FK866对非小细胞肺癌细胞迁移的影响

目的: 探讨低浓度烟酰胺磷酸核糖基转移酶（NAMPT）抑制剂FK866对人非小细胞肺癌细胞株（A549细胞）迁移的影响及作用机制。方法: MTT法检测不同浓度FK866对A549细胞增殖的影响;划痕实验检测1.0 nmol/L和10.0 nmol/L FK866对A549细胞迁移的影响;实时定量RT-PCR检测上皮间质转化相关蛋白上皮钙黏素和波形蛋白mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）和磷酸化ERK1/2蛋白的表达量。结果: FK866作用时间越长、浓度越高,对A549细胞增殖的抑制作用越明显。FK866作用72 h时的半抑制浓度（IC₅₀）为9.55 nmol/L。以1.0、10.0 nmol/L的FK866预处理细胞48 h,划痕后继续给药48 h,两种浓度的FK866均能抑制A549细胞迁移;如不进行预处理,仅10.0 nmol/L浓度的FK866对划痕愈合有一定的抑制作用;1.0 nmol/L的FK866处理细胞72 h可上调上皮钙黏素和波形蛋白mRNA表达,并激活ERK1/2;以1.0 mmol/L的烟酰胺单核苷酸（NMN）或10.0 μmol/L的ERK1/2抑制剂U0126预处理,能够逆转FK866引起的上皮钙黏素和波形蛋白表达上调。结论: 低浓度FK866能够通过减少细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和激活ERK1/2,增加上皮钙黏素表达,进而抑制细胞迁移,对肿瘤转移可能有一定的抑制作用;但其同时促进了波形蛋白的表达,不利于肿瘤的治疗。     

脂代谢及血清内脂素水平与绝经后骨质疏松症的相关性研究

目的:探讨脂代谢及血清内脂素水平与绝经后骨质疏松症的相关性.方法:依据1994年世界卫生组织骨质疏松症诊断标准,选取2010年3月至2011年5月在浙江省中医院骨科就诊的绝经1年以上的女性骨量减少与骨质疏松症患者各30例作为研究对象;检测患者血清中血脂、内脂素及骨代谢指标的水平,分析对比骨质疏松症患者与骨量减少患者血脂及内脂素水平的差异;并分别对血脂、内脂素水平与骨密度、骨代谢指标间的相关性作直线相关分析.结果:骨质疏松组患者血清中总胆固醇含量和内脂素水平均高于骨量减少组(t=-2.481,P=0.016;t=-2.850,P =0.006);患者血清中总胆固醇和内脂素水平均与骨密度呈负相关(r=-0.524,P=0.000; r=0.523,P=0.000);与骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶呈正相关(r=0.426,P=0.001;r=0.674,P=0.000);与骨形成指标骨型碱性磷酸酶无相关性(r=-0.208,P=0.110;r=-0.240,P =0.065).结论:脂代谢障碍,血清总胆固醇水平升高及内脂素异常表达可能具有影响骨代谢、加快骨吸收的作用,并由此影响绝经后骨质疏松症的发病,但其具体机制仍需进一步研究.     

烟酰胺对链脲佐菌素引致糖尿病的防治作用

３０只ＳＤ大鼠随机分成三组，在给在鼠腹腔注射链脲佐菌素为３天，分别予以生理盐水喂服、烟酰胺喂服和肌注，并连续用药两周。结果表明烟酰胺对链脲佐菌素引致糖尿病有较好的防治作用。     

烟酸及烟酰胺对维持性透析患者血磷影响的系统评价

目的 评价应用烟酸及烟酰胺治疗维持性透析患者高磷血症的疗效及安全性.方法 运用Cochrane图书馆、PubMed、EMbase、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库和维普期刊数据库检索使用烟酸或烟酰胺治疗维持性透析患者高磷血症的临床试验,经过质量评估和数据提取,对符合标准的研究进行系统评价.结果 13项研究中共有328名维持性透析患者（13例为腹膜透析患者,其余均为血液透析患者）入选,Meta分析结果显示治疗组/用药后同对照组/用药前相比,血磷、钙磷乘积的下降具有统计学意义,而血钙、甲状旁腺激素及血小板计数的变化不具有统计学意义.结论 目前证据显示,烟酸及烟酰胺可降低维持性透析患者的血磷,临床使用安全有效.但因纳入文献的质量和样本量有限,因此需要大样本及高质量的临床试验来提供更好的循证证据.     

烟酰胺对人皮肤黑素细胞黑素转运作用研究

目的 研究烟酰胺作用于人皮肤黑素细胞后,对黑素细胞中钙信号、细胞骨架的影响及其与黑素小体运动速率和分布的作用,并探讨其中的相互关系.方法 体外培养的人皮肤黑素细胞中分别加入0.00、0.05、0.25、1.25、6.25 mg/ml烟酰胺后,用荧光抗体染色法检测黑素细胞中游离钙离子浓度,以生化法测定细胞中钙泵活性,以Western Blot蛋白浓度测定法测定动力蛋白Dynein的表达水平,显微镜下观察活细胞中烟酰胺对黑素小体运动速率及黑素小体分布的影响.结果 烟酰胺对人皮肤黑素细胞中游离钙浓度影响显著,并有剂量.效应关系,y=76.4612-5.435x(r=0.97);细胞钙泵活性随烟酰胺浓度的增加而下降;细胞中动力蛋白表达随烟酰胺加入的浓度不同而改变;在烟酰胺浓度为0.05和25 mg/ml时,细胞功能正常的情况下,钙泵活性正常,能够调控细胞中的物质转运,而黑素细胞中Dynein表达却明显减少(P<0.05),而烟酰胺浓度为1.25mg/ml时,钙泵活性减弱(P<0.05),黑素细胞中动力蛋白Dynein的表达增加(P＜0.05).当烟酰胺作用浓度为0.25和1.25 mg/ml时,黑素细胞中黑素小体的运动速率明显增加(P<0.05),同时细胞中黑素小体密集度随烟酰胺浓度增加而下降.结论 烟酰胺参与黑素的转运过程并能加快黑素细胞中黑素小体的运动速率,显示烟酰胺对钙泵、细胞动力蛋白Dynein表达和黑素小体运动具有调控作用,作用浓度为一重要调节因素.

Abstract：

Objective To study the effects of nicotinamide on the human skin melanocytes and try to explore the potential mechanism of nicotinamide on the calcium signal transduction.cytoskeleton.Methods The primary cultured human skin melanocytes from foreskin were selected as the target cells in the present study.0.00,0.05,0.25,1.25 and 6.25 mg/ml nicotinamide were applied respectively.Western blot,fluorescent probes(Flu-3AM),flow cytometry analysis and time-lampse microscope digital skill were used to evaluate the effects of nicotinamide on melanosome motility and the melanosome distribution in melanocytes.Results The results showed that nicotinamide had a potential effect on regulating free calcium concentration in a dose-dependent manner(y=76.461 2-5.435x,r=0.97);The activity of Na~+-K~+-Ca~(2+)-ATPase was down regulated with the increasing concentration of nicotinamide.The expression of cellular dyrnein was also altered by nicotinamide;Na~+-K~+-Ca(2+)-ATPase activity was kept normal when given 0.05,0.25 mg/ml nicotinamide,while the dynein protein expression was inhibited(P＜0.05),Na~+-K~+-ca~(2+)-ATPase activity was decreased significantly when given 1.25 mg/nicotinamide(P<0.05),while the dynein protein expression was increascd (P<0.05).When treated with 0.25 mg/ml and 1.25 mg/concentration of nicotinamide,movement velocity in melanocytes was accelerated and the distribution characters of melanosomes were different among groups.Conclusion Nicotinamide may mediate the melanin transport in melanocytes in vitro.The concentration of nicotinamide plays a key role in the melanin regnladng path.Nicotinamide could be used as a regulator for melanin transport.