组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687对U937细胞和正常骨髓CD34^＋细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响

本研究目的在于探讨组蛋白H3K27甲基化抑制剂新药EPZ005687对白血病细胞系U937细胞和正常骨髓CD34＋细胞的凋亡、增殖抑制和细胞周期的影响。以不同浓度的EPZ005687作用于U937细胞,在不同时间点采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡,WST-1法检测细胞增殖,7-AAD流式细胞术检测法检测细胞周期,免疫化学法检测H3K27组蛋白甲基化活性。结果表明：EPZ005687显著诱导U937细胞的凋亡,在0.5、1、5和10μmol/L浓度下作用于U937细胞48 h后,其凋亡率分别为3.96%±0.79%、5.74%±0.73%、13.34%±1.77%和25.24%±2.55%,而EPZ005687对正常骨髓CD34＋细胞的凋亡影响较小;在0.5、1、5和10μmol/L浓度下CD34＋细胞凋亡率分别为3.64%±0.62%、4.28%±0.99%、6.18%±1.19%和7.56%±1.34%;0.5、1、5和10μmol/L浓度的EPZ005687分别作用于U937细胞12 h至96 h,作用CD34＋细胞1至5 d,明显观察到EPZ005687显著抑制U937细胞的增殖且呈剂量依赖性,而对正常CD34＋细胞的增殖抑制并不明显。细胞周期分析显示,1μmol/L EPZ005687作用72 h可使U937细胞明显阻滞于G1期（64.18%±13.27%vs 49.43%±12.54%）,S期细胞比例明显下降低（9.67%±2.61%vs 15.26%±5.58%）,而正常CD34＋细胞因多数细胞位于G1期,S期细胞较少而不受其影响。进一步的H3K27组蛋白甲基化检测分析显示,EZP005687可明显地降低U937细胞的H3K27组蛋白甲基化,而不降低正常CD34＋细胞的H3K27组蛋白甲基化。结论：组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687明显抑制U937细胞的增殖,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,但对正常造血细胞CD34＋影响较小,可作为一种潜在的血液肿瘤治疗药物应用于临床。     

肝脏表达的Niemann-Pick C1-Like 1调节小鼠的胆汁胆固醇浓度

目的:探讨人(NPC1L1)在小鼠肝脏的过表达对胆汁胆固醇重吸收的影响。方法:通过杂交NPC1L1基因敲除小鼠(L1-KO)与肝脏过表达人的NPC1L1的转基因小鼠(L1-Tg),获得无小鼠自身NPC1L1基因表达、在肝脏过表达或不表达人NPC1L1基因的小鼠(L1-Tgliv+和L1-Tgliv-)。给予L1-Tgliv+小鼠(实验组)及L1-Tgliv-小鼠(对照组)含0.2%胆固醇的饮食并测定2组小鼠胆汁的脂质分泌、血浆的脂质水平和粪便核心固醇的分泌。结果:与L1-Tgliv-小鼠相比,L1-Tgliv+小鼠的胆汁胆固醇水平降低了90%,同时粪便核心固醇的分泌也降低了10%,而血浆总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯水平分别升高了38.6%、47.6%和36.6%。结论:小鼠肝脏NPC1L1的过表达可提高肝脏对胆汁中胆固醇的重吸收。     

老年COPD患者CD4＋Foxp3＋T细胞、PCT、NF—KB的检测及临床应用

目的观察老年慢性阻塞性肺病（COPD）急性加重期、稳定期患者和健康老人CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg细胞）比例、降钙素原（PCT）以及痰巨噬细胞中核因子-B（NF—KB）p65亚单位表达的变化,为临床诊疗提供参考。方法42例COPD急性加重期老年患者为观察组1,39例COPD稳定期老年患者为观察组2,35例健康老人为对照组。检测3组患者Treg细胞比例、PCT水平以及NF—KBp65百分比。结果①3组之间外周血Treg细胞比例差异有统计学意义（P〈0．05）;②观察组1与观察组2、对照组之间PCT水平均差异显著（P〈0．05）,观察组2与对照组之间PCT水平差异无统计学意义（P〉0．05）;③3组之间痰巨噬细胞NF—KBP65差异有统计学意义（P〈0．05）。结论炎症机制及免疫机制均在老年COPD患者中发挥了重要作用。监测CD4＋Foxp3＋调节性T细胞、PCT、NF—KB对老年COPD患者病情变化的诊治提供了重要的实验室依据。     

冠心病与外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的关系

目的 探讨不同类型冠心病患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平变化,以及CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉粥样硬化严重程度的相关性.方法 选择2012年6月-2012年12月在杭州市第一人民医院心内科住院,经冠状动脉造影术检查及治疗的患者57例,其中造影检查正常对照组13例,稳定型心绞痛组14例,不稳定型心绞痛组15例,急性心肌梗死组15例.采用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例,评价各组间差异,并对外周血T淋巴细胞亚群与冠状动脉粥样硬化严重程度进行相关性分析.结果 ①外周血CD4＋CD25＋细胞占CD4＋淋巴细胞比例在对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、心肌梗死组分别为（57.51＆#177;12.62）％、（50.19＆#177;9.27）％、（39.85＆#177;11.88）％和（32.37＆#177;9.56）％;②急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例较稳定型心绞痛组和对照组显著减少（P＜0.05）,但是急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组之间,以及稳定型心绞痛组和对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.③外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉Genisi评分呈显著负相关（r=-0.617,P＜0.01）.结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞参与了冠心病的发生发展,是导致动脉粥样斑块不稳定的原因之一,与斑块的不稳定呈显著负相关.     

苏灵局部止血及体外抑制FXa+t-PA诱导纤溶酶原激活作用

目的探讨苏灵(SL)体外对人血浆凝固时间的影响、局部给药对小鼠剪尾后出血的促凝作用及体外对纤溶系统的影响。方法将磷酸钠缓冲液、SL溶液和人凝血酶溶液与人血浆混合,血凝仪测定其凝固时间;将分别浸有磷酸钠缓冲液(溶媒组)、SL溶液和人凝血酶溶液的纱布敷于小鼠剪尾后的伤口上,计算出血时间和出血量,评价各组的止血效果;采用SDS-PAGE方法检测SL对人纤溶酶原的降解作用,吸光度法测定SL体外对FXa+t-PA诱导的纤溶酶原激活作用的影响。结果 SL和人凝血酶能明显缩短人血浆凝固时间,并能明显缩短小鼠剪尾的止血时间及减少出血量,与溶媒组比较差异有统计学意义(P0.05);SL对人纤溶酶原没有直接的裂解作用,不激活人纤溶酶原;SL可抑制FXa+t-PA诱导的人纤溶酶原体外激活。结论 SL具有良好的局部止血效果,其部分作用机制可能与抑制FXa激活纤溶系统有关。     

复方肾华片对急性脑缺血再灌注损伤大鼠肾小管Na+-K+-AT酶的调节作用

Objective:To observe the effect of Compound Shenhua Tablet(复方肾华片,SHT) on the sodiumpotassium-exchanging adenosinetriphosphatase(Na~+-K~+-ATPase) in the renal tubular epithelial cells of rats with acute ischemic reperfusion and to investigate the mechanisms underlying the effects of SHT on renal ischemic reperfusion injury(RIRI).Methods:Fifty male Wistar rats were randomly divided into the sham surgery group,model group,astragaloside group[150 mg/(kg-d)],SHT low-dose group[1.5 g/(kg·d)]and SHT high-dose group[3.0 g/(kg·d)],with 10 rats in each group.After 1 week of continuous intragastric drug administration,surgery was performed to establish the model.At either 24 or 72 h after the surgery,5 rats in each group were sacrificed,blood biochemistry,renal pathology,immunoblot and immunohistochemical examinations were performed,and double immunofluorescence staining was observed under a laser confocal microscope.Results:Compared with the sham surgery group,the serum creatinine(SCr) and blood urea nitrogen(BUN) levels were significantly increased,Na~+-K~+-ATPase protein level was decreased,and kidney injury molecule-1(KIM-1) protein level was increased in the model group after the surgery(P0.01 or P0.05).Compared with the model group,the SCr,BUN,pathological scores,Na~+-K~+-ATPase,and the KIM-1 protein level of the three treatment groups were significantly improved at 72 h after the surgery(P0.05 or P0.01).And the SCr,BUN of the SHT low- and high-dose groups,and the pathological scores of the SHT high-dose group were significantly lower than those of the astragaloside group(P0.05).The localizations of Na~+-K~+-ATPase and megalin of the model group were disrupted,with the distribution areas overlapping with each other and alternately arranged.The severity of the disruption was slightly milder in three treatment groups compared with that of the model group.The results of immunofluorescence staining showed that the SHT high-dose group had a superior effect as compared with the astragaloside group and the SHT low-dose group.Conclusions:The SHT effectively alleviated RIRI caused by ischemic reperfusion,promoted the recovery of the polarity of renal tubular epithelial cells,and protected the renal tubules.The therapeutic effects of SHT were superior to those of astragaloside as a single agent.     

藏区“9+3”护理专业学生临床教学模式的应用效果

目的 探讨改良后的临床教学模式在藏区“9+3”护理专业学生中的应用效果。方法 将2011~2012年在泸州医学院附属成都三六三医院(以下简称“我院”)实习的9名藏区“9+3”护生作为对照组,将2012~2013年在我院实习的10名藏区“9+3”护生作为实验组,分别实施常规的师生“一带一”临床教学模式和改进后的教学模式。结果 实验组学生的学习态度、知识技能、临床能力评分均高于对照组的学生,实验组学生对临床教学工作的满意度高于对照组学生,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 改进后的临床教学模式能更好地提高藏区“9+3”学生的临床综合能力。     

全科医学概论中实施LBL＋TBL教学法效果评估

目的了解学生对LBL＋TBL教学法的认同度及满意度,为进一步在全科医学概论理论课教学中使用和推广本教学法提供参考。方法在首都医科大学2010级临床专业定向班实施3学时的全科医学概论LBL＋TBL教学。教学结束后对班上33名学生进行问卷调查。结果①75％以上的人群完全认同LBL＋TBL教学效果;②大多数人完全认同LBL＋TBL教学能够提高学生的自主学习及积极性;③75％以上的学生完全认同LBL＋TBL能够提高学生的团队合作能力;④LBL＋TBL教学存在的问题中,以耗时多、学生时间或精力不够、学生负担加重为主。结论LBL＋TBL教学法能使学生自主学习积极性、团队合作意识及能力提高,值得在以LBL教学法为主的全科医学概论教学中联合开展TBL教学。     

基于ANT协议的无线温度采集网络

为解决各级医疗机构楼宇自控系统中不同环境下温度监测布线困难、维护不易的缺点,设计了一种基于ANT协议的无线温度采集网络。方案采用STC12LE4052AD微处理器、NRF24AP2无线网络模块和单总线数字温度传感器DS18B20等搭建硬件平台,并用Visual Studio2010 C＋＋编写温度监测软件实时显示温度和采集记录温度。试验表明,该网络运行稳定,采集环境温度准确,具有低能耗、低成本和易组网等优点。     

航空生理环境对肝胆系统功能影响的研究进展

随着高性能战机的装备使用,飞行人员所处的航空生理环境也发生相应的变化。肝胆系统的解剖生理特点决定了其容易受到低压、低氧、加速度飞行等航空生理环境的影响。近年来国内外对航空生理环境影响飞行人员肝胆系统生理功能,进而导致肝胆系统相关疾病的机制研究已取得一定进展。本文就此作一综述。