槲皮素分子烙印聚合物的单体优化、性能评价及其在薄层色谱分离中的应用

以黄酮类化合物槲皮素为模板,选用甲基丙烯酸(MAA)、丙烯酰胺(AM)、N,N-二乙基胺乙基甲基丙烯酸酯(DEAEM)、2-乙烯吡啶(2-VP)为功能单体,制备对槲皮素具有特定亲和性和选择性的分子烙印聚合物,采用平衡结合实验考察它们对底物的吸附特性,发现以离子作用结合的功能单体2-VP和DEAEM对槲皮素具有较好的烙印效果。研究并将这种烙印聚合物作为薄层色谱的固定相,成功地分离了模板分子及其结构类似物。此外本文还考察了聚合物的粒度和重复使用次数对吸附效果的影响。     

反相高效液相色谱法测定绞股蓝50%总皂苷提取物中芦丁和槲皮素的含量

目的建立绞股蓝50%总皂苷提取物中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱仪,使用TURN-ER KromasilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.4%磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱,流速为0.5 ml.min-1,检测波长为360 nm;柱温为40℃。结果芦丁在0.37~3.70μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 9。槲皮素在0.05~0.50μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 9;芦丁的平均加样回收率为99.2%,RSD为1.69%;槲皮素的平均加样回收率为99.1%,RSD为2.21%。结论该方法简便快捷,准确度高。     

HPLC法测定黄芪中槲皮素和山奈酚的含量

目的:建立黄芪中槲皮素和山奈酚含量的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法(HPLC)测定不同来源黄芪中槲皮素和山奈酚含量。结果:不同来源样品中2种黄酮苷元的定量分析结果分别为槲皮素平均回收率97.88%,RSD=1.07%;山奈酚平均回收率为99.83%,RSD=1.10%。结论:黄芪中含有槲皮素和山奈酚,其含量随产地而变化。     

芦丁与槲皮素对成骨细胞代谢影响的比较研究

目的:对比研究芦丁(Rutin)与其苷元槲皮素(Quercetin)对成骨细胞形成的影响,以探讨二者防治骨质疏松的作用机理。方法:新生大鼠颅骨分离培养成骨(ROB)细胞,MTT法测定细胞增殖,比色法测定碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红(AR-S)染色法测定矿化结节数,以观察Rutin与Quercetin对ROB细胞骨形成过程中增殖、分化和矿化作用的影响。结果:Quercetin可明显促进ROB细胞的增殖与矿化,故能增强ROB细胞形成活性;Rutin仅能促进ROB细胞增殖,而对矿化作用无影响,却能抑制ROB细胞分化,因而无明显促进骨形成活性。结论:Querce- tin中3-OH形成糖苷(Rutin)后可引起体外培养的成骨细胞活性降低,故含有Rutin的食物或中药防治骨质疏症的机理可能是通过其体内代谢物Quercetin刺激成骨细胞形成而发挥作用的。     

肺气肿胶囊中的槲皮素和山柰素的含量测定

目的建立肺气肿胶囊中槲皮素和山柰素含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,使用C18柱,流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(60∶40),检测波长为370 nm,流速为0.6 m l/m in。结果槲皮素和山柰素分别在0.008~0.06μg和0.006 88~0.0516μg范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为97.34%和97.72%,RSD分别为2.4%和1.3%(n=5)结论该方法灵敏准确,重现性好,专属性强,可作为肺气肿胶囊的质量控制。     

Free radical scavengers from the heartwood of Juniperus chinensis

The antioxidant activity of Juniperus chinensis (Cupressaceae) was determined by measuring the radical scavenging effect on DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). The methanolic extract of J. chinensis heartwood showed the strong antioxidant activity. The antioxidant activity of n-BuOH soluble fraction was stronger than that of the others, and the fraction was subjected to purification by repeated silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography. Quercetin, naringenin, taxifolin, aromadendrin and isoquercitrin were isolated from the n-BuOH fraction. Their structures were elucidated by physico-chemical and spectroscopic studies.     

槲皮素对小鼠免疫功能影响研究

目的：研究槲皮素对小鼠免疫作用的影响。方法：将小鼠分为低、中、高3个剂量组，分别为0．23、0．46、0．69g／kg槲皮素组和空白对照组、溶剂为对照组。小鼠连续灌胃30天后开始试验，分别进行免疫指标测定。结果：各剂量组与空白组比较，小鼠淋巴器官／体重比值差异均无显著性。中、高剂量组能明显增强二硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应、明显增强小鼠碳廓清能力、明显增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、明显升高小鼠血清溶血素含量、明显增强抗体生成细胞能力；高剂量组能明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能；各剂量组对NK细胞活性增强无显著性。结论：按照增强免疫力功能作用评价程序规定，该受试物具有增强免疫力功能作用。     

槲皮素对视网膜母细胞瘤细胞抑制作用的研究

目的研究槲皮素（Quercetin,Que）在体外对人视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma,RB）Y79细胞株的生长抑制和凋亡的影响。方法体外培养Y79细胞：在体外对Y79细胞经不同浓度槲皮素处理48h、72h后进行检测,用MTT法测定半数抑制浓度（IC50）,观察槲皮素的细胞毒性作用,用Hoechst33342/Pl双荧光染色观察细胞核形态变化。结果槲皮素在一定浓度范围内能明显抑制Y79细胞的生长,并存在剂量-效应关系;应用MTT法计算不同浓度槲皮素作用48h、72h的半数抑制浓度（IC50）是148μmol/L、115μmol/L。Hoechst33342/Pl双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等,细胞凋亡的形态学改变。结论槲皮素可使视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖抑制和凋亡诱导。     

槲皮素抗小鼠P388白血病的作用

目的：研究槲皮素抗小鼠P388白血病的作用。方法：采用DBA／2小鼠腹腔注射P388细胞的方法建立白血病小鼠模型，80只小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、高剂量槲皮素组、低剂量槲皮素组，每组20只。于第7天末次给药后每组小鼠随机抽取10只处死，收集腹水分别计数，观察腹水细胞荧光形态变化，分析细胞周期及细胞凋亡率，观察骨髓涂片及心、肝、脾、肾的组织病理学改变。观察记录其它小鼠一般情况及生存期。结果：给予槲皮素的两组小鼠平均生存期较两对照组显著延长（P〈0．05），且高剂量组小鼠平均生存期较低剂量组显著延长（P〈0．05）。在第7天处死小鼠后，高剂量组小鼠无肉眼可见腹水。低剂量组小鼠腹水细胞的密度显著减小，G0-G1期细胞比例减少，S期细胞比例增加，细胞凋亡率显著升高（P〈0．05）。各组小鼠骨髓涂片及心、肝、脾、肾组织病理切片未见明显异常。结论：槲皮素对P388白血病小鼠有延长生存期及抑制腹水细胞增殖和诱导腹水细胞凋亡的作用。     

槲皮素联合川芎嗪对小鼠Lewis 肺癌生长的抑制作用

 目的 探讨槲皮素联合川芎嗪对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其机制。方法 复制C57BL小鼠Lewis肺癌模型，将40只接种Lewis肺癌的C57BL小鼠随机分成4组：对照组（A组）、槲皮素组（B组）、川芎嗪组（C组）、槲皮素＋川芎嗪组（D组），每组10只。连续用药20日，观察移植瘤生长情况，于接种后第22天处死各组小鼠，采用免疫组化半定量检测肿瘤组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）及增殖核抗原（PCNA）的表达水平，用原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数（AI）。结果 （1）B、C、D组肿瘤的生长明显受到抑制，瘤重明显低于A组，其抑瘤率分剐为39．87％、35．45％、54．58％，D组抑瘤率明显高于B、C组，差异有显著性（P〈0．05）。（2）B、C、D组MVD、VEGF及PCNA表达水平明显低于A组（P〈0．05或0．01），尤其是D组表达最低。B、C、D组AI较A组增高（P〈0．05或0．01），D组最高。结论 槲皮素与川芎嗪联合用药可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长，其作用机制与抑制微血管生成、抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关。