环指蛋白146在Aβ诱导的C6细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨环指蛋白146(RNF146)在Aβ诱导C6细胞的凋亡过程中的作用。方法:大鼠神经胶质瘤细胞株C6细胞分为对照组(control)和Aβ处理组(Aβ)。Annexin V-EGFP/PI染色法检测细胞凋亡,Western Blot方法检测C6细胞中RNF146的表达和凋亡诱导因子(AIF)蛋白的表达和分布。结果:与对照组比较,Aβ处理能够促进细胞凋亡,同时减少细胞中RNF146的表达,并促进AIF核转位。结论:Aβ可导致C6细胞凋亡,其机制与RNF146表达下调并激活AIF核转位有关。     

白藜芦醇对血清剥夺诱导大鼠皮层神经元自噬的影响

目的:研究白藜芦醇(RSV)对血清剥夺诱导大鼠神经元自噬的影响及分子机制。方法:将原代培养的大鼠皮层神经元分为对照组(control)、血清剥夺组(SD)、RSV处理组(RSV)和RSV联合组SIRT1抑制剂EX527处理组(RSV+EX 527),利用乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞活性,免疫荧光染色检测沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)的表达变化、Western Blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平变化。结果:与正常对照组相比,血清剥夺引起细胞活性下降、SIRT1表达下降,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例减少,Beclin1表达降低(P 0. 05);经过RSV处理后,细胞活性增加(P 0. 05),大鼠神经元SIRT1表达增加,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例增加,Beclin1表达增加;使用EX 527处理后,RSV的神经保护作用受到抑制。结论:RSV通过激活SIRT1活性促进大鼠皮层神经元自噬。     

二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒对人血管内皮细胞的作用研究

目的研究二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒(dimercaptosuccinic acid-magnetite nanoparticles,DMSA-Fe3O4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)功能的影响。方法利用动态光散射法表征DMSA-Fe3O4的粒径及表面电荷;采用普鲁士蓝染色、邻二氮菲铁定量和透射电镜观察方法研究HUVECs对DMSA-Fe3O4的摄取规律;利用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测DMSA-Fe3O4对内皮细胞活性的影响;通过酶联免疫吸附试剂盒测定DMSA-Fe3O4对内皮细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌量的影响。结果HUVECs能够大量吞噬DMSA-Fe3O4,其吞噬量具有孵育时间和剂量依赖性;短时间内所测剂量范围DMSA-Fe3O4对细胞活性无显著影响,但长时间高剂量条件使细胞活性明显降低。此外,在高剂量DMSA-Fe3O4暴露下(200μg/mL),内皮细胞分泌VEGF的量约为对照组的3倍。结论DMSA-Fe3O4易于被HUVECs吞噬;高浓度DMSA-Fe3O4与HUVECs长时间培养使细胞活性降低,并刺激内皮细胞分泌VEGF。     

Hcy、NT-proBNP、D-dimer联合检测对急性脑梗死诊断的应用价值

目的探讨血清Hcy和NT-proBNP以及血浆D-dimer联合检测在急性脑梗死(ACI)中的诊断价值。方法选取2016年9月至2017年9月间我院神经内科收治急性脑梗死患者73例为实验组,同时选取同一时期健康体检者50例为对照组。采用循环酶法、化学发光法、免疫比浊法分别测定血清Hcy,NT-proBNP和血浆D-dimer水平。将三个变量指标组合建立logistic回归模型并绘制ROC曲线,通过曲线下面积、灵敏度、特异性等评价三项指标的诊断价值。结果急性脑梗死患者血清Hcy,NT-proBNP和血浆D-dimer水平均高于健康体检者,差异具有统计学意义(P <0. 001)。logistic回归-ROC曲线分析显示单项指标检测中D-dimer>415.87 ng/mL时,ROC曲线下面积为0.810,灵敏度为79.45%,特异性为84%,诊断价值高于Hcy和NT-proBNP。Hcy、NT-proBNP、D-dimer联合检测时,各组指标联合检测其曲线下面积均大于单一指标检测。D-dimer联合NT-proBNP检测为最理想组合,其ROC曲线下面积为0. 903,灵敏度为86%,特异性94%。结论 D-dimer联合NT-proBNP检测,具有较高的辅助诊断价值,有助于ACI的早期诊断。     

慢性肾脏病对血清胃泌素释放肽前体测定的影响

目的探讨慢性肾脏病(CKD)对血清胃泌素释放肽前体(ProGRP)测定的影响。方法采用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)测定ProGRP,采用碱性苦味酸法测定肌酐(Cr),根据简化MDRD公式计算估算肾小球滤过率(eGFR),根据eGFR确定CKD分期。分别检测了112例慢性肾脏病、34例原发性小细胞肺癌(SCLC)和75例健康体检者血清。结果ProGRP与Cr水平呈正相关(r=0.560,P<0.01),ProGRP与eGFR呈显著负相关(r=-0.798,P<0.01)。健康对照组、慢性肾脏病组、小细胞肺癌组,三组间ProGRP水平差异有统计学意义(F=75.876,P<0.01)。随着慢性肾脏病的进展,ProGRP水平逐渐增高(F=57.272,P<0.01)。小细胞肺癌组与CKD5期ProGRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05),与其余CKD各分期比较差异均有统计学意义(P<0.01)。当确定ProGRP最佳截断值为290.91 pg/mL时,其对SCLC与CKD5的鉴别,特异性达98.4%。结论慢性肾脏病患者血清ProGRP水平可大幅度升高,ProGRP用于小细胞肺癌的辅助诊断时需排除慢性肾脏病引起的肾小球损伤导致的血清ProGRP升高。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定黑参中4种稀有皂苷的含量

目的利用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)测定14批次黑参中4种稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5的含量。方法采用HPLC-ELSD对黑参中4种稀有皂苷进行测定。色谱条件:采用COSMOSIL C18-PAQ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以80%乙腈水溶液(A)-10%乙腈水溶液(C)为流动相进行梯度洗脱,流速1.2 m L·min-1,柱温30℃,漂移管温度为60℃,进样体积20μL。结果稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5得到良好的分离,分别在21~620、19~570、20~610和19~560μg·m L-1与色谱峰面积呈良好的线性关系。14个黑参样品中稀有皂苷20(S)-Rg3的含量范围为0.107%~0.233%,20(R)-Rg3的含量范围为0.075%~0.220%,Rk1的含量范围为0.161%~0.330%,Rg5的含量范围为0.442%~0.822%。结论 HPLC-ELSD法可用于同时测定黑参中4种稀有皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rk1、Rg5成分,且方法简单、可靠、易行。同时,其结果为以后建立和完善黑参的炮制工艺及质量标准提供一定的参考依据。