辅助性T细胞9在类风湿关节炎发病中的作用探讨

目的 探讨Th9细胞及相关细胞因子在类风湿关节炎(RA)中表达的改变及可能的机制.方法 采集20例健康人(HC)和20例RA患者(RA组)的外周血,用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子(TGF)-β和干扰素(IFN)-γ水平;流式细胞术检测Th9细胞数;实时定量PCR检测IL-9 mRNA、转录因子PU.1 mRNA,分析这些指标可能的相互关系.结果 RA组患者外周血中CD4+ IL-9+T细胞、CD4+ PU.1 +T细胞、CD4+ IL-9+ PU.1 +T细胞均缺如.细胞因子检测:IL-9水平在HC组为(1.24±0.44)×10-9 g/L,RA组为(1.33 ±0.53)×10-9 g/L(P =0.558);IL-4水平在HC组为(8.59±4.07) ×10-9 g/L,RA组为(5.95±5.73) ×10-9 g/L(P =0.101);TGF-β水平在HC组为(1238±329) μg/L,RA组(712±254) μg/L,(P=0.00);IFN-γ水平在HC组均低于检测水平,RA患者中5例IFN-γ水平升高.HC组IL-9 mRNA表达为(0.24±0.04),RA组为(0.24±0.02) (P =0.764);HC组PU.1 mRNA表达为(0.38 ±0.02),RA组(0.13±0.02) (P =0.000).结论 RA组患者外周血促Th9分化关键细胞因子水平降低.抑制其分化关键细胞因子平有所升高,导致PU.1 mRNA表达受抑,PU.1蛋白无法合成不能支持IL-9mRNA表达.RA患者外周血不存在Th9细胞分化条件,推测循环血Th9细胞可能不参与RA发病机制.     

Treg细胞在儿童过敏性哮喘SIT治疗过程中的变化

目的：本研究通过观察对室尘螨（HDM）过敏的儿童哮喘患者,过敏原特异性免疫治疗（allergen specific immunotherapy, SIT）后外周血CD4＋CD25＋CD127-Treg细胞（regulatory T cell, Treg）细胞）占CD4＋T cell的百分比的变化,以及它们在SIT治疗中的作用,初步探讨儿童过敏性哮喘SIT的机制,从而为哮喘的防治提供新思路。方法选取郑州大学第一附属医院儿科门诊48例儿童过敏性哮喘患者分两组,一组进行标准化SIT 1.5-2年后,采集两组患者的外周静脉血。用流式细胞仪检测每组标本中CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比,结果采用统计学软件进行统计学分析。结果CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比在HDM-SIT组显著增高。结论本实验进一步证实了哮喘患者SIT治疗有效;在HDM-SIT组CD4＋CD25＋CD127-T细胞占CD4＋T细胞的百分比升高,提示CD4＋CD25＋CD127-T细胞可能在儿童过敏性哮喘特异性免疫治疗中起重要作用。     

柠檬精油的活性成分分析

目的通过GC/MS分析LEO的活性成分。方法将LEO溶于正己烷,配成2%的溶液,每次进样1μL,流经DB-5毛细管柱,采用GC/MS技术并与NIST标准谱库进行比对确定LEO中各化学成分,按峰面积归一化法得出各组分百分含量。结果 GC/MS分析发现LEO的12种化学成分,占总LEO含量的98.85%,其中含量最高的是m-Mentha-6,8-diene,(R)-(+)-达到77.04%,其次为-Terpinen占14.90%。结论该试验建立的方法简便、快捷、准确,可为EO检测的标准操作流程提供参考,并为建立精油指纹图谱库提供可能。     

急性化脓性扁桃体炎营分证外周血T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的：探讨急性化脓性扁桃体炎营分证患者外周血中T淋巴细胞亚群数目及比值变化的临床意义。方法：将55例观察对象分为观察组（急性扁桃体炎营分证患儿）25例与对照组（健康体检儿童）30例。采用免疫荧光流式细胞技术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋的细胞数目及细胞数比值,并进行分析比较。结果：两组CD3＋、CD4＋、CD8＋细胞数目比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）,而CD4＋／CD3＋和CD4＋／CD8＋细胞数比值明显升高,CD8＋／CD3＋比值明显降低,两组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论：急性化脓性扁桃体炎营分证可能与T淋巴细胞CIM＋／CD3＋和CD4＋／CD8＋比值升高、CD8＋／CD3＋比值降低有关。     

MBP促进出血性卒中大鼠康复的作用机制研究

目的研究髓鞘碱性蛋白(MBP)对实验性脑出血大鼠神经保护作用机制。方法选择SD大鼠60只,脑出血造模成功后随机分为MBP组、磷酸盐缓冲盐水(PBS)组、卵白蛋白(OVA)组,每组30只。每天应用Longa五级评分法进行神经功能缺损评分,不同亚组按相应时间点取材,分别测定出血周围脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的免疫组化评分。取脾组织制作匀浆,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定Foxp3与β-actin的相对密度值。结果 MBP组在对应时间点神经功能缺损评分及GFAP和BDNF的表达均明显高于OVA组和PBS组(P0.05或0.01);OVA组与PBS组比较均无显著性差异。Foxp3mRNA在大鼠脾脏中的表达MBP组均明显低于OVA组和PBS组(P均0.01),OVA组与PBS组比较无显著性差异。结论 MBP对实验性脑出血后大鼠的行为学缺损有治疗作用,可减轻症状,上调BDNF、GFAP蛋白表达水平,降低Foxp3 mRNA的表达;对血肿周边神经元产生保护作用,促进中枢神经系统损伤的恢复。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠的免疫调控作用

目的：研究补肾通督胶囊对 CIA 大鼠的免疫调控作用。方法：将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊（BS）低剂量组、中剂量组、高剂量组和雷公藤组,接受相应治疗。结果：BS 对脾脏、外周血淋巴细胞有调控作用,对血清 IL6和 II 型胶原蛋白抗体的水平有抑制作用。结论：补肾通督胶囊对外周血淋巴细胞的调控作用效果显著。     

父母供子女单倍型造血干细胞移植治疗恶性血液病

背景：单倍型造血干细胞移植是治疗恶性血液病的一种有效方法,合适的供者及快速查找到合适的供者有助于提高移植的成功率。目的：比较父母供子女单倍型造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床疗效。方法：对郑州大学第一附属医院92例恶性血液病患者行父母为供者的单倍型造血干细胞移植治疗,分为父供子移植、父供女移植、母供子移植、母供女移植4组,对比4组患者移植物抗宿主病的发生率、复发率、2年无病生存率及总生存率等。结果与结论：92例患者均完全植入并获得造血重建,4组急性移植物抗宿主病发生率、慢性移植物抗宿主病发生率和复发率差异无显著性意义（P〉0.05）。但4组Ⅲ、Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率、2年无病生存率、2年总生存率差异有显著性意义（P〈0.05）。其中父供子移植组、母供女移植组的Ⅲ、Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率低于父供女移植组和母供子移植组;同时父供子移植组和母供女移植组的2年无病生存率、2年总生存率高于父供女移植组和母供子移植组。可见父母供子女单倍型造血干细胞移植是安全可行的,供受者性别相同比供受者性别不同的疗效好。     

成都市新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查分析

目的 了解成都地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发病分布情况.方法 采用NADP＋氧化还原酶法,对11 085例（男6 440例,女4 645例）就诊患儿进行红细胞中G6PD活性的定量检测.结果 在11 085例受检者中,检出G6PD缺乏者677例,总检出率6.1%.其中男婴545例,占男婴检查人数的8.46%（545/6 440）;女婴132例,占女婴检查人数的2.84%（132/4 645）.结论 成都地区G6PD缺乏症检出率较高,应在新生儿期常规开展G6PD检测,及早诊断,采取有效防范措施,预防由G6PD缺乏引起的新生儿高胆红素血症及核黄疸的发生.     

慢性乙肝患者体内HDL和HBV DNA水平相互关系的研究

目的检测慢性乙肝患者血清HBV DNA和HDL水平变化的相互关系,检测不同HDL水平的乙肝患者其体内IL-10及CD4＋CD25＋T细胞的水平,以期进一步揭示HDL对HBV DNA水平的影响以及影响机制。方法荧光定量PCR方法检测我院152例慢性乙肝患者血清HBV-DNA的水平,全自动生化分析仪检测血清HDL水平,ELISA法检测患者血清中IL-10的水平,流式细胞法检测患者外周血中CD4＋CD25＋T细胞的水平。结果血清HBV DNA与HDL、IL-10及CD4＋CD25＋T细胞的水平均呈负相关,HDL的水平和IL-10、CD4＋CD25＋T细胞的水平呈正相关。结论在慢性乙肝患者体内,HDL具有抑制HBV DNA复制的作用,HDL的抗病毒作用很可能是通过诱导T细胞分化为CD4＋CD25＋T细胞,并通过该细胞产生大量IL-10来达到其抗病毒的作用。     

CD8＋T淋巴细胞在动脉粥样硬化斑块中作用的研究

摘要：目的通过应用基因敲除（APOE-／-）小鼠的动脉粥样硬化斑块的模型进一步探讨免疫反应在动脉动脉粥样硬化的作用。方法建立小鼠动脉粥样硬化硬化模型。实验小鼠选取Apoe基因敲除（Apoe-／-）小鼠,及与基因敲除小鼠同源的C57BL／6小鼠,并分别随机分为高脂饮食组（Ah、Ch）,正常饮食组（An、Cn）;Ah组及ch组小鼠给予高脂饮食喂养12周后处死动物,切取主动脉弓并观察粥样斑块形成情况。主动脉标本做HE染色,光镜下观察病理改变;使用免疫组织化学染色方法检测粥样斑块中CD8＋T淋巴细胞的含量;应用Motic Images Advanced3．2图像分析仪系统测量主动脉内膜CD8＋T免疫沉积物平均灰度值。结果动脉粥样硬化斑块大体形态：Ah组小鼠有动脉粥样硬化斑块形成,斑块主要集中在动脉分叉处。An组小鼠无动脉粥样硬化斑块形成。Ch组小鼠未见动脉斑块形成,但腹腔及各组织脏器表面脂肪含量明显增多。Cn组小鼠无动脉斑块形成。HE染色标本中,Ah组斑块程度、泡沫细胞数量较Cn组明显增多,Ch组较正常对照组斑块程度、泡沫细胞数量增多,但程度较轻,An组与正常对照组相比,内膜光滑,无明显差别。Ah组、Ch组及An组小鼠表达CD8＋T细胞较Cn组明显减少（P〈O．01）;CD8＋T表达程度表现为：Ah〈Ch〈An〈Cn。结论在小鼠动脉粥样硬化模型中随着斑块数量、泡沫细胞数目增多,CD8＋T淋巴细胞的表达呈减少趋势,CD8＋T淋巴细胞与动脉粥样硬化进展的免疫机制相关。