尿胰蛋白酶抑制剂对重症结核病患者的免疫调节作用

目的探究尿胰蛋白酶抑制剂（UTI）对重症结核病患者的免疫调节作用。 方法选取杭州市红十字会医院2015年1月至2017年11月收治的84例重症结核病患者,采用随机数字表法分为UTI组和对照组,每组各42例。对照组给予常规治疗,UTI组在常规治疗基础上于入住ICU第2天给予UTI 10万单位静脉注射,每8小时1次,连续治疗7 d。比较两组患者的一般资料、急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分和外周血液中白细胞介素2（IL-2）、IL-6、IL-10、IL-12、干扰素γ（INF-γ）、转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、Tregs细胞及诱导性共刺激分子（ICOS）⁺Tregs细胞表达水平。 结果治疗后,UTI组及对照组重症结核病患者APACHEⅡ评分[（22.5 ± 2.2）分vs.（25.8 ± 1.5）分,t = 2.025,P = 0.043]、IL-6 [（137 ± 33）ng / L vs.（116 ± 42）ng / L,t = 2.785,P = 0.045]、IL-10 [（29 ± 6）ng / L vs.（26 ± 5）ng / L,t = 2.143,P = 0.039]、IL-12 [（84 ± 26）ng / L vs.（65 ± 22）ng / L,t = 2.009,P = 0.043]、TGF-β [（8.5 ± 2.3）ng / L vs.（9.8 ± 2.8）ng / L,t = 1.613,P = 0.045]、CD8⁺T淋巴细胞[（43 ± 13）% vs.（38 ± 12）%,t = 1.856,P = 0.043]及Tregs细胞[（5.8 ± 1.1）% vs.（5.1 ± 0.9）%,t = 1.645,P = 0.045]比率比较,差异均有统计学意义;而IL-2[（835 ± 188）ng / L vs.（744 ± 324）ng / L,t = 0.656,P = 0.458]、INF-γ [（200 ± 88）ng / L vs.（203 ± 78）ng / L,t = 0.912,P = 0.061]、TNF-α [（854 ± 256）μg / L vs.（808 ± 213）μg / L,t = 0.956,P = 0.785]、CD4⁺T淋巴细胞[（48 ± 8）% vs.（49 ± 14）%,t = 0.756,P = 0.985]及ICOS⁺Tregs细胞[（1.0 ± 0.7）% vs.（1.0 ± 0.9）%,t = 0.956,P = 0.089]比率比较,差异均无统计学意义。 结论UTI能够调节危重症结核病患者的细胞免疫,减轻重症结核病患者体内炎症因子的释放,从而改善其APACHEⅡ评分及预后。     

牛奶大分子蛋白的水解及其抗原性变化

目的 :将婴儿乳粉以不同的食品级蛋白酶水解 ,降低牛奶的分子量 ,考察牛奶酶水解产物过敏原性的变化。方法 :采用胃蛋白酶、胰蛋白酶和自制胰酶制品对婴儿奶粉进行酶解 ,以快速蛋白质液相色谱测得酶解产物分子量分布和所占比例。通过实验动物主动、被动皮肤反应和口服致敏肠腔通透性变化观察不同酶水解后牛奶的过敏原性变化。结果 :快速蛋白质液相色谱结果表明蛋白酶水解牛奶后 ,牛奶蛋白分子量明显降低 ,尤以自制胰酶对乳粉的水解程度最高 (分子量 <10 0 0占 92 % ;10 0 0～10 0 0 0占 8% )。胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰酶水解产物可以显著抑制由牛奶蛋白引起的小鼠耳速发型主动皮肤过敏 ,抑制率分别为 5 1%、83%和 86 %。小鼠同种及异种被动皮肤过敏反应实验中 ,与未水解奶粉组比较 ,同种皮肤过敏反应三种酶解产物炎性渗出降低率分别为 2 9%、70 %和 82 % ,异种皮肤过敏反应的降低率分别为 34%、70 %和 82 %。口服致敏小鼠肠腔通透性及分泌功能测定结果显示 ,胰酶水解产物致敏小鼠的肠腔伊文思蓝渗出率比未水解前降低了 2 7%。结论 :酶水解后牛奶大分子蛋白物质降解 ,其过敏原性有不同程度的降低 ,尤以胰酶水解产物变化最为显著。     

双向凝胶电泳—飞行时间质谱法分析人肺鳞细胞NCI—H520蛋白质组成分

目的：建立和优化肿瘤蛋白质组研究的方法系统,并分析人肺鳞癌细胞蛋白质组。方法：用固相 ｐＨ梯度双向凝胶电泳分离人肺鳞癌细胞系ＮＣＩ－Ｈ５２０总蛋白,银染显色,ＰＤＱｕｅｓｔ ２ＤＥ软件分析,对部分蛋白质 点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（ｍａｔｒｉｘ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｌａｓｅｒ　ｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ ｏｆ　ｆｌｙｉｎｇ　ｍａｓｓ　 ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ, ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱,用 ＰｅｐｔＩｄｅｎｔ软件查询 ＳＷＩＳＳ－ＰＲＯＴ数据库。结果：获得了分辨 率和重复性均较好的双向电泳银染图谱,图像分析探测到３块胶的平均蛋白质点数为（１１４６±１１６）,平均匹配的点 数为（８５１±９５）,匹配率达 ７３． ７％, ３ 块胶在蛋白质点位置上具有较好的重复性, ＩＥＦ方向的平均偏差为（１． ５２± ０．２２）ｍｍ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ方向的平均偏差为（１．９７ ± ０．１３）ｍｍ。随机取６０个蛋白质点进行胶内原位酶解－质谱指纹图 分析得到了５４个蛋白质点的肽质指纹图,查询数据库初步鉴定了４４个蛋白质,其中部分是与细胞周期有关的蛋 白,部分是与信号传导有关的蛋白,部分     

乌司他丁在风心病合并恶病质患者瓣膜置换术后的临床应用

[目的]探讨风心痛合并恶病质综合征(SOCC)患者,瓣膜置换术后应用乌司他丁(UTI)的效果.[方法]56例风心病合并SOCC患者分成两组:UTI治疗组(UTI,n=26)在常规治疗的基础上,每天静脉注射UTI 6U(每次2U,3次/日).对照组(n=30)仅采用常规治疗.术后即刻和d3,分别测定肝功能,肾功能、凝血功能、炎症介质以及临床指标的变化.[结果]术后即刻,两组患者各项指标无统计学差异.术后da,治疗组的各项生化指标较对照组明显降低,其中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)具有非常显著性差异(P<0.01),血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、PT、APTT具有显著性差异(P<0.05);炎症介质TNF-α、IL-6较对照组明显降低(P<0.05);两组患者在SBP、尿量、心率无明显差异.[结论]鸟司他丁能押制风心病合并SOCC患者瓣膜置换术后的部分炎症介质的释放,并保护肝肾等重要脏嚣功能,对术后早期的应激反应有良好的临床疗效.     

Classification of PRSS1 variants responsible for chronic pancreatitis: An expert perspective from the Franco-Chinese GREPAN Study Group

BackgroundPRSS1 was the first reported chronic pancreatitis (CP) gene. The existence of both gain-of-function (GoF) and gain-of-proteotoxicity (GoP) pathological PRSS1 variants, together with the fact that PRSS1 variants have been identified in CP subtypes spanning the range from monogenic to multifactorial, has made the classification of PRSS1 variants very challenging.MethodsAll currently reported PRSS1 variants (derived primarily from two databases) were manually reviewed with respect to their clinical genetics, functional analysis and population allele frequency. They were classified by variant type and pathological mechanism within the framework of our recently proposed ACMG/AMP guidelines-based seven-category system.ResultsThe total number of distinct germline PRSS1 variants included for analysis was 100, comprising 3 copy number variants (CNVs), 12 5′ and 3′ variants, 19 intronic variants, 5 nonsense variants, 1 frameshift deletion variant, 6 synonymous variants, 1 in-frame duplication, 3 gene conversions and 50 missense variants. Based upon a combination of clinical genetic and functional analysis, population data and in silico analysis, we classified 26 variants (all 3 CNVs, the in-frame duplication, all 3 gene conversions and 19 missense) as “pathogenic”, 3 variants (missense) as “likely pathogenic”, 5 variants (four missense and one promoter) as “predisposing”, 13 variants (all missense) as “unknown significance”, 2 variants (missense) as “likely benign”, and all remaining 51 variants as “benign”.ConclusionsWe describe an expert classification of the 100 PRSS1 variants reported to date. The results have immediate implications for reclassifying many ClinVar-registered PRSS1 variants as well as providing optimal guidelines/standards for reporting PRSS1 variants.