JAZF1对胶质母细胞瘤侵袭和迁徙的影响及分子机制研究

目的探讨JAZF1对脑胶质母细胞瘤（GBM）细胞侵袭、迁徙的作用及相关作用机制。 方法通过挖掘TCGA数据库中不同级别胶质瘤患者JAZF1的转录水平差异以及患者生存曲线差异,然后通过科内收集的胶质瘤样本提取总蛋白进行Western blot实验研究JAZF1蛋白水平在胶质瘤不同级别中的差异,通过Trans-well实验、细胞划痕实验研究JAZF1对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响,通过Western blot实验研究JAZF1对胶质瘤细胞侵袭和迁徙能力的关键分子的影响。 结果（1）Ⅳ级胶质瘤中JAZF1的mRNA、蛋白水平的表达上相较于Ⅱ级和Ⅲ级胶质瘤明显更高,差异具有统计学意义（P<0.05）;（2）JAZF1高表达组患者的中位生存期为13.0个月,而低表达组中位生存期为30.2个月,差异具有统计学意义（P<0.05）;（3）JAZF1表达下降后,U87M细胞的侵袭和迁徙能力均显著下降,差异具有统计学意义（P<0.05）;（4）干扰JAZF1的表达后,p-Akt、MMP9、MMP2的表达水平显著下调,差异均具有统计学意义（P<0.05）,而Akt的表达变化不明显,差异无统计学意义（P>0.05）。 结论JAZF1在GBM中高表达且显著缩短了患者的中位生存期,通过调控Akt的磷酸化水平进一步调控相应信号通路下游的MMP9、MMP2的表达影响GBM的侵袭和迁徙能力。     

MicroRNA-377 Targets Zinc Finger E-box-Binding Homeobox 2 to Inhibit Cell Proliferation and Invasion of Cervical Cancer

A large number of microRNAs (miRNAs) are aberrantly expressed in cervical cancer and play crucial roles in the onset and progression of cervical cancer by acting as either an oncogene or a tumor suppressor. Therefore, investigation of the expression, biological roles, and underlying mechanisms of miRNAs in cervical cancer might provide valuable therapeutic targets in the treatment for patients with this disease. In this study, miRNA- 377 (miR-377) was downregulated in cervical cancer tissues and cell lines. Decreased miR-377 expression was strongly correlated with the International Federation of Gynecology and Obstetrics (FIGO) stage, lymph node metastasis, and distant metastasis in patients with cervical cancer. Enhanced expression of miR-377 prohibited cell proliferation and invasion in cervical cancer. Bioinformatics analysis predicted that zinc finger E-boxbinding homeobox 2 (ZEB2) was a potential target of miR-377. Subsequent experiments confirmed that ZEB2 is a direct target gene of miR-377 in cervical cancer. In addition, ZEB2 was overexpressed in cervical cancer tissues and was inversely related with miR-377 levels. Furthermore, the suppressive effects of miR-377 on cervical cancer proliferation and invasion were rescued by restored ZEB2 expression. Overall, our findings indicated that miR-377 decreases proliferation and invasion of cervical cancer cells by directly targeting ZEB2 and provides novel evidence of miR-377 as a novel therapeutic strategy for the therapy of patients with this malignancy.     

棕榈酸在体外通过促进凋亡作用抑制宫颈癌Hela细胞增殖的研究

目的 探讨体外棕榈酸(Palmitic acid,PA)抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡作用及其部分机制。方法 体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为对照组(不加药)、PA处理组(分别加入PA 25、50、100μg/mL处理),CCK-8法检测各组HeLa细胞增殖情况,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测不同浓度PA处理后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Cleaved-caspase-3的表达,PA处理后的HaLa细胞用膜联蛋白V/碘化丙啶双标,随后用流式细胞仪检测其凋亡情况。结果 与对照组比较,PA处理HeLa细胞后增殖抑制率逐渐增高(P＜0.05);PA处理后,HaLa细胞的迁移与侵袭能力显著下降(P＜0.05);同时,PA处理HeLa细胞后,随着PA浓度增高,Bcl-2基因表达逐渐降低,而Bax和Cleaved-caspase-3基因表达逐渐增强与流式细胞仪检测结果相符合,HeLa细胞的凋亡率随着PA浓度增高逐渐增高(P＜0.05)。结论 PA体外可抑制HeLa细胞增殖,减少其迁移与侵袭水平,并诱导其凋亡,其机制可能与调节HeLa细胞Bcl-2家族有关。     

老年人胃癌的浸润深度和术后化疗对预后的影响

目的探讨接受手术治疗的老年人胃癌临床病理因素与预后的关系。方法回顾性研究本院2002年1月至2005年12月胃癌手术患者,记录患者的年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小、共存病（高血压及心脏病）、手术根治程度、胃切除范围、病理类型(WHO)、TNM分期、术后化疗情况,建立数据库。结果老年组中位生存时间为29月（平均44月）,明显低于中年组（78月,P=0.001）和青年组（72月,P=0.009）;老年患者原发肿瘤以T3/T4为主;较少的患者接受联合脏器切除;更多合并高血压及心脏病,而较少患者接受术后化疗。结论老年人胃癌手术患者原发灶的侵犯深度、术后较少接受化疗与预后差有关。     

肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1增强卵巢癌侵袭能力

目的:检测肿瘤相关成纤维细胞Twist1基因表达,探讨肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1对卵巢癌侵袭能力的影响。方法:CSIOVDB数据库检索Twist1基因在卵巢各种组织类型中的表达水平。分离原代正常成纤维细胞(NOF),以及卵巢癌患者的原代肿瘤相关成纤维细胞(CAF),免疫荧光实验验证Twist1基因在NOF和卵巢癌CAF细胞中的表达差异。TCGA数据库489例卵巢癌中从mRNA水平验证Twist1与CAF经典活化指标FAP的相关性,以及炎症因子IL-6的相关性。GSEA(Gene Set Enrichment Analysis)软件探究CAF高表达Twist1与IL-6通路富集的关系。Western blot法验证下调Twist1基因对IL-6表达的影响。Transwell实验探究卵巢癌CAF-肿瘤细胞共培养体系中IL-6对卵巢癌细胞系SKOV3侵袭能力的影响。结果:Twist1基因在卵巢癌CAF中的表达水平明显高于肿瘤细胞和正常成纤维细胞。TCGA数据库中Twist1基因和FAP及IL-6基因呈显著正相关(P0.0001)。GSEA软件分析结果示,卵巢癌患者中CAF高表达Twist1的同时,肿瘤上皮表现为IL-6通路明显富集(P0.05,FDR25%)。Western blot法结果表明,Twist1基因下调后,IL-6基因表达量明显降低。在共培养体系中加IL-6中和抗体,卵巢癌细胞侵袭力明显下降。结论:肿瘤相关成纤维细胞高表达Twist1,可能通过提高IL-6水平增强卵巢癌侵袭能力。     

二甲双胍对卵巢癌细胞侵袭迁移及MTA1表达的影响

目的:体外细胞培养实验检测二甲双胍对卵巢癌细胞SKOV3侵袭迁移能力的影响,以及其对转移相关因子1(MTA1)表达的影响。方法:用不同浓度二甲双胍处理卵巢癌细胞,采用划痕实验和transwell实验检测二甲双胍对细胞侵袭迁移能力的影响,Western blot法检测二甲双胍对细胞中MTA1蛋白表达的影响,qRT-PCR检测二甲双胍对细胞中MTA1 mRNA表达的影响。结果:与对照组(0mmol/L)相比,二甲双胍干预组的细胞迁移速度明显下降(P0.01);作用24h时,2.5mmol/L与5mmol/L组未见差异(P0.05);作用48h时,卵巢癌细胞的迁移速度随着二甲双胍浓度的增加而减弱(P0.01)。随着二甲双胍浓度的增加,穿膜细胞数减少(P0.01);二甲双胍干预组的MTA1 mRNA及MTA1蛋白表达明显降低(P0.05),不同药物浓度之间无差异。结论:二甲双胍抑制SKOV3细胞侵袭迁移,抑制作用与浓度呈正相关,其机制可能与抑制MTA1表达有关。     

miR-92b对神经胶质瘤细胞U251增殖及迁移侵袭的 影响

目的 探究miR-92b对神经胶质瘤细胞U251增殖及迁移侵袭的影响以及其可能机制.方法 利用miRNA芯片筛选出在神经胶质瘤细胞U251和人脑正常胶质细胞HEB中差异表达的miRNA;化学合成法制备miR-92b抑制剂,转染后用real-time PCR技术验证表达变化;CCK-8实验检测转染后细胞的增殖能力;划痕实验和Transewll实验检测转染后细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)、β-catenin和E-cadherin的表达;荧光酶素实验验证IGFBP-3是否为miR-92b的靶基因.结果 基因芯片结果显示miR-92b在神经胶质瘤细胞中表达水平高于人脑正常胶质细胞(P<0.05);CCK-8实验结果显示转染miR-92b抑制剂后,U251细胞增殖能力降低(P<0.05);划痕实验和Transwell实验结果显示转染miR-92b抑制剂后,U251细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.05);Western blot结果显示抑制miR-92b后,IGFBP-3和E-cadherin蛋白表达增加(P<0.05),β-catenin表达减少(P<0.05);荧光素酶实验结果显示,miR-92b能直接靶向调控IGFBP-3.结论 miR-92b在神经胶质瘤中表达显著增加,其可能通过抑制IGFBP-3蛋白表达,从而促进肿瘤细胞的增殖及迁移侵袭.