大孔吸附树脂分离纯化鱼腥草总黄酮

目的：研究大孔吸附树脂分离纯化鱼腥草总黄酮工艺，为鱼腥草总黄酮的工业化生产提供实验依据。方法-以贵州产鱼腥草为原料，以鱼腥草总黄酮含量及回收率等为考察指标，选用大孔吸附树脂对鱼腥草总黄酮进行分离纯化，分别采用静态试验、动态试验等考察大孔树脂对鱼腥草总黄酮的分离纯化效果及影响因素。结果：AB-8型大孔吸附树脂对鱼腥草总黄酮静态饱和吸附量为76．20mg．g-1（干树脂），洗脱率97．35％，动态饱和吸附量为74．5mg．g-1（干树脂），总黄酮回收率在82．8％、纯度在80％以上，是实验树脂中分离纯化鱼腥草总黄酮的最佳大孔吸附树脂。结论：分离纯化鱼腥草总黄酮最佳工艺条件为：AB-8型大孔吸附树脂，洗脱剂为70％乙醇，洗脱剂用量为2～3倍树脂体积，上柱总黄酮量与树脂比为1：13．4，上柱液总黄酮浓度为17．57mg．mL-1，流速2-3m1．min-1，上柱液pH4-5。     

半夏多倍体复合体基因组DNA甲基化状态的MSAP分析

目的分析半夏多倍体复合体DNA甲基化状态的变化(甲基化水平和甲基化差异模式)。方法应用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术,采用34对引物进行选择性扩增。结果扩增共得到7708条带,其中5636条带为甲基化多态性带在半夏7倍、8倍、9倍、10倍体值株间DNA甲基化水平变化不大。总扩增位点甲基化水平在54%～58%,全甲基化率为24.1%～24.3%,高倍性植株甲基化程序相应比较高。除甲基化水平稍有变化外,半夏不同倍性株间的DNA甲基化模式也形式各异,检测到的带型分为两大类(和型)。其中,不同倍性间DNA甲基化状态保持不变的位点占52.5%,归为型;少部分检测位点(占47.5%,归为型)的DNA甲基化模式在不同倍性间存在显著差异。结论半夏多倍体复合体各倍性植株间存在大量的胞嘧啶甲基化变异且整体甲基化水平较高。     

白英甾体皂苷组分诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡的研究

目的：探讨白英甾体皂苷组分体外抑制人卵巢癌细胞（SKOV3）及诱导凋亡的作用。方法：MTT法测定SKOV3细胞体外增殖情况、姬姆萨-瑞氏染色观测形态学改变、通过流式细胞仪及Caspase-3和Caspase-9活化程度检测研究细胞凋亡及其途径。结果：白英甾体皂苷组分能显著抑制SKOV3细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,上调Caspase-3和Caspase-9的活性。     

可见光及紫外光分光光度法测定丁香总黄酮含量的研究

目的研究可见光及紫外分光光度法测定丁香总黄酮含量的方法。方法可见光分光光度法是以芦丁为参照品,硝酸铝作显色剂,在510 nm波长测定总黄酮含量。紫外分光光度法是以芦丁为参照品,在359 nm波长测定总黄酮含量。结果可见光法平均回收率是99.46%,紫外光法是99.13%。RSD分别是1.15%和0.90%。结论紫外分光光度法是一种较理想的测定方法。     

RP-HPLC法测定鬼箭羽中3种活性成分的含量

目的:建立同时测定鬼箭羽中降糖活性成分山柰酚、柚皮素及槲皮素含量测定的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以AlltimaC18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%甲酸(38:62)为流动相,检测波长258nm,流速0.8mL/min,柱温30℃。结果:山柰酚、柚皮素及槲皮素的线性范围分别为0.02064~0.2580μg(r=0.9996),0.05592~0.699μg(r=0.9997),0.01656~0.207μg(r=0.9998);加样回收率分别为100.6%(RSD=2.5%),96.4%(RSD=1.1%),101.9%(RSD=1.7%)。结论:本法简便、准确、重现性好,适用于鬼箭羽中3种活性成分的同时测定,可用于鬼箭羽药材的质量控制。     

中药何首乌总基因组DNA的提取

目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。     

A new phenylethanoid glycoside from the fruits of <Emphasis Type="Italic">Callicarpa japonica</Emphasis> Thunb. var. <Emphasis Type="Italic">luxurians</Emphasis> Rehd.

A new phenylethanoid glycoside, named acetyl forsythoside B (1), was isolated from the fruits of Callicarpa japonica Thunb. var. luxurians Rehd. (Verbenaceae) along with forsythoside B (2), brandioside (3), poliumoside (4), actioside (5), and apigenin 7-galacturonide (6). The structures of 1–6 were determined on the basis of spectroscopic data. In addition, the antioxidative activity of 1–4 and 6 was evaluated by the ferric thiocyanate method. All of the tested compounds except 6 exhibited almost the same activity as 3-tert-butyl-4-hydroxyanisole. The radical-scavenging effect of 1–6 on the stable free radical 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl was also examined. Compounds 1–5 showed almost twice the activity compared to α-tocopherol.     

苦丁茶的本草及植物来源考证

根据古代、近代及现代文献记载,对苦丁茶进行本草及植物来源考证,认为苦丁茶植物来源有三：一是冬青冬冬青属为主的枸骨、大叶冬青、苦丁茶冬青等;二是从木犀科女贞属植物为主的变紫女贞、女贞、日本毛女贞等;三是上述两类的混淆品,如木犀科牛矢果等。经考证冬青科大叶冬青与苦丁茶冬青当为苦丁茶的正品。     

白英提取液对Hela细胞凋亡及P53和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及野生型P53(wtP53)和Bcl-2蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜检测癌细胞形态变化,TUNEL法检测凋亡率,二步法免疫组化检测P53和Bcl-2蛋白表达变化。结果白英提取液能够抑制Hela细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态特征;细胞凋亡率随白英提取液浓度增加而升高;P53蛋白表达显著上升(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论白英提取液能促进Hela细胞凋亡,其分子机制可能与上调野生型P53蛋白表达和下调Bcl-2蛋白表达有关。