艾滋病合并马尔尼菲青霉病感染率调查和实验室检查及药敏分析

目的探究艾滋病（AIDS）合并马尔尼菲青霉病（PSM）的感染率,以及常规实验室检查结果和5种抗真菌药物对马尔尼菲青霉菌（PM）的体外抗菌活性。方法 2006年1月2009年11月间确诊AIDS患者326例,从其血液、骨髓培养出65株PM,检测该65例患者的血常规、肝功能和肾功能,并对20株酵母相PM进行体外药敏进行分析。结果 AIDS合并PSM的感染率为19.94%;外周血常规：WBC〈4.0×109/L者48例,HB〈100g/L者51例,PLT〈100×109/L者46例。肝功能检查：ALT〉40U/L者49例,AST〉40U/L者51例,GGT〉60U/L者44例,ALP〉150U/L者36例,ALB〈35g/L者53例,A/G倒置者50例。肾功能检查：BUN〉7.2mmol/L者9例,Cr〉150μmol/L者4例。20株酵母相PM对5-氟胞嘧啶（5FC）、两性霉素B（AMB）、氟康唑（FCA）、伊曲康唑（ITR）、伏立康唑（VRC）的敏感率分别为75%、90%、80%、90%、90%。结论 AIDS合并PSM感染率较高;患者感染后外周血WBC、HB、PLT通常低于正常人,肝功能多表现异常,肾功能的改变较少;对PM的治疗以AMB、ITR、VRC为首选。     

艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的护理

目的探讨艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染患者的护理及体会。方法通过临床诊断,对66例艾滋病合并马尔尼菲青霉菌感染的患者实施药物治疗并结合药物护理、心理护理等方法,观察患者临床症状的改善情况。结果66例患者中8例症状改善后放弃治疗,有13例由于入院时病情危重,合并多种耐药菌感染,多器官功能衰竭死亡,其余好转。结论对艾滋病患者合并马尔尼菲青霉菌感染,药物护理和心理护理具有重要的意义。     

马尔尼菲青霉临床分离株的rDNA ITS序列分析

目的 为设计马尔尼菲青霉种特异性引物,探讨马尔尼菲青霉病更加确切的诊断方法.方法 实验菌株为北京大学真菌和真菌病研究中心保存的4株马尔尼菲青霉,来源于国内不同地区.用真菌通用引物ITS1和ITS4 PCR扩增马尔尼菲青霉rDNAITS,扩增产物纯化后直接测序,测序结果在基因库核酸序列数据库进行同源序列搜索,并依据序列对比、分析.结果 4株临床分离的马尔尼菲青霉的rDNA ITS序列相同.与国外来源于美国、印度尼西亚、法国、澳大利亚的马尔尼菲青霉rDNA ITS序列基本一致.马尔尼菲青霉与荚膜组织胞浆菌、新生隐球菌、念珠菌的rDNAITS序列差异较大,青霉和曲霉属间rDNAITS的序列相似性较低,而青霉种间rDNAITS序列的差异不大.结论 不同来源的马尔尼菲青霉菌株间乃至不同青霉的种间的rDNA ITS序列均具有较高的同源性,提示该区可能不适于作为靶基因来设计马尔尼菲青霉的种特异性引物或探针.     

12株马内菲青霉随机扩增DNA多态性研究

目的 了解马内菲青霉的基因学特征,为该菌的DNA分型提供依据。方法 采用氯化苄提取法提取基因组DNA.用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对12株临床分离的马内菲青霉菌株进行DNA指纹图谱分析。结果 ①共选用40个随机引物进行扩增,筛选出4个具有稳定、清晰DNA扩增带型的引物。即引物P₂₃:5'-AGTCAGCCAC-3',P₁₀₃:5'-AGACGTCCAC-3',P₁₀₅:5'-AGTCGTCCCC-3',P₁₂₀:5'-GGGAGACATC-3'.②12株菌株DNA图谱主要带型相同,扩增片段呈多态性。相似率44.4%～97.3%.③12株菌可分5个不同的组群。结论 RAPD技术可以用于马内菲青霉的基因分型。     

荚果蕨植物内生真菌Penicillium sp. SYP-F-7610的抑菌活性次级代谢产物研究

摘要：目的 研究荚果蕨根茎内生真菌Penicillium sp. SYP-F-7610发酵液中抑菌活性次级代谢产物。方法 采用硅胶柱 色谱、ODS柱色谱、反相半制备HPLC等分离菌株发酵液中的次级代谢产物,根据比旋光度和波谱学数据(MS、1H NMR、13C NMR)进行结构鉴定。采用比浊法测试次级代谢产物的抑菌活性。结果 从荚果蕨根茎内生真菌Penicillium sp. SYP-F-7610发 酵液中分离鉴定了7个化合物,分别为青霉酸(1)、3,5,6-三甲基-2,4-二羟基苯甲酸甲酯(2)、苔黑酚(3)、4-羟基苯乙酸甲酯(4)、 6-hydroxy-5-methoxy-3-methyl-3,6-dihydro-2H-pyran-4-carboxylic acid (5)、chermesinone A (6)和(R)-甲羟戊酸内酯(7)。化合物1 对大肠埃希菌(Escherichia coli CMCC44103)、乙型副伤寒沙门菌(Salmonela paratyphi B CMCC50094)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus ATCC14579)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae CMCC46117)表现出抑制作用,IC50值为3.19~6.79 μg/mL。结论 本文 首次对荚果蕨属植物的内生真菌进行研究,发现荚果蕨根茎内生真菌Penicillium sp. SYP-F-7610的次级代谢产物结构类型丰富、 生物活性多样,值得深入研究。化合物5为首次报道从青霉属真菌次级代谢产物中分离得到。化合物1为首次报道对乙型副伤寒 沙门菌具有抑制活性。     

海绵来源真菌黄灰青霉Sp-19中的抗肿瘤活性成分研究

目的对一株来源于羽毛山海绵Mycale plumose的真菌黄灰青霉Penicillium auratiogriseumSp-19发酵产物中的抗肿瘤活性成分进行分离和鉴定。方法采用溶剂萃取、硅胶柱色谱及制备HPLC等分离手段对该菌株发酵产物的活性部位进行了活性追踪分离,通过理化性质及波谱学手段进行化学结构鉴定,以SRB法评价了化合物的抗肿瘤活性。结果与讨论从发酵产物中分离得到5个生物碱类化合物,其结构分别鉴定为fructigenines A(1),去乙酰化fructigenines A(2),fructigeninesB(3),1,4-benzodiazepine-2,5-diones(4)和cyclopenin(5);化合物4和5在3μg.mL-1时对小鼠乳腺癌tsFT210细胞具有强的细胞毒活性。     

南极真菌Penicillium sp. S-3-88次级代谢产物的研究

目的 对源于南极(44.42° W,60.54° S,水深239 m,水温-1.16 ℃)海参体内共附生真菌Penicillium sp. S-3-88的次级代谢产物进行研究。方法 采用Sephadex LH-20色谱、反相ODS柱色谱、高效液相柱层析等色谱分析方法,对Penicillium sp. S-3-88发酵液的乙酸乙酯萃取部位进行系统分离,并通过₁H和₁₃C NMR及质谱(LC-MS)等现代波谱解析手段,并与相关文献比对,鉴定化合物结构。结果 分离得到9个单体化合物。结论 鉴定化合物 1 – 9 分别为2-acetyl-4(3H)-quinazolin--one(1), benzo[d]thiazol-2(3H)-one(2), Octadecyl phenylpropanoate(3), diisobutyl phthalate(4), butyl-isobutyl-phthalate(BIP)(5), ergosterol peroxide(6), melithasterol B(7),22E,24R-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-diene-3β,7α-diol(8)和cerevisterol(9)。     

体外一氧化氮对马尔尼菲青霉菌生长的影响

马尔尼菲青霉菌现已被确认国是人类最重要的致命性真菌之一，能引真情的播散性系统性感染，机体细胞免疫是重要的防御机制，一氧化氮（ＮＯ）被认为是细胞免疫中的效应剂，在体外酸性介质中（ｐＨ４，ｐＨ５）由亚硝酸钠（ＮａＮＯ２）产生的ＮＯ大大抑制了马尔尼菲青霉菌的生长。相反，在中性介质中（ｐＨ７．４）没有ＮＯ产生，未发一上述抑制现象。     

CHARACTERIZATION OF PATHOGENIC FUNGI GENOMES USING PULSED FIELD GEL ELECTROPHORESIS

Pulsed field gel eleetrophoresis (PFGE) has been firstly introdueed in characterization of the pathogenic fungi Pericillium marneffei and Exophiata dermatitidis genomes. The numbers and sizes of their chromosomes have been detected. Polymorphism was identified on the smallest chromosome of E.derntatitidis. The result shows that PFGE for characterization of large molecular DNA pathogenic fungi is very suitable, it is more simple and more efficacy. The result also shows the diversity of pathogenic fungi is relative common even in rare occurred pathogeafie fungi such as E. dermatitidis.