乳猪心钠素单克隆抗体的研究

以乳猪ＡＮＰ作为免疫原，通过杂交瘤技术建立了３株稳定分泌特异ＡＮＰ单克隆抗体的细胞株，对其所分泌单抗的生物学特性进行了鉴定，单抗滴度为（１～６）×１０－７，两种为ＩｇＧ１型，一种为ＩｇＧ２ａ型，所分泌的单抗能识别不同的抗原表位。     

鸡抗HBs抗体的制备及在人HBsAg检测中的应用

对所制备的抗鸡蛋黄IgY单克隆抗体1G11和3A6进行鉴定,标记后建立了检测鸡蛋黄IgY的间接ELISA方法.用乙型肝炎疫苗免疫25周龄蛋鸡,血清及蛋黄中第8d出现特异性抗体,在第60d效价达1×10~(-5).利用鸡抗HBs抗体,建立了检测血清HBsAg的夹心ELISA方法.检测HBsAg的最低浓度达0.5ng/ml.且特异性较目前商业化试剂盒高     

抗慢性B淋巴细胞白血病患者血清IgM McAb的纯化及其酶结合物的制备

应用DEAE-22纤维素离子交换柱和正辛酸法从接种杂交瘤细胞BALB/C 鼠的腹水或腹腔肿瘤浸出液中纯化抗慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)患者血清IgM 单克隆抗体(McAb),纯化物经巴比妥琼脂电泳,SDS-PAGE 鉴定为高纯度。ELISA 法证明具有高效价、高度特异性。采用过碘酸钠氧化结合法制备的辣根过氧化酶 HRPO-McAb 结合物的免疫活性、酶与蛋白质二者mol比、标记率均达到质量要求。     

用混合切片的免疫组化法直接筛选抗人结肠癌细胞的McAb

本文报道用混合切片的免疫组化法直接筛选抗人结肠癌细胞的McAb。结果表明,本法在一个切片上可同时观察到肿瘤及正常两类性质不同组织的抗原与McAb的反应性。单次即可筛选出只与肿瘤反应而不与正常组织反应的McAb。这对尽早决定被检杂交瘤细胞的取舍颇为重要。而且此结果的阴、阳性明确,易于判定和准确可靠,既省力、省物、省时。本法不仅可以用于肿瘤McAb的筛选,而且在一般的免疫组化实验中也有实际应用的参考价值。     

抗人肺癌单抗LC-1IgM片段对人肺癌免疫放射定位的研究

具有免疫活性的抗人肺癌单抗LC-I IgM经2.5%胰蛋白酶处理后,通过Sephadex G25或G-50柱分离获得LC1-IgM片段.ELISA检测表明单抗IgM片段有免疫活性,并通过SDS-PAGE分离、观察到单抗IgM片段的分子量主要是Fab和F(ah’)_2.此LC-l IgM片段用维生素C还原后与还原~(99m)Tc进行标记,纸层析分析标记率达90%以上.标记物确认无热原反应并无菌过滤后,从静脉注入肺癌患者或肺病患者体内,经24h后,SPECT扫描,同位素能浓聚于肺癌病灶上,显像十分清晰.55例患者中.肺癌患者48例,阳性率81.25%;肺部其它疾病患者7例,阴性率85.11%     

Blocking the short isoform of augmenter of liver regeneration inhibits proliferation of human multiple myeloma U266 cells via the MAPK/STAT3/cell cycle signaling pathway

Multiple myeloma (MM) is the second most common haematological malignancy and remains an incurable disease, with most patients relapsing and requiring further treatment. Augmenter of liver regeneration (ALR) is a vital protein affecting fundamental processes such as energy transduction, cell survival and regeneration. Silencing ALR inhibits cell proliferation and triggers apoptosis in human MM U266 cells. However, little is known about the role of 15-kDa-ALR on MM. In the present study, the role of 15-kDa-ALR in human MM cells was investigated. Blocking extracellular 15-kDa-ALR with an anti-ALR monoclonal antibody (McAb) decreased the proliferation and viability of U266 cells. However, the results of flow cytometry revealed no changes in apoptosis, and the expression levels of Bax, Bcl-2, caspase-3 and cleaved caspase-3 were not affected. However, combined treatment with anti-ALR McAb and epirubicin increased the apoptosis of U266 cells. RNA sequencing results indicated that the ERK1/2, JNK-MAPK and STAT3 signaling pathways, as well as the cell cycle, were associated with the mechanism of action of the anti-ALR McAb, and PCR, western blotting and cell cycle analysis confirmed these results. The present findings suggested that blocking extracellular 15-kDa-ALR in U266 cells with an anti-ALR McAb decreased cell proliferation via the MAPK, STAT3 and cell cycle signaling pathways without increasing apoptosis. Thus, 15-kDa-ALR may be a new therapeutic target for myeloma.     

克拉玛依地区的利什曼病Ⅻ.利什曼原虫单克隆抗体对大沙鼠及白蛉体内利什曼原虫的检测

本文报道建立的抗杜氏利什曼L.donovani,抗硕大利什曼L.major,抗热带利什曼L.tropica及抗新疆克拉玛依大沙鼠体内的利什曼原虫的4种单克隆抗体(McAb),以免疫荧光法的交叉反应显示出有较强的特异性,应用McAb的dot-ELISA试验,对新疆大沙鼠体内分离的利什曼原虫及白蛉自然感染的利什曼原虫前鞭毛体进行检测,证实新疆克拉玛依鼠体、蛉体的利什曼原虫仅与当地大沙鼠体内利什曼原虫制备的McAb呈阳性反应。     

抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达

为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。     

单克隆抗体ELISA检测班氏丝虫病人血清循环抗原

应用抗马来微丝蚴抗原4B_1株单克隆抗体(McAb)和抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb酶联免疫吸附试验(ELISA)检测班氏微丝蚴血症者血清中循环抗原,阳性率分别为78.46％(102/130)和87.13％(88/101);检测51例晚期丝虫病人血清,阳性率分别为3.92％和1.96％;36例经治疗后微丝蚴血症阴转者血清,阳性率分别为13.89％和8.33％。丝虫病非流行区99例肠道蠕虫感染者阳性率分别为16.16％和5.05％。结果表明抗马来成虫代谢抗原4B_7株McAb应用于诊断班氏丝虫感染的效果优于抗马来微丝螺4B_1株McAb。     

EPO单克隆抗体的制备

目的：制备EPO单克隆抗体,为高原红细胞增多症的治疗研究提供材料。方法：用细胞融合技术制备能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,对该细胞株扩增培养,注射入BALB小鼠腹腔内,（7～10）天后搜集腹水并进行腹水抗体效价测定,提纯,浓缩,进行抗体浓度测定。结果：得到一株能稳定分泌EPO单克隆抗体的细胞株,并制备出高效价的EPO单克隆抗体。结论：该EPO单克隆抗体的制备成功为高原红细胞增多症的治疗的基础研究提供了原料。