Neuraminidase Inhibitors from<Emphasis Type="Italic">Reynoutria elliptica</Emphasis>

In the course of screening neuraminidase inhibitors from herbal medicines, Reynoutria elliptica exhibited high inhibitory activity. Four active compounds were isolated from the ethyl acetate soluble fraction by consecutive purification using sillica gel, Sephadex LH-20 chromatography, and recrystallization. The chemical structures of these compounds were identified as 1,3,8-trihydroxy-6-methylanthraquinone (emodin) 1,8-dihydroxy-3-methoxy-6-methylanthraquinone (emodin 3-methyl ether; physcion), 1,3,8-trihydroxy-6-hydoxymethylanthraquinone (omega-hydroxyemodin), and 3,5,4'-trihydroxystilbene (trans-resvertrol) by spectral data including MS, 1H-, and 13C-NMR. The IC50 values of emodin, emodin 3-methyl ether, omega-hydroxyemodin, and trans-resvertrol were 2.81, 74.07, 10.49, and 8.77 microM, respectively. They did not inhibit other glycosidase such as glucosidase, mannosidase, and galactosidase, indicating that they were relatively specific inhibitors of neuraminidase.     

HPLC法测定枳实导滞丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量

目的:建立枳实导滞丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Waters Symmery C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）,流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液（85:15）,检测波长:254nm,流速:1.0ml·ml^-1。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的线性范围分别为0.011～0.226μg（r=0.9998）、0.005～0.092μg（r=0.9999）、0.010～0.194μg（r=0.999 9）、0.011～0.212μg（r=0.9999）、0.005～0.102μg（r=0.9998）;浓度范围内进样量与峰面积线性关系良好。平均回收率分别为97.47%（RSD=1.56%）、99.57%（RSD=0.91%）、100.66%（RSD=1.09%）、101.97%（RSD=1.60%）、101.54%（RSD=1.58%）（n=6）。结论:所建方法简单、快速、准确,可用于枳实导滞丸的质量控制。     

HPLC同时测定胆宁片中5种蒽醌类成分的含量

目的:探讨HPLC同时测定胆宁片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚5种活性成分的含量.方法:采用HPLC,色谱柱:Shimadzu VP-ODS柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254nm,柱温30℃.结果:5种成分分别在0.042～0.840μg(r=0.9996)、0.168-3.352 μg(r=0.9998)、0.084～1.680 μg(r=0.9997)、0.093～1.852μg(r=0.9999)和0.174～3.488μg(r=0.9994)内成良好线性关系,平均回收率分别为99.8%(RSD=1.34%,n=5)、99.8%(RSD=1.72%,n=5)、100.0%(RSD=0.89%,n=5)、99.5%(RSD=0.97%,n=5)和100.2%(P,SD=1.04%,n=5).结论:本法操作简便,结果准确,可靠,重复性好,可用于同时测定胆宁片中5种蒽醌类成分的含量.     

HPLC法测定茵杖舒胆颗粒与合剂中4种大黄蒽醌的含量

目的:建立茵杖舒胆颗粒剂与合剂中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的HPLC含量测定方法。方法:采用VenusilXBP-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）,检测波长:254 nm,流速:1.0 ml.min^-1,柱温:30℃。结果:4种大黄蒽醌均呈良好的线性（r=0.999 9～1.000 0）,茵杖舒胆颗粒的平均回收率为96.5%～100.3%（RSD=2.18%～3.07%）;茵杖舒胆合剂的平均回收率为97.1%～100.3%（RSD=1.69%～3.00%）。结论:通过对茵杖舒胆颗粒和合剂各6批的含量测定,证明方法简单,准确可靠,重复性好。     

白细胞弹性蛋白酶抑制剂筛选模型的建立及抑制剂F02ZA-2554A的研究

利用人源的白细胞弹性蛋白酶建立了一种快速、微量、灵敏的高通量体外筛选方法。利用该模型从微生物菌种库菌株的次生代谢产物中筛选得到一阳性真菌F02ZA-2554。该菌株发酵液经有机溶剂提取、硅胶柱层析、及HPLCODS反相柱层析等活性跟踪下的分离纯化，得到活性化合物F02ZA-2554A，该化合物对白细胞弹性蛋白酶有中等强度的抑制活性，其IC20为32．4μmol／L。通过对该化合物的紫外、质谱、核磁等理化分析，确定该化合物为葸醌类化合物中的大黄素甲醚（physcion），该化合物的抗炎活性属首次报道。     

大黄素甲醚对胰腺癌SW1990细胞的杀伤作用及其机制

目的观察大黄素甲醚对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 Western印迹检测不同浓度大黄素甲醚干预后PI3K/Akt信号通路蛋白水平,MTT检测不同浓度、时间下,大黄素甲醚对SW1990细胞增殖的影响。流式细胞术检测大黄素甲醚对SW1990周期及凋亡的影响。结果与NC组比较,Physcion组m TOR及p-Akt表达水平呈剂量依赖性下降,Akt表达呈剂量依赖性上升,其中5、50μmol/L组与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);Physcion组细胞存活率呈时间依赖性下降,在48、72、96h时,与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Physcion组SW1990存活率呈剂量依赖性下降,其中0.5、5、50μmol/L组与NC组比较差异有统计学意义(P<0.05);与NC组比较,Physcion组停留在G1、G2期细胞比例减少,S期细胞比例升高(P<0.05);Physcion组凋亡率高于NC组(P<0.01)。结论大黄素甲醚通过抑制Akt磷酸化,调控PI3K/Akt通路,降低胰腺癌细胞存活率,促进其凋亡。     

大黄素等5种蒽醌衍生物的体外抗HIV-1活性(英)

目的：检测大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚和芦荟大黄素等蒽醌衍生物的体外抗HIV-1活性。方法： 在96孔培养板中加入不同浓度的衍生物,在倒置显微镜下观察HIV-1ⅢB急性感染的C8166细胞形成合胞体的数量,并用ELISA的方法检测培养上清中HIV-1 p24的抗原水平,得到相应的50%抗HIV-1有效浓度（EC50）。结果： 大黄素等蒽醌衍生物有较好的体外抗HIV-1活性,表现为：(1) 抑制HIV-1ⅢB感染诱导的合胞体形成, EC50均值分别为(11.44±0.93)μmol/L (大黄素),(51.28±2.86)μmol/L (大黄酸),(90.58±2.30)μmol/L (大黄酚),(8.59±0.38)μmol/L (大黄素甲醚) 和(0.89±0.08)μmol/L (芦荟大黄素);（2）抑制HIV-1ⅢB急性感染的C8166细胞p24抗原产生, EC50均值分别为(11.61±0.56)μmol/L (大黄素),(12.35±4.73)μmol/L (大黄酸),(39.63±2.87)μmol/L (大黄酚), >250 μmol/L (大黄素甲醚) 和(2.75±0.20)μmol/L (芦荟大黄素)。 结论： 大黄素等5种蒽醌衍生物具有不同水平的体外抗HIV-1活性,其中以芦荟大黄素的抑制活性最强。     

祖师麻皮肤刺激性观察和基于生物信息学的机制预测

目的：观察祖师麻干浸膏粉及不同萃取部位的皮肤刺激性,并基于生物信息学预测其刺激性成分及作用机制。方法：将斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,观察连续给药7 d和停药后3 d皮肤状况。运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)查询祖师麻刺激性成分和作用靶点。通过GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)等数据库收集疾病靶点。运用Metascape平台进行基因本体(GO)富集以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,将核心靶点与祖师麻刺激性成分进行分子对接。结果：祖师麻干浸膏粉低、中剂量组对破损皮肤有轻微红斑、水肿反应;祖师麻干浸膏粉高剂量组、石油醚部位和二氯甲烷部位对完整皮肤和破损皮肤均有轻微红斑、水肿反应;乙酸乙酯部位和水层部位均无红斑、水肿反应。2)从祖师麻活性成分中筛选出7种刺激性成分,通路富集的主要通路为磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路、细胞增殖的肉瘤基因(Ras)信号通路、促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、端粒结合蛋白(Rap1)信号通路和松弛素(Relaxin)信号通路等。分子对接结果...     

大黄素甲醚对大鼠脑缺血预处理后缺血再灌注损伤作用的探讨

目的探讨脑缺血预处理联合大黄素甲醚(Phy)治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠随机分为四组,分别为假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺血预处理组和Ply治疗组。各组采用Zea-longa等的大脑中动脉线栓法并加以改进,制备缺血预处理及缺血再灌注损伤实验动物模型。比较各组神经功能缺失评分、脑梗死体积、血清神经元烯醇化酯(NSE)含量及脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果脑缺血预处理联合Phy可使神经功能缺损减轻、脑梗死体积缩小、血清NSE含量降低,均较缺血预处理组更为明显。脑组织IL-1β和TNF-α含量降低亦更为明显。结论Phy可增强缺血预处理诱导的脑缺血耐受作用,下调脑组织再灌注损伤时IL-1β和TNF-α的表达,二者具有叠加作用。     

HPLC法测定导赤丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的制定测定导赤丸中芦荟大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素和大黄素甲醚5种活性成分含量的方法。方法利用高效液相色谱法进行测定,采用流动相A:100%乙腈-0.1%磷酸,B:10%乙腈-0.1%磷酸以梯度浓度洗脱;流速控制在1mL/min;波长设定为254nm;柱温30℃。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.7%(RSD为1.28%n=5),99.1%(RSD为1.68%n=5),99.6%(RSD为0.90%n=5),98.8%(RSD为0.89%n=5),99.7%(RSD为1.04%n=5)。结论本法结果准确,操作简便,可靠,重复性好,可用于导赤丸的质量控制。