肿瘤坏死因子-α抗体对梗阻性黄疸大鼠肾脏IP3R表达的影响

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)单克隆抗体对梗阻性黄疸大鼠肾功能的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、干预组,采用胆总管结扎(CBDL)造梗黄模型,干预组于结扎后第2周开始腹腔注射TNF-α单克隆抗体[0.1 mg/(kg.2d)]。并于干预后1、2、3、4周麻醉动物,假手术组与5周模型组动物同批麻醉,留取肝和肾组织。采用HE染色确定模型建立情况,通过Western blot方法检测1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)的含量,免疫组织化学方法检测IP3R在肾组织的表达。结果 HE染色显示模型组和干预组肾间质有炎性细胞浸润,干预组较轻。免疫组化和Western blot显示模型组肾组织IP3R蛋白表达较多,干预组略下降,但均明显高于假手术组(P<0.05)。结论梗阻性黄疸时肾小球前小动脉平滑肌细胞内的IP3R蛋白的表达增强,而TNF-α单克隆抗体干预治疗可减轻IP3R表达增强的程度,部分减轻肾功能损害的发生。     

JPG3单克隆抗体Dot-ELISA用于血吸虫病疗效考核的探讨

目的评估JPG3单克隆抗体Dot-ELISA在血吸虫病疗效考核中的应用价值。方法以吡喹酮(50mg·kg-1,顿服)治疗血吸虫病人后,采用JPG3单抗Dot-ELISA方法,追踪检测治疗后半年、1年和2年病人血清中的循环抗原(CAg),并计算其阴转率。结果治疗后半年、1年和2年病人血清中CAg阴转率分别为70.63%、80.40%和84.34%,与抗体检测方法(IHA)的阴转率分别为15.38%、27.24%和49.23%,有非常明显的差异;比较不同感染度、不同性别和不同年龄组患者之间CAg的阴转率均没有显著性差异。结论JPG3单抗Dot-ELISA在血吸虫病疗效考核中有较好的应用价值。     

新的识别人活化B细胞分化抗原5C5单克隆抗体（5C5－G＿1）的制备和鉴定

新制备的抗人活化Ｂ细胞分化抗原５Ｃ５单克隆抗体５Ｃ５－Ｇ＿１经Ｗｅｓｔｅｒ印迹分析表明，该分化抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（还原条件下）显示五条带，分子量分别为９２ｋＤ、５２ｋＤ±（两条）、４０ｋＤ和２０ｋＤ。用单抗５Ｃ５和单抗５Ｃ５－Ｇ＿１的混合物，从３Ｄ５细胞的λｇｔｌｌｃＤＮＡ文库中筛选到７个阳性ｃＤＮＡ克隆。     

抗HIV-1 gp41 合成多肽C34单抗的制备及生物学活性

目的 制备针对C34和C46单抗，并以此为工具研究gp41表位，进一步了解HIV－1包膜蛋白的作用机理和病毒的感染机制，为寻找新的治疗靶点提供抗体工具。方法 常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗C34和C46的单克隆抗体，并鉴定其特异性位点，还用ELISA法、MTTI法及荧光分子探针技术对单抗的生物学活性进行研究。结果 获得了3株抗C34单克隆抗体、2株抗C46单抗。此5个单抗均与C34结合，并抑制N36肽与C34肽复合物的形成；其中效价最高的1G1对H9／HIVⅢB细胞的生长有刺激作用，对H9／HIVⅢB细胞和MT－2细胞的融合无明显影响。结论 得到5株可与C34反应，并可抑制C34与N36多肽结合的单抗，其中1G1所识别的表位可能为增强性或刺激性表位。     

丙氨酸氨基转移酶单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备特异性抗人丙氨酸氨基转移酶(ALT)单克隆抗体(McAb)并鉴定其特性。方法用纯化的ALT抗原(20μg/次)免疫BALB/C小鼠5只,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞(按细胞数5∶1比例)融合,采用间接ELISA筛选杂交瘤细胞,阳性孔经3次有限稀释法克隆。用ELISA检测腹水及上清的抗体效价和相对亲和力,用Western blotting检测McAb的特异性,用秋水仙素阻断法进行染色体分析。结果得到1株杂交瘤细胞株(7D1),其染色体数目为95—106,其分泌的抗体为IgG1,轻链为κ型;上清和腹水抗体效价分别为10-4和10-6;SDS-PAGE显示该抗体在55和25 kD附近各有1条带,与预计的分子量大小一致。纯化抗体的亲和常数为2.2×1011。PAGE后Western blot检测显示该McAb可与人血清中的ALT结合。结论所制备的杂交瘤细胞株能分泌抗人ALT的特异性McAb。     

PHA,抗CD3单抗,IL—2诱导脾细胞增殖及其抗肿瘤效应的实验研究

本文应用PHA、抗CD_3单抗、IL-2体外诱导正常人脾细胞增殖,并探讨了在不同条件的诱导下脾细胞体外增殖能力和抗肿瘤效应,以及细胞表面标志的表达特征.结果显示,抗CD_3单抗、PHA不仅可增强IL-2诱导脾细胞的增殖作用,且两者合用有协同增强效应.PHA、抗CD_3单抗还可增强体外扩增细胞CD_4和Tas受体的表达.LAK细胞抗肿瘤活性测定结果提示,PHA有直接和间接增强LAK细胞抗肿瘤效应的作用,抗CD_3单抗则可通过增加细胞增殖作用,间接地增强LAK细胞的抗肿瘤活性.     

CD3AK细胞和LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床和实验研究

将５１例晚期恶性肿瘤患者（男性２３例，女性２８例）分成两组，其中一组（３１例）以ＣＤ３ＭｃＡｂ（ＣＤ３单克隆抗体）和小剂量ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）共同诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞治疗，另一组（２０例）输注大剂量ＩＬ－２（１０００ｕ／ｍｌ）诱导的常规ＬＡＫ细胞治疗，以探讨降低ＩＬ－２用量、提高杀伤细胞细胞毒活性的可能性。结果显示ＣＤ３ＡＫ组患者生活质量改善、症状缓解均优于ＬＡＫ组。ＣＤ３ＡＫ组ＰＲ＋ＭＲ率较ＬＡＫ组高２９．０％，Ｓ＋Ｐ率和死亡率分别较ＬＡＫ组低１２．４％和９．６％。同时比较了ＣＤ３ＡＫ细胞与ＬＡＫ细胞的体外增殖和细胞毒活性，结果表明ＣＤ３ＡＫ细胞增殖率高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者在０．０５水平无显著差异。提示ＣＤ３ＭｃＡｂ在刺激杀伤细胞活性，尤其在提高其增殖能力方面，具有显著的作用，ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２能更有效地治疗晚期恶性肿瘤。     

分泌抗细粒棘球蚴单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文采用棘球蚴囊壁生发展制备抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与骨髓瘤ＳＰ２／Ｏ进行细胞融合，经多次筛选克隆后建立了分泌抗细粒棘球蚴单克隆抗体细胞株Ｃ５Ｆ２Ｃ１１Ａ１１，Ｃ１２Ｃ１１Ｆ６Ｇ３，Ｃ１２Ｈ１２Ｆ８Ｄ５三株。应用ＥＬＩＳＡ及免疫组化法检测该三株具有特异性，培养上清分泌抗体滴度分别为１：２５６０，１：５１２０，１：５１２０。     

应用胶体金技术对钩体抗原超微定位的研究

作者应用胶体金技术和单克隆抗体1A7E7和2F9D4成功地对钩体抗原进行了超微定位的研究,发现胶全金颗粒主要分布于钩体外膜部位,提示1A7E7和2F9D4所识别的抗原位于钩体外膜,为研究钩体抗原的超微定位提供了可行的方法。