/7-AAD双染流式细胞术分析早期细胞凋亡率,并采用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的裂解。结果嵌合腺病毒Ad5f11pTPEGFP能感染人白血病细胞株U937,并能在其中复制产生大量子代病毒;该嵌合腺病毒对U937细胞株的感染效率、生长抑制率均高于空载体腺病毒Ad5GFP,差异有统计学意义(P<0.05);嵌合腺病毒Ad5f11pTPEGFP诱导U937细胞发生凋亡的细胞比例较空载体腺病毒Ad5GFP高,差异有统计学意义(P<0.05),并且检测到随时间逐渐增加的PARP裂解蛋白。结论嵌合腺病毒Ad5f11pTPEGFP可有效感染人白血病细胞株U937,并能在其中复制,能显著抑制人白血病细胞株U937生长并诱导其凋亡。     

五种石斛的指纹图谱研究

目的：建立密花、马鞭、短棒、鼓槌和金钗等五种石斛的色谱指纹图谱。方法：采用HPLC/UV/MS技术对五种石斛的色谱指纹图谱进行了研究。结果：建立了五种石斛的HPLC/UV指纹图谱,并对其中三种石斛HPLC/MS指纹图谱中的色谱峰进行了解析,共对15个谱峰进行了化学成分的初步归属。结论：所建立的方法可用于石斛指纹图谱的测定,并为其全面质量控制及化学成分研究提供参考。     

美国儿科药品审批政策概述

简要介绍美国儿科药品审批政策并进行深入分析,总结其成功经验,为建立适合我国的儿科药品审批政策提供参考.     

κ阿片受体与胰岛细胞功能调节的关系

近年来的研究表明,κ阿片受体在促进胰岛α细胞分泌胰高血糖素中可能发挥重要作用,本文就κ受体与胰岛β细胞关系的研究作一综述。     

美国农村卫生人力短缺问题和对策研究

从美国农村地区居民卫生医疗服务需求、供给以及支付能力3个维度分析美国农村地区卫生医疗现状,指出医疗供需不平衡产生的主要原因是农村地区卫生人力资源的短缺.继而分析卫生人力短缺问题产生的根源,总结提炼了美国应对农村卫生人力短缺的各项政策措施并对其效果进行简要评述,希望为我国农村卫生人力资源的培养和发展提供借鉴.     

Hydroxyl Radical-induced Strand Break Formation of Poly(U) in Anoxic Solution. Effect of Dithiothreitol and Tetranitromethane

Summary

The role of dithiothreitol (DTT) and tetranitromethane (TNM) on the yields of radiation-induced strand break formation in polyuridylic acid (poly(U)) was studied in anoxic aqueous solutions at neutral pH by low-angle laser light-scattering. From G (single-strand breaks) as a function of DTT concentration it follows that two different processes lead to OH radical-induced single-strand break (ssb) formation. Only one of the two processes, which accounts for 80 per cent of the ssb formation, is inhibited by DTT, the other one, 20 per cent, is not inhibited. The ‘repair’ process is attributed to H-donation to the C-6-yl radical of the uracil moiety. The C-6-yl radical is produced by OH addition to the C-5 position of the uracil moiety. It follows that the sugar radicals, in contrast to earlier suggestions, do not seem to be repaired by DTT at the low concentrations used. The strand break formation not inhibited by DTT is induced by radicals other than the uracil-6-yl radical, e.g. the uracil-5-yl or the OH radicals reacting with the sugar moiety. The strong reduction of G(ssb) from 2·3 to 0·2 on addition of TNM is also discussed.