双拷贝tylD、tylF和tylJ弗氏链霉菌工程菌株构建及其发酵性能研究

以弗氏链霉菌工业生产菌株基因组DNA为模板，扩增泰乐星生物合成及组分转化关键基因tylD、tylF和tylJ，构建双拷贝tylD、tylF、tylJ弗氏链霉菌工程菌株。通过摇瓶发酵验证了工程菌株泰乐菌素发酵效价，并对筛选的一株工程菌利用荧光定量PCR检测其tylD、tylF和tylJ基因表达情况。研究结果表明，双拷贝tylD、tylF、tylJ弗氏链霉菌工程菌株泰乐菌素摇瓶发酵效价较出发菌株最高提高了28.1%，该菌株tylD、tylF、tylJ表达水平高于出发菌株，并且在进入稳定期后期表达量达到最大值。构建双拷贝tylD、tylF、tylJ弗氏链霉菌工程菌株可解除泰乐菌素合成限速环节，大幅度的提高泰乐菌素产量。     

抗生素链霉菌合成喷司他汀发酵工艺的关键原料研究

目的 通过抗生素链霉菌对发酵培养基和发酵工艺优化,对发酵过程中所用的关键原料进行了研究,提高喷司他汀的发酵产量。方法 考察和评估抗生素链霉菌发酵生产喷司他汀发酵培养基中的关键原料,研究关键材料的供应商及用量,提高喷司他汀产量,于5000L发酵罐上进行发酵工艺验证试验。结果 喷司他汀摇瓶发酵单位达232mg/L,结果较原始工艺提高了28%;在5000L发酵罐发酵单位达210mg/L,较原始工艺提高了74%。 结论 控制发酵培养基中的植物油种类、来源和用量,能有效提高喷司他汀的生物合成。     

海洋放线菌Streptomyces sp.(No.172221)次生代谢产物研究

目的研究一株海洋放线菌Streptomyces sp.(No.172221)的次生代谢产物。方法采用各种色谱方法进行成分分离,综合运用多种波谱学手段确定单体化合物的结构。结果分离到8个化合物,鉴定其结构分别为麦角甾-3β,5α,6β-三醇(1);麦角甾-3β,5α,6β-三醇-3-Ο-β-D葡萄糖苷(2);N-苯甲基氨基甲酸(3);1,3-丙二醇苯乙酸酯(4);环(脯-亮)二肽(5);环(脯-缬)二肽(6);脯氨酸(7)和腺嘌呤核苷(8)。结论化合物1和2为甾体类化合物,其中化合物2为首次从放线菌中分离得到,化合物3、4为新天然产物,化合物5和6为常见的细菌代谢产物环二肽类。     

阿弗菌素链霉菌突变株AV-m-481发酵产物的研究

高产菌株Streptomyces avermitilis AV-h-169用亚硝基胍进行处理后得到了一不产阿弗菌素的突变株AV-m-481，从该突变株的发酵产物中分离纯化出化合物AV-L-1和AV-L-2。质谱和核磁共振谱等测定表明它们分别为阿弗菌素A1a和A2a的糖苷配基。     

天然吩嗪化合物的生物合成

吩嗪化合物种类繁多,天然吩嗪化合物多具有广谱的抗菌、抗肿瘤活性,在医药、农业等领域有着广泛的应用.天然吩嗪化合物主要由假单胞菌和链霉菌等微生物产生,而莽草酸代谢途径、莽草酸代谢替代途径和吩嗪修饰途径为普遍公认的吩嗪的生物合成途径.     

链霉菌属微生物来源的生物活性天然产物

链霉菌属微生物可合成结构多样且具有多种生物活性的天然产物,如抗微生物、抗肿瘤、酶抑制等。本文就近年来从链霉菌属微生物中分离得到的生物活性天然产物进行综述。     

维吉霉素类抗生素新化合物X-435-C的产生菌X-435的初步分类鉴定

菌株Ｘ－４３５是从我国土壤中分离得到的一株维吉霉素（ｖｉｒｇｉｎｉａｍｙｃｉｎ）类抗生素产生菌,它与已经 维吉霉素类抗生素的产生菌相比较,在气丝的颜色、孢子莲的形状和孢子的表面形态等方面比较接地菌株Ｓ．ｇｒａｍｉｎａｆａｃｉｅｎｓ（ＩＦＯ１３４５５）、Ｓ．ｐｒｉｓｔｉｎａｅｓｐｉｒａｌｉｓ（ＩＦＯ１３０７４）。因此,进一步对这三株菌进行ｒＤＮＡ同源性分析,结果表明,菌株Ｘ－４３５与ＩＦＯ１３０７４     

天蓝淡红链霉菌SIPI 1482及其突变株的研究：Ⅱ.钠离子？…

ＳＩＰＩ １４８２－ＢＳ－４柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌ＳＩＰＩ １４８２经紫外诱变获得的阻断突变株,没有合成柔红霉素的能力。但在ＧＭ培养其中添加２％ＮａＣｌ后,该突变株的菌体生长量虽有所减少,却能恢复合成柔红霉素２２％～２４％（以亲株为对照）。研究还发现使突变株恢复合成柔红霉素起主要作用的是Ｎａ＾＋,而非离渗透压、Ｃｌ＾－１或整个ＮａＣｌ分子。     

紫外诱变和氨基酸抗性筛选选育那西肽高产菌株

目的 筛选出那西肽高产菌株.方法 以活跃链霉菌CB040517作为出发菌株,通过紫外-氧化锂诱变处理,并结合前体复合氨基酸抗性筛选,选育那西肽高产菌.结果 通过致死率和正突变率的考察,确定紫外最佳诱变剂量为100s.在分离培养基上层加入氯化锂和底层加入复合氨基酸进行正突变株的定向筛选,选育得到那西肽高产菌株UV-19-A12,其摇瓶效价达904.00μg/mL,比出发菌株提高72.5%,经过五代斜面传代试验考察,该菌株遗传性状稳定.结论 紫外诱变和氨基酸抗性筛选可以获得那西肽高产菌株.     

梅岭霉素发酵的温度控制策略研究

以南昌链霉菌为出发菌株，研究了摇瓶发酵过程不同温度控制条件（26－32℃）下，梅岭霉素发酵过程的动力学特性，并分析了不同温度下细胞代谢规律及温度对细胞比生长速度和梅岭霉素合成速率的影响，得出了摇瓶发酵生产梅岭霉素的分阶段温度控制策略，即在发酵中前期（0－76h)，控制温度为30℃，发酵中后期（76h左右）温度切换到28摄氏度，并在15L发酵罐上分批发酵得到验证。