CD9类单克隆抗体的研制

本研究用血小板作为免疫原,免疫Balb/C小鼠,并按常规方法进行细胞融合.在筛选时,用血小板、幼稚B细胞(Nalm-6)及EB病毒转化后的人B淋巴母细胞系Raji细胞同时检测杂交瘤细胞上清,仅选与血小板及Nalm-6细胞反应,不与Raji细胞反应的抗体分泌杂交瘤细胞,建立了B9-1、B9-2、B9-3杂交瘤株.根据B9系列抗体与各种血液、造血细胞的反应特点,对通过对肾小球血管内皮及远端曲管上皮反应性及对其相应抗原分子量测定表明,B9系列抗体为CD9类抗体.本系列抗体与某些白血病细胞反应结果表明,与CD10类抗体配伍,可能形成更有效的针对普通型急性淋巴细胞白血病的导向药物.对B9系列抗体在血小板及白血病免疫分型中的研究前景也作了简要讨论.     

舌鳞癌患者手术前后免疫状态的检测

本文应用免疫扩散法及 C_3单扩散板测定舌鳞癌患者手术前后血清 Ig 及 C_3含量,与正常对照组比较及手术前后相比差异均不显著(P>0.05),提示舌鳞癌患者的体液免疫功能影响不明显。而应用 OKT 系列单克隆抗体以间接免疫荧光法对舌鳞癌患者手术前后的外周血 T 细胞亚群进行检测,结果表明,OKT_4/OKT_(?)细胞比值由1.28±0.19升至1.42±0.03(P<0.01)可较为客观地反映患者体内的细胞免疫功能状态,可作为判断舌鳞癌患者免疫状态的指标。     

抗人C4结合蛋白单克隆抗体的制备及某些方法的改进

用易于获得的C4BP/C4混合抗原免疫小鼠,EAC1q4C4BP血球间接血凝法作为筛选手段,获得了分泌抗C4BP抗体的杂交瘤细胞株。用单克隆抗体制成的亲和柱分离的C4BP,有C4BP的电泳特性和抑制EAC14与C2形成C3转化酶的活性。本文同时报告单克隆抗体制备方案的某些改进:1.小鼠免疫过程中用尾尖近似定量微量采血法对血中抗体水平定期监测,选择合适的小鼠供脾;2.用戊二醛固定的检测血球筛选杂交瘤,方法简便迅速,改变了杂交瘤筛选工作繁重的局面;3.用单细胞分离法达到单克隆化,缩短工作周期。     

用单克隆抗体和免疫毒素体外净化骨髓行自体骨髓移植

采取４例处缓解期的普通型急性淋巴细胞白血病患者的骨髓，用补体介导细胞毒法体外净化后进行自体骨髓移植，其中３例分别于移植后４２、３５和１２个月仍处于完全缓解；１例移植后４个月复发。对另外３例经化疗达完全缓解的未分化型（２例）和普通型（１例）急性淋巴细胞白血病患者采取骨髓，用免疫毒素法体外净化后行自体骨髓移植，２例分别于移植后１４和６个月仍处于完全缓解，１例移植后５个月，因患急性重型肝炎死亡，但骨髓仍     

~（99m）Tc－ccM_4（鼠／人嵌合抗体）胃癌放射免疫显像的研究

采用￣（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４ＭｃＡｂ对１０例胃癌病人、４例非胄癌病人进行放射免疫显像（ＲＩＳ）研究，观察了血清ＴＡＧ－７２抗原量、抗体注入量对ＲＩＳ阳性检出率的影响。结果表明注入￣（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４后，胃癌阳性检出率６０％，肝转移阳性检出率５０％，全部良性病变显示阴性结果。注入抗体８ｈ后为最佳显像时间，给予一定量抗体后，增加抗体用量并不提高ＲＩＳ的阳性检出率。血清ＴＡＧ－７２抗原含量与ＲＩＳ肿瘤阳性检出率明显相关。     

低亲和力抗tpA单克隆抗体在tpA纯化中的应用

用低亲和力组织型纤溶酶原激活剂（ｔｐＡ）Ａ链单克在抗体制备了免疫亲和层析柱，纯化５０ＯｍｌＢｏｗｅｓ细胞无血清培液中的ｔｐＡ，回收率达７５％，经ＳＤＳ一ＰＡＧＥ电泳证实纯化的洗脱液蛋白的分子量为６７ｋｄ，仅呈一条带，用发色底物法（Ｓ２３９０）测定表明洗脱液蛋白具有ｔｐＡ活性。     

抗组织因子单抗Sunol-cH36对大肠杆菌诱发恒河猴脓毒性休克的保护作用

目的　建立大肠杆菌K61H感染诱发的恒河猴脓毒性休克动物模型 ,探讨人源化抗组织因子单克隆抗体Sunol cH3 6对脓毒性休克并发DIC恒河猴动物模型的保护作用。方法　选用 8只健康成年恒河猴 ,常规麻醉后经大隐静脉注射大肠杆菌 4× 10 10 CFU/kg体重 ,实验组动物给予单克隆抗体Sunol cH 3 6,对照组给予等量磷酸盐缓冲液 (PBS) ,后经股静脉插管注入庆大霉素(13 .9mg/kg体重 ) ,全程观察各组动物存活情况 ,在实验过程中死亡或连续存活 7d后处死的实验组及对照组的动物按常规程序进行病理解剖 ,相关脏器的石蜡切片根据不同需要分别作HE染色和PSA染色 ,重点观察心脏、肝脏、肺、肾脏、肾上腺等器官所发生的显微结构病理变化。结果　经大肠杆菌K 61HATCC3 3 985诱导 ,成功建立了大肠杆菌恒河猴脓毒性休克动物模型 ;8只恒河猴均发生了脓毒性休克并发DIC的典型病理过程。未经单克隆抗体Sunol cH 3 6治疗的对照组动物平均存活时间为 17.2 5h ,实验组动物平均存活时间为 68.5 0h ,其中 1只持续存活 7d仍未见异常 ;实验组和对照组动物的相关脏器的病理检查差异有显著性。结论　单克隆抗体Sunol cH3 6具有较强的DIC拮抗作用和对脓毒性并发DIC恒河猴动物模型的保护功能。     

CEA-McAbs的制备及其与肿瘤组织的反应性

本文用常规杂交瘤技术,制备了FB_(12)、DA_1,FD_3、FD_4、D_3、TE_7及TC_(10)七株CEA-McAbs。并将它们对各种来源的肿瘤组织进行ABC酶标染色,结果肠癌组织的CEA含量比肠外肿瘤的高,在组织中染色范围更广。间接免疫荧光技术证实结肠癌建株细胞HR8348及HCI与CEA-McAbs反应性良好,提示这组CEA-McAbs是特异针对CEA抗原的,因而有一定临床价值。还运用免疫组化方法研究这七株CEA-McAbs与CEA抗原表位的作用特征,并将McAbs分为与不同表位作用的三个组。     

抗-HBs单克隆抗体细胞系与酶联免疫吸附试验“一步法”检测HBsAg

本文利用杂交瘤技术,经脾内直接注射免疫BALB/c小鼠,与骨髓瘤细胞(Sp 2/0)进行融合,建立了6株抗HEsMcAb,其中5株已能稳定地分泌单克隆抗体,并已得到腹水;5据中4株为抗a,1株为抗d,利用其中2株分别作为包被、酶标抗体,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)“一步法”检测HBsAg技术,经验证,该方法简便、快速、灵敏、特异、稳定。     

抗人活化血小板嵌合单克隆抗体SZ-51/Hu的纯化、鉴定和核素标记

目的评价抗人活化血小板嵌合单克隆抗体SZ-51/Hu核素标记及其用于临床血栓放射免疫显像的可行性.方法用免疫亲和层析法纯化SZ-51/Hu,并对其特性进行鉴定,以过量的2-亚氨硫醇预处理SZ-51/Hu,采用99Tcm-葡庚糖酸钠(GH)配体交换法标记.薄层层析法测定标记物的放化纯度.制备实验性狗股动脉血栓模型后,经静脉注入99Tcm-SZ-51/Hu进行SPECT显像.结果纯化的SZ-51/Hu分子量为160kD,亲和常数5.5104×108L/mol,每个活化血小板的结合位点数平均为10262±2372个.99Tcm抗体的标记率达96%以上.实验性狗股动脉血栓模型注射99Tcm-SZ-51/Hu后4h血栓显示清晰.结论SZ-51/Hu保留了原鼠源单抗SZ-51/Hu相同的活化血小板(GMP-140)结合特异性和亲和力.99Tcm标记后仍保持良好的体内特异性血栓定位能力,可望用于临床血栓放射免疫显像.