高效液相色谱法同时测定大庆马齿苋中山奈酚和槲皮素的含量

目的建立采用高效液相色谱法同时测定大庆马齿苋中山奈酚和槲皮素含量的方法。方法采用Agilent1200 Series,Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.2%磷酸(45∶55),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长360 nm。结果山奈酚进样量在0.448~2.240μg范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为96.90%,RSD=0.63%(n=6);槲皮素进样量在0.496~2.480μg范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为98.10%,RSD=0.45%(n=6)。结论此方法重复性好,精确可靠。     

吉西他滨联合槲皮素对胰腺癌细胞Panc-1凋亡的影响研究

目的研究吉西他滨联合槲皮素抑制胰腺癌细胞Panc-1增殖,促进其凋亡的效果.方法设立槲皮素(终浓度为50μM)、吉西他滨(50μg/ml)、吉西他滨联合槲皮素和对照组4组,MTS法检测药物对Panc-1细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测联合药物处理对细胞凋亡和细胞周期的影响,最后应用荧光定量PCR法测定凋亡相关基因BCL-2家族蛋白的相对表达.结果吉西他滨联合槲皮素后,对胰腺癌促凋亡效果增强,同时改变细胞周期,使其S期减少,BCL-2家族促凋亡基因表达上调.结论槲皮素能够显著增强吉西他滨抑制胰腺癌恶性增殖的作用.     

高效液相色谱法测定甘肃金银花中槲皮素和木樨草素的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定甘肃金银花中槲皮素和木樨草素含量的方法。方法采用Krom asil C18柱,以甲醇-水(60∶40)为流动相,磷酸调节pH值至3.5,流速:1.0 m l.m in-1,检测波长350 nm。结果槲皮素在2.93~35.16μg.m-l1;木樨草素在5.45~43.60μg.m-l1范围内呈良好线性关系,r槲=0.999 9,r木=0.999 7。平均回收率:槲皮素为96.2%,RSD=1.7%;木樨草素为96.5%,RSD=2.2%。结论甘肃金银花中槲皮素和木樨草素的含量远高于正品金银花。该方法灵敏度高,重现性好,可作为金银花质量评价的分析方法。     

槲皮素对脂多糖刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响

目的 观察槲皮素对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞炎症因子释放的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法测定不同浓度槲皮素对RAW264.7细胞活性的影响.将细胞分为五组:A组(对照组)、B组(LPS干预组)、C组(LPS+槲皮素50 μmol/L)、D组(LPS+槲皮素150 μmol/L)和E组(LPS+槲皮素250μmol/L).real-time测定各组细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(Myd88)、NF-κB (p65) mRNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定各组细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平.结果 槲皮素在0～250 μmol/L浓度范围内对RAW264.7细胞活性没有影响.同对照组相比,槲皮素可有效降低LPS引起的TLR4、MyD88、NF-κB (p65)的mRNA表达和细胞上清液中IL-6、TNF-α分泌水平,并呈剂量依赖性(P＜0.01).结论 槲皮素可能通过抑制TLR-Myd88-NF-κB传导通路的活化,减少巨噬细胞炎症因子的分泌.     

Potential therapeutic effect of Allium cepa L. and quercetin in a murine model of Blomia tropicalis induced asthma

Background

Asthma is an inflammatory condition characterized by airway hyperresponsiveness and chronic inflammation. The resolution of inflammation is an essential process to treat this condition. In this study we investigated the effect of Allium cepa L. extract (AcE) and quercetin (Qt) on cytokine and on smooth muscle contraction in vitro and its therapeutic potential in a murine model of asthma.

Methods

AcE was obtained by maceration of Allium cepa L. and it was standardized in terms of quercetin concentration using high performance liquid chromatography (HPLC). In vitro, using AcE 10, 100 or 1000 μg/ml or Qt 3.5, 7.5, 15 μg/ml, we measured the concentration of cytokines in spleen cell culture supernatants, and the ability to relax tracheal smooth muscle from A/J mice. In vivo, Blomia tropicalis (BT)-sensitized A/J mice were treated with AcE 100, 1000 mg/kg or 30 mg/kg Qt. We measured cell influx in bronchoalveolar lavage (BAL), eosinophil peroxidase (EPO) in lungs, serum levels of Bt-specific IgE, cytokines levels in BAL, and lung histology.

Results

We observed a reduction in the production of inflammatory cytokines, a relaxation of tracheal rings, and a reduction in total number of cells in BAL and EPO in lungs by treatment with AcE or Qt.

Conclusion

AcE and Qt have potential as antiasthmatic drugs, as they possess both immunomodulatory and bronchodilatory properties.     

HPLC测定不同产地连翘中槲皮素的含量

目的:建立连翘中槲皮素的HPLC测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Agilent Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-水(32∶68);检测波长:370 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL.min-1;进样量:20μL。结果:不同产地连翘中槲皮素的含量差异显著。结论:此方法可用于检测连翘中槲皮素的含量,为连翘的质量评价提供参考。     

槲皮素对培养人视网膜色素上皮细胞增生及DNA合成的影响

目的研究槲皮素(quercetin, QUE)对培养人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞增生和DNA合成以及对表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)促RPE细胞增生和DNA合成作用的影响。方法用细胞计数和3H-胸腺嘧啶核苷(3H-thymidine, 3H-TdR)掺入方法,观察不同浓度(200、100、50、1μmol/L)的QUE和最大浓度的QUE(200μmol/L)在不同作用时间（24-168小时）,分别单独或与EGF共同作用时,对RPE细胞增生及DNA合成的影响,排除着色的死细胞,用活细胞计数法判断药物的细胞毒性作用。结果QUE 200μmol/L具有最强的抑制效应,48小时时抑制效应已明显出现,96小时时抑制达到高峰。与QUE单独作用相比,QUE对EGF的促RPE细胞增生效应能产生更强的抑制。QUE无细胞毒性作用,各实验组细胞活力均在85.00%以上。结论QUE以剂量依赖和时间依赖的方式抑制RPE细胞的增生,尤其是由EGF刺激的增生,并且对培养的RPE细胞无细胞毒作用。(中华眼底病杂志,1999,15:27-29)     

槲皮素纳米混悬剂的制备及其性能研究

目的：制备高载药量、小粒径的槲皮素纳米混悬剂,并进行性质考察。方法采用纳米沉淀–高压均质法制备,以粒径分布、药载比、稳定性为指标对处方和工艺进行优化,并对最优处方进行体外性质考察。结果以超声注入联合高压均质法制备,最佳处方为TPGS为稳定剂、DMF为有机试剂,药载比为5∶1;最佳工艺条件为低温10℃超声、200 MPa、循环5次。制备得到的槲皮素纳米混悬剂粒径为（173.21±0.90） nm,电位为（?19.02±0.15） mV,载药量为（80.40±1.44）%,包封率为（96.41±1.72）%。药物在纳米粒中以结晶状态存在,能够体外缓释36 h。结论利用TPGS可制备高载药量、小粒径的槲皮素纳米混悬剂,其体外具有明显缓释作用,解决了槲皮素水溶性差的难题,具有较好的应用前景。     

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤细胞周期的影响

目的　研究槲皮素对人乳腺癌细胞株MCF 7裸鼠移植瘤细胞周期的影响。方法　 2 4只MCF 7细胞株移植成功的裸鼠分为对照组、槲皮素组、阿霉素组及联合用药组 ,每组 6只。用流式细胞仪分析细胞周期分布 ,用免疫组化测定cyclinD1表达水平。结果　G0 /G1期占细胞周期比例对照组明显低于槲皮素组 ,阿霉素组及联合用药组 (P <0 .0 1) ,S期占细胞周期比例对照组明显高于槲皮素组 ,阿霉素组及联合用药组 (P <0 .0 1) ,cyclinD1表达水平对照组明显高于槲皮素组、阿霉素组及联合用药组 (P <0 .0 1)。结论　槲皮素可作用于MCF 7移植瘤的G1/S节点 ,可抑制移植瘤细胞增殖及cyclinD1表达 ,延缓肿瘤生长。