基于指纹图谱及多指标成分定量的丹参提取工艺对比研究

目的 对已上市制剂中丹参不同提取工艺的提取效果进行对比分析.方法 按照冠心丹参胶囊、复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参片4种代表制剂的提取工艺制备丹参提取液,研究建立同时测定提取液指纹图谱及多指标含量的HPLC方法,测定不同丹参提取液的丹参素钠、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量及指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件计算指纹图谱的相似度.结果 4种丹参提取液中丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量分别为0.27~1.25、1.44~4.46、33.77~93.92 mg·g-1;冠心丹参胶囊与丹参片、复方丹参滴丸、复方丹参片的指纹图谱相似度分别为0.781、0.853、0.758,复方丹参滴丸与复方丹参片的指纹图谱相似度为0.879.结论 4种代表制剂丹参提取工艺的丹参酮ⅡA、丹参素钠、丹酚酸B含量及指纹图谱均存在明显差异,针对相同的临床适应症,需深入研究以实现丹参工艺的标准化、规范化.     

板蓝根蛋白的表征及响应曲面法优化其超声辅助提取工艺研究

目的?表征板蓝根蛋白的分子量组成,优化板蓝根蛋白超声提取工艺。方法?运用响应曲面法,以蛋白得率为评价指标,对提取时间、液料比及pH值3个影响因素进行考察,优化板蓝根蛋白的提取工艺,另以Design Expert软件对数据进行综合统计分析;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法表征板蓝根蛋白的分子量分布;应用扫描电镜技术观察超声提取前后板蓝根药材粉末的微观结构。结果?最优工艺条件是以pH值为7.8的50?mmol/L Tris-HCl为溶剂,液料比为80∶1,超声提取2次,每次提取65?min,按该工艺进行试验所得板蓝根蛋白得率为0.705%;板蓝根蛋白5个分子量段的蛋白分别为19.2、21.5、24.8、34.0~43.0?kDa 和>170?kDa。结论?运用响应曲面法优选的板蓝根蛋白提取工艺稳定可行,可用于板蓝根蛋白的提取。      

黄芪HPLC-ELSD指纹图谱的建立及分析

[目的]建立不同批次黄芪指纹图谱的分析方法。[方法]采用高效液相-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)以Grace Apollo C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,蒸发光散射检测器,漂移管温度60℃,雾化器cooling,气压30 psi(2.07 slpm),增益100。[结果]建立的黄芪指纹图谱各色谱峰分离度较好,达到指纹图谱要求,相似度评价结果均大于0.96,证明不同批次间药材比较稳定。聚类分析法把12个批次的黄芪样品分为3类。建立了黄芪药材的HPLC-ELSD指纹图谱共有模型,找出了较大的17个共有峰。[结论]为更好的控制黄芪的内在质量提供了可靠的分析方法。     

基于差示浓度法的远志及其炮制品中三种成分的分析

[目的] 采用差示浓度法分析远志及其炮制品中远志（口山）酮Ⅲ（PXⅢ）、3,6''-二芥子酰基蔗糖（DISS）、甘草酸（GA）的含量,以GA为标志物区分制远志与生远志、蜜远志。[方法] 采用超高效液相色谱法（UPLC）,以甲醇-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL/min;柱温60℃;检测波长320、237 nm;进样量2 μL;测定高浓度供试品溶液中低含量成分（GA）,测定低浓度供试品溶液中高含量成分（PXⅢ、DISS）。[结果] 差示浓度法能够分析远志及其炮制品中含量悬殊的PXⅢ、DISS和GA的含量。[结论] 该方法灵敏度高、准确性好,以GA为标志物能够区分制远志与生远志、蜜远志。     

新疆、甘肃地区甘草质量评价研究

目的 比较新疆与甘肃地区甘草的性状、鉴别特征和有效成分含量,研究在不同生长条件下我国甘草主产区的药材和饮片质量,为甘草的后续开发与利用提供理论依据。方法 采用性状鉴别法对性状进行描述,采用显微鉴别法展现甘草粉末和切片的结构特征,采用高效液相色谱法测定有效成分含量。结果 在性状方面,新疆甘草药材比甘肃甘草药材平均直径略大;在显微方面,两个产地具有基本相同的结构,但新疆家种甘草的淀粉粒数量略多,且平均粒径也略大;在含量方面,新疆甘草中甘草酸平均含量约为甘肃甘草酸平均含量的1.5倍。结论 新疆、甘肃地区甘草的鉴别和质量评价为甘草药材的质量标准研究及甘草药材的后续开发提供理论依据。     

苦参对耐吉非替尼人肺腺癌PC9/ZD细胞上皮间质转化及吉非替尼药物敏感性的影响

目的探讨苦参对耐吉非替尼人肺腺癌PC9/ZD细胞上皮间质转化及吉非替尼药物敏感性的影响。方法选取对细胞无毒性作用的苦参浓度,采用体外苦参作用于耐吉非替尼人肺腺癌PC9/ZD细胞;分为对照组、吉非替尼组、苦参联合吉非替尼组。分别通过MTT法、Transwell实验检测各组人肺腺癌PC9/ZD细胞增殖及侵袭能力,Western blot实验检测EMT相关蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 MTT法检测结果显示,苦参联合吉非替尼组人肺腺癌PC9/ZD细胞增殖抑制率(74.59±3.21)%,明显高于吉非替尼组(33.46±0.84)%(P0.05);Western blot实验结果显示,在苦参作用下,吉非替尼诱导的人肺腺癌PC9/ZD细胞波形蛋白及N钙黏蛋白表达下调,E钙黏附分子表达上调;Transwell实验检测结果显示,苦参联合吉非替尼组人肺腺癌PC9/ZD细胞侵袭率(48.59±7.26)%,较吉非替尼组(64.23±8.04)%和对照组(91.03±11.02)%明显降低(P均0.05);流式细胞术检测结果显示,对照组人肺腺癌PC9/ZD细胞凋亡率(31.14±5.26)%,吉非替尼组(56.48±8.77)%,苦参联合吉非替尼组(76.25±10.28)%,三组间人肺腺癌PC9/ZD细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论苦参可逆转人肺腺癌PC9/ZD细胞上皮间质转化,增加对吉非替尼药物敏感性。     

李学铭温肾化气法治疗阴水水肿

李学铭教授治疗阴水水肿强调温肾化气,行水消肿。常以生地黄、山茱萸、山药、茯苓、淡附片、黄芪、党参、甘草八味药合为主方,方中重用附子温阳,黄芪补气,茯苓健脾渗湿,或加干姜、炮姜助热,而慎用利水伤肾之品。李老认为治疗肾性水肿,只要辨证得当,即当守方,切忌短期内不效更方,使换方无数而病不得愈。     

应用数据挖掘技术筛选的抗癌中药对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移的影响

【目的】基于数据挖掘技术筛选具有较明显抑制三阴性乳腺癌作用的中药。【方法】收集近15年关于乳腺癌中医治疗的有效文献,采用频次和聚类分析确定高频中药,制备其含药血清,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和Transwell小室侵袭、迁移实验,分别观察各高频中药含药血清作用三阴性乳腺癌细胞(MDB-MB-231)12、24 h后细胞增殖、迁移和侵袭能力变化。【结果】筛选出的高频使用中药为川芎、蒲公英、白花蛇舌草、天花粉、牛膝。这5种中药的含药血清对MDB-MB-231细胞的增殖能力均具有不同程度的抑制作用,其中蒲公英、白花蛇舌草、牛膝对MDB-MB-231细胞迁移能力具有较强的抑制作用,蒲公英、川芎、白花蛇舌草对MDB-MB-231细胞侵袭能力具有明显抑制作用。【结论】运用数据挖掘技术得到的高频中药川芎、蒲公英、白花蛇舌草、天花粉、牛膝等具有明显的抑制三阴性乳腺癌作用。     

岗藿抗感汤联合达菲治疗病毒性肺炎的临床疗效观察

【目的】探讨岗藿抗感汤治疗病毒性肺炎的有效性和安全性,为岗藿抗感汤Ⅲ期临床试验给药剂量和疗程提供依据。【方法】采用单一中心、随机、单盲、平行对照设计,按照随机数字表法将符合条件的30例病毒性肺炎(非重症)患者随机分为治疗组17例和对照组13例。2组均给予补液、营养支持、西药退热及必要时化痰等对症治疗,治疗组在对症治疗基础上,给予岗藿抗感汤(由银翘散加岗梅根、藿香、羌活等组成)联合奥司他韦(达菲)治疗,对照组在对症治疗基础上单用奥司他韦治疗。2组均服药5 d。观察2组在退热时间、肺炎吸收情况、中医证候积分改善情况等方面的差异,检测2组血中炎症因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)等指标的变化情况,评价其临床证候疗效和药物的安全性。【结果】(1)治疗组的退热时间低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)治疗后,2组的中医证候积分均较治疗前显著下降(P0.01),但治疗后组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。(3)治疗后,2组肺炎吸收情况评分比较,差异无统计学意义(P0.05)。(4)治疗后,治疗组IL-6、TNF-α水平较治疗前有所下降(P0.01),IL-10、IFN-γ水平较治疗前有所上升(P0.01);而对照组治疗后仅IL-10、IFN-γ水平较治疗前有所上升(P0.05)。组间比较,治疗组在改善IL-10、IFN-γ水平方面优于对照组(P0.05或P0.01)。(5)治疗后,治疗组和对照组的总有效率均为100.00%,2组临床证候疗效比较,差异无统计学意义(P0.05)。(6)治疗期间,治疗组出现1例不良事件,该患者服药后出现腹泻、溏便,经对症治疗后好转。该患者的其余相关安全性指标,包括三大常规(血、尿、大便常规)、心电图、肝肾功能等在治疗后均未发现明显异常。【结论】岗藿抗感汤联合奥司他韦治疗病毒性肺炎,取得较好的临床疗效,较单用奥司他韦治疗,患者的退热时间缩短,临床症候减轻,这可能与岗藿抗感汤有抑制炎症、调节免疫等作用有关。     

基于R语言的近红外光谱对甘草中指标成分定量分析

目的:建立较优的甘草质控成分(水分、总灰分、甘草苷、甘草酸)的近红外定量模型,实现快速检测。方法:基于2015年版《中国药典》方法测定97批甘草中水分、总灰分、甘草苷及甘草酸的含量。采用近红外光谱仪扫描其近红外光谱。采用R语言筛选最佳光谱预处理方法,建立近红外定量模型。结果:水分和甘草苷近红外定量模型的最佳预处理方法为一阶导数,其中水分测试集和验证集的相关系数分别为0.930 0和0.929 9,均方根误差分别为0.243 2和0.203 8,甘草苷测试集和验证集的相关系数分别为0.930 3和0.907 6,均方根误差分别为0.093 9和0.128 9;总灰分近红外定量模型的最佳预处理方法为MSC,测试集和验证集的相关系数分别为0.926 5和0.917 7,预测均方根误差分别为0.109 6和0.103 7;甘草酸近红外定量模型的最佳预处理方法为SNV,测试集和验证集的相关系数分别为0.918 1和0.915 7,预测均方根误差分别为0.274 8和0.236 0。结论:该研究建立了较优的甘草质控成分的近红外定量模型,其模型的准确度均较高,为实现快速检测奠定了基础。