西宁地区恶性肿瘤患者的红细胞免疫功能研究

目的：研究西宁地区（海拔2260m）恶性肿瘤的红细胞免疫功能的相关内容。方法：按文献^[2]介绍采用郭峰建立的最常用的三种检测指标和方法。结果：肿瘤病人红细胞C3b受体花环R-C3bR、红细胞免疫粘附肿瘤细胞花环R-TRR低下，与健康人之间有显著性差别，红细胞免疫复合物IC花环R-ICR无统计学差别，肿瘤患者的R-TRR男女之间有显著性差别。各种肿瘤之间三种花环率无统计学差别。化疗前后三种花环率无统计学差别。肿瘤无转移与有转移三种花环率无统计学差别。手术前后三种花环率无统计学差别。结论：西宁地区恶性肿瘤病人的红细胞免疫功能R-C3bR、R-TRR低下，分别为13．4762±3．597，12．0543±5．6095，R-ICR为4.6131±3．4010，与健康人无统计学差别。     

沙漠干热环境下猪腹部肠管火器伤后肝组织中NF-κB 、TNF-α的表达

目的探讨沙漠干热环境下猪腹部肠管火器伤后肝脏组织中核因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及其与肝损伤的关系。方法健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12 h和24 h组,在沙漠干热环境下建立腹部肠管火器伤模型后,用免疫组化及图像分析法测定各组肝脏组织内NF-κB和TNF-α的表达,同时测定血清中ALT水平,在光镜下观察各组肝脏组织学变化。结果伤后各组肝内NF-κB、TNF-α表达明显高于对照组(P<0.05),NF-κB于伤后1 h和4 h出现2个高峰(P<0.05);TNF-α于伤后1h和8 h出现2个高峰(P<0.05);血清ALT水平在伤后明显升高,也于伤后1 h和8 h出现2个高峰(P<0.05);伤后1、2 h组出现逐渐加重的肝细胞水肿、变性,伤后4 h组开始出现逐渐加重的肝细胞点状坏死、灶状坏死和炎细胞浸润,对照组光镜下未见明显的损伤性变化;NF-κB与TNF-α的表达在2 h组和4 h组均有正相关关系(P<0.05)。结论沙漠干热环境下腹部肠管火器伤后肝内NF-κB、TNF-α表达一致性升高,二者在伤后早期表达密切相关,并与肝脏结构和功能损伤变化基本一致,提示NF-κB和TNF-α在沙漠干热环境下腹部肠管火器伤后肝损伤过程中起重要作用。     

大鼠严重创伤后腹腔巨噬细胞Toll样受体2/4基因表达及受体反应性

目的 观察大鼠创伤后腹腔巨噬细胞Toll样受体(TLR)2/4基因表达及受体反应性变化.方法 建立大鼠严重创伤(右侧胸部撞击伤复合双侧股骨闭合性骨折)模型,分别于创伤后2、6、12、24小时取腹腔巨噬细胞,以逆转录-聚合酶联反应(RT-PcR)测定TLR2/4的mRNA表达,以脂多糖(LPS)、Pam3CSK4刺激后取细胞上清液测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 创伤后2小时腹腔巨噬细胞TLR2、TLR4的mRNA表达较正常对照组降低(P<0.05),直至创伤后24小时.行不同浓度LPS、PandCSK4刺激后细胞上清液TNF-α水平较对照组降低(P<0.01).结论 严重创伤后腹腔巨噬细胞TLR2/4基因表达降低,受体反应性下降.     

Effects of anesthetic agents on cellular <Superscript>123</Superscript>I-MIBG transport and in vivo <Superscript>123</Superscript>I-MIBG biodistribution

Objectives Small animal imaging with meta-iodobenzylguanidine (MIBG) allows characterization of animal models, optimization of tumor treatment strategies, and monitoring of gene expression. Anesthetic agents, however, can affect norepinephrine (NE) transport and systemic sympathetic activity. We thus elucidated the effects of anesthetic agents on MIBG transport and biodistribution. Methods SK-N-SH neuroblastoma and PC-12 pheochromocytoma cells were measured for ¹²³I-MIBG uptake after treatment with ketamine (Ke), xylazine (Xy), Ke/Xy, or pentobarbital (Pb). NE transporters were assessed by Western blots. Normal ICR mice and PC-12 tumor-bearing mice were injected with ¹²³I-MIBG 10 min after anesthesia with Ke/Xy, Ke, Xy, or Pb. Plasma NE levels and MIBG biodistribution were assessed. Results Cellular ¹²³I-MIBG uptake was dose-dependently inhibited by Ke and Xy but not by Pb. Treatment for 2 h with 300 μM Ke, Xy, and Ke/Xy decreased uptake to 46.0 ± 1.6, 24.8 ± 1.5, and 18.3 ± 1.6% of controls. This effect was completely reversed by fresh media, and there was no change in NE transporter levels. In contrast, mice anesthetized with Ke/Xy showed no decrease of MIBG uptake in target organs. Instead, uptakes and organ-to-blood ratios were increased in the heart, lung, liver, and adrenals. Plasma NE was notably reduced in the animals with corresponding decreases in blood MIBG, which partly contributed to the increase in target organ uptake. Conclusion In spite of their inhibitory effect at the transporter level, Ke/Xy anesthesia is a satisfactory method for MIBG imaging that allows favorable target tissue uptake and contrast by reducing circulating NE and MIBG. Bong-Ho Ko and Jin-Young Paik equally contributed to this work. This work was supported by the Korea Research Foundation Grant KRF-2005-202-E00116. Presented in part at the fifth Annual Meeting of the Society for Molecular Imaging, Hawaii, August 30–September 2, 2006.     

TNF-α对大鼠Leydig细胞的作用及机制研究

目的观察TNF-α对睾丸细胞功能的影响并探讨其可能机制。方法通过Percoll不连续密度梯度分离获取大鼠Leydig细胞进行原代培养。HE染色进行细胞形态学观察。Leydig细胞培养48h后在培养液中分别加入不同浓度的大鼠TNF-α,使其终浓度达到0.1、1、10、100ng/ml,分别在培养的第1、2、3、4天取上清,通过放免法测定上清液中睾酮的含量,应用MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞术与丫啶橙(AO)染色检测及观察Leydig细胞凋亡情况。结果原代细胞通过提纯后的细胞纯度可达70%~80%。HE染色后可见细胞胞质含量丰富,含有分泌颗粒,胞核圆。TNF-α在0.1~100ng/ml浓度范围内能呈剂量依赖的方式抑制Leydig细胞睾酮的基础分泌。0.1、1、10、100ng/mlTNF-α作用24h后,对Leydig细胞睾酮分泌量的抑制率分别为22.03%、34.98%、52.95%、74.83%。各组Leydig细胞睾酮的分泌量随时间延长呈减少的趋势,但除100ng/ml组外,其他各组各时间点比较差异无统计学意义。高浓度TNF-α(10、100ng/ml)组具有抑制Leydig细胞增殖和促进其凋亡作用,其增殖抑制率分别达到38.35%±4.17%、76.35%±8.65%,而凋亡率分别为13.23%±1.11%、26.43%±5.82%,与对照组比较有统计学意义(P<0.01)。AO染色见高浓度TNF-α(10、100ng/ml)组出现明显的细胞凋亡。结论TNF-α对Leydig细胞睾酮的基础分泌具有抑制作用,在较高浓度时该作用可能与其抑制Leydig细胞增殖并促进细胞凋亡有相关。     

体外冲击波疗法联合钻孔减压术治疗战士训练后股骨头缺血性坏死的效果观察

目的探讨战士训练后股骨头缺血性坏死(ANFH)的发病机制及体外冲击波疗法(ESWT)的疗效。方法ARCO分期Ⅰ-Ⅲ期的股骨头坏死战士(排除股骨颈骨折后股骨头坏死者)108例,男86例,女22例,年龄18~25岁,由患者自愿选择治疗方法。其中50例采用ESWT联合钻孔减压术治疗,于钻孔减压术后第2天将9~12kV(0.16~0.22mJ/mm2)的体外冲击波作用于患处,治疗后6、12个月复查双髋X线、MRI及髋关节Harris评分(HHS)。58例患者采用单纯钻孔减压术治疗。对两组治疗结果进行统计学分析。结果随访两组中均无ANFH恶化。ESWT治疗后ARCOⅠ、Ⅱ、Ⅲ期病例股骨头坏死区分别减小了22.9%、32.8%、34.3%,其中ARCOⅡ、Ⅲ期改善程度明显优于单纯钻孔减压治疗组(P<0.01)。治疗后6、12个月复查显示,ESWT联合钻孔减压治疗组HHS升高较早、较快,由54.2分分别升至90.2、83.2分,疗效优于单纯钻孔减压治疗,其中ARCOⅡ、Ⅲ期改善程度明显优于单纯钻孔减压治疗组(P<0.01)。结论ESWT对早中期ANFH疗效显著,有望在临床治疗骨肌系统慢性损伤性训练伤中发挥更为积极的作用。     

CT检查中窗技术的合理应用对提高肝内病灶检出率的意义

目的评价在传统软组织窗基础上加用肝组织窗对提高肝内病灶检出率的意义。方法接受腹部CT增强扫描的859例患者的895张顺序编号的CT片是由两位有经验的放射学医师评价的。所有的肝脏成像均采用两种窗技术进行，即起初软组织窗和随后肝组织窗。逐例记录了两种技术检出的病灶数与符合率。确定了利用肝组织窗有新增病灶的患者比例。对两种窗技术在检出病灶数方面的差异进行了统计学分析。结果在859例中，205例（24％）患者在软组织窗和肝组织窗上有肝脏病灶，其中，40例（14．6％）患者随着肝组织窗的加用，检出的病灶数亦增多。这40例中的14例患者具有在软组织窗上看不见的新增病灶。两种窗技术的病灶检出率有统计学差异（P〈0．05）。结论 单一的软组织窗不足以全部发现肝内病灶，因此，有些病灶容易漏诊，而肝组织窗的加用，可有效提高肝脏病灶的检出率与诊断准确性。     

低剂量辐射增强小鼠肿瘤基因-放射治疗效应的免疫学机制研究

目的 探讨低剂量辐射全身照射对小鼠Lewis肺癌移植肿瘤基因-放疗方案中的免疫增强作用机制。方法 小鼠右后肢皮下接种Lewis肺癌细胞建立荷瘤模型,基因-放疗组中小鼠肿瘤局部注射由多聚乙烯亚胺包裹的pEgr-IL18-B7.1重组质粒,分别接受由2 Gy 局部照射和0.075 Gy 全身照射组合的不同治疗方案,通过³H-TdR标记方法检测小鼠CTL和NK细胞毒活性,ELISA方法检测TNF-α和IFN-γ分泌活性,观察各治疗组对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的作用。结果 在pEgr-IL18-B7.1基因治疗方案中,单次大剂量辐射局部照射后加多次低剂量全身照射与常规多次大剂量辐射局部照射相比,小鼠CTL和NK细胞毒活性显著增强,TNF-α和IFN-γ分泌活性有不同程度的增高。 结论 低剂量辐射可以通过促进CTL和NK细胞毒效应,上调TNF-α和IFN-γ细胞因子表达,从而增强机体抗肿瘤免疫功能,提高肿瘤基因-放疗的抑瘤效果。     

细胞间隙通讯对重离子辐射效应的影响

目的 探索细胞间隙通讯(GJIC)对重离子辐射细胞效应的影响及其机制。方法 受到不同试剂处理的AG1522细胞和HSG细胞在高能碳离子束辐照后,检测其细胞损伤。结果 重离子辐照对细胞产生致死性损伤、细胞周期的阻滞,且AG1522比HSG具有更高的辐射敏感性。对AG1522细胞单层,GJIC可以正向调控辐射损伤。但对HSG细胞单层,受到增强的GJIC则对细胞具有辐射保护作用。另外,DMSO降低了AG1522细胞的微核率,但PTIO可增强HSG的微核率。结论 GJIC对正常母细胞和肿瘤细胞的辐射损伤具有不同的作用,ROS和NO是其中重要的信号因子。     

hTERT启动子调控hNIS基因介导肺癌细胞碘摄取和131I治疗的实验研究

目的 构建含人端粒酶反转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠/碘同向转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并靶向转染至肺癌A549细胞中特异性表达.探讨hTERT启动子调控的hNIS基因介导放射性碘治疗肿瘤的可能性.方法 应用AdEasy系统构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS,同时构建巨细胞病毒(CMV)启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV.hNIS作为阳性对照,不含hNIS的重组腺病毒Ad-CMV作为阴性对照.应用反转录.聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性,摄碘实验检测表达的hNIS蛋白功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤细胞的毒性作用.结果 成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS及Ad-CMV,并经PCR验证正确.RT-PCR证实hNIS cDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞摄碘能力比阴性对照组Ad-CMV转染的细胞分别提高了23和31倍,且摄碘能力可以被NaClO4抑制.Ad-hTERT-hNIS和Ad-CMV-hNIS转染的肺癌A549细胞均可被131I杀死,2组细胞成活率分别为(31.2±1.45)%和(23.6±4.08)%,而阴性对照组和未转染病毒组分别为(89.0 ±2.99)%和(91.2 ±4.63)%.结论 hTERT启动子调控的hNIS重组腺病毒转染肿瘤细胞后,应用131I治疗有望成为一种新的基因靶向治疗手段.