GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠肺缺血再灌注时NF-κB活化的影响

目的 评价GSK-3β抑制剂TDZD-8对大鼠肺缺血再灌注时NF-κB活化的影响.方法 健康雄性SD大鼠32只,8～10周龄,体重250 ～ 280 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8):假手术组(sham组)、肺缺血再灌注组(I/R组)、肺缺血再灌注+DMSO组(I/R+ DMSO组)和肺缺血再灌注+ GSK-3β抑制剂TDZD-8组(I/R+ TDZD-8组).采用夹闭左肺门1h恢复灌注的方法制备肺缺血再灌注模型;I/R+ DMSO组和I/R+ TDZD-8组于再灌注前5 min分别于颈外静脉注射10％ DMSO和TDZD-8 1 mg/kg.于再灌注2h时取腹主动脉血测定动脉血氧分压(PaO2)、血浆IL-6和TNF-α浓度;然后处死大鼠,取肺组织测定肺湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性及p-GSK-3β以及p-NF-κBp65的表达,电镜下观察肺组织病理学结果.结果 与sham组比较,其余3组PaO2和肺组织p-GSK-3β表达水平降低,血浆IL-6和TNF-α浓度,肺组织W/D、MPO活性及p-NF-κB p65表达水平升高(P＜0.05),I/R+ TDZD-8组PaO2和P-GSK-3β表达水平升高,上述其余各指标降低(P＜0.05).I/R+ DMSO组与I/R组各指标差异无统计学意义(P＞0.05).I/R+ TDZD-8组肺组织病理学损伤较I/R组减轻.结论 GSK-3β抑制剂TDZD-8可通过下调NF-κB磷酸化抑制炎性反应,从而减轻肺缺血再灌注损伤.     

腹部提压法对窒息性心搏骤停猪复苏效果的实验研究

目的：比较胸外按压心肺复苏（CC-CPR）与腹部提压心肺复苏（ALc-CPR）对窒息性心搏骤停猪复苏时血流动力学指标和通气指标的影响。初步评价腹部提压法对窒息性心搏骤停猪的复苏效果。方法：健康家猪30只,建立窒息性心搏骤停模型。随机分为两组。每组15R,分别实施cc-cPR和ALc-cPR。窒息前10min开始连续记录心电圈（ECG）、经皮脉搏氧饱和度（Sp02）．呼气宋二氧化碳分压（PETC02）,主动脉收缩压（SBP）．舒张压（DBP）、中心静脉压（CVP）和潮气量（VT）直至试验结束;计算主动脉平均动脉压（MAP）、冠脉灌注压（CPP）和每分通气量（MV）;分别在窒息前10min（TI）,窒息后10min（T2）、复苏后5min（T3）、复苏后10mii3（T4）、复苏后20min（T5）抽取动脉血查血气。观察两组动物的自主循环恢复（ROSC）率,24h存活率和24h后神经功能缺损评分。结果：CC-CPR组MAP和CPP高于ALC-CPR组．两组间的差异有统计学意义;ALC-CPR组的VT和MV高于CC-CPR组,差异有统计学意义;CC-CPR组ROSC率为26．7％,ALC-CPR组为80％,差异有统计学意义;24h存活率CC-CPR组为13．3％,ALC-CPR组为60％。差异有统计学意义;24h神经功能评分ALC-CPR组优于CC-CPR组。结论：在窒息性心搏骤停猪的复苏早期,ALC-CPR较cc-CPR更具优势。     

JNK信号通路在大鼠窒息性心跳骤停复苏后脑损伤中的作用

目的 评价c-Jun氨基端激酶(JNK)信号通路在大鼠窒息性心跳骤停复苏后脑损伤中的作用.方法 健康雄性SD大鼠40只,体重300～ 350 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):假手术组(SH组)、心跳骤停组(CA组)、JNK抑制剂SP600125组(SP组)和二甲基亚砜组(DMSO组).静脉注射维库溴铵2mg/kg后行机械通气,维持PET CO2 35～ 45 mm Hg.CA组、SP组和DMSO组机械通气稳定5 min后注射维库溴铵1 mg/kg,1 min后停止机械通气,于呼气末时夹闭气管导管,制备窒息性心跳骤停模型.心跳骤停3 min后,开放气管导管行机械通气,立即进行复苏.SP组静脉注射SP600125 20mg/kg,DMSO组静脉注射DMSO 0.2 ml.于心跳恢复后5h时处死大鼠,取脑组织,测定湿/干重比(W/D比)和细胞凋亡情况,观察病理学结果.结果 与SH组比较,CA组、SP组和DMSO组脑组织W/D比和凋亡细胞计数升高(P＜0.05);与CA组和DMSO组比较,SP组脑组织W/D比和凋亡细胞计数下降(P＜0.05),病理学损伤减轻;CA组和DMSO组脑组织W/D比和凋亡细胞计数比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 JNK信号通路参与了大鼠窒息性心跳骤停复苏诱发脑损伤的病理生理过程.     

脊髓ERK-CREB信号通路在吗啡依赖大鼠戒断反应中的作用

目的 评价脊髓背角神经元细胞外信号调节激酶-cAMP反应元件结合蛋白(ERKCREB)信号通路在吗啡依赖大鼠戒断反应中的作用.方法 健康雄性SD大鼠,体重200 ～ 250 g,2月龄.经枕骨大孔行鞘内置管,取置管成功的50只大鼠,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=10):对照组(C组)、吗啡依赖组(MD组)、吗啡戒断组(MW组)、U0126组和二甲基亚砜组(DMSO组).皮下注射吗啡10mg/kg,2次/d,隔天每次增加10 mg/kg,至第6天末次注射50 mg/kg,建立吗啡依赖模型.末次注射后4h,MW组、U0126组和DMSO组腹腔注射纳洛酮激发吗啡戒断反应.给予纳洛酮前30 min时,U0126组和DMSO组分别鞘内注射U0126(溶于10μlDMSO中)150 μg和DMSO 10 μl.于注射纳洛酮后1h内行戒断反应评分和促诱发痛评分,注射纳洛酮后1h处死大鼠,取脊髓组织,分别采用免疫组织化学法和Western blot法测定脊髓背角磷酸化ERK(p-ERK)和磷酸化CREB(p-CREB)的表达.结果 与C组比较,MW组脊髓背角p-ERK和p-CREB表达上调(P＜0.05);与MD组比较,MW组、U0126组和DMSO组戒断反应评分和促诱发痛评分升高(P＜0.05);与MW组比较,U0126组戒断反应评分和促诱发痛评分降低,脊髓背角p-ERK和p-CREB表达下调(P＜0.05),DMSO组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓背角神经元ERK-CREB信号通路参与了吗啡依赖大鼠的戒断反应.     

PI3K/Akt信号转导通路在EphB受体介导大鼠神经病理性痛中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号转导通路在EphB受体介导大鼠神经病理性痛中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠48只,体重150～180 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为6组(n=8),C1组、E1组、C2组和E2组采用坐骨神经慢性压迫法(CCI)建立大鼠神经病理性痛模型,S1组和S2仅暴露坐骨神经.S1组和C1组分别于术前1h、术后1、2d时鞘内注射生理盐水5 μl,E1组给予EphB受体拮抗剂EphB1与IgG的重组体(EphB1-Fc)0.5μg;S2组和C2组于术后5d时鞘内注射生理盐水5μl,E2组给予EphB1-Fc0.5μg.各组分别于术前、术后1、3、5d时测定双侧热缩足潜伏期(PWL)和机械缩足阈值(PWT),计算非术侧与术侧PWL和PWT的差值(△PWL和△PWT).于术后5d测定痛阈结束后,取术侧L4-6节段脊髓,采用免疫组织化学法检测c-Fos、PI3K及磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平.结果 与S1组或S2组比较,C1组或C2组术后△PWL延长,△PWT增加,c-Fos、PI3K和p-Akt表达上调(P＜0.05);与C1组或C2组比较,E1组或E2组△PWL缩短,△PWT降低,c-Fos、PDK和p-Akt表达下调(P＜0.05).结论 EphB受体通过PI3K/Akt信号转导通路介导大鼠神经病理性痛的形成和维持.     

PI3K-Akt-eNOS信号转导通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价磷酯酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶/内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号转导通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性Wistar大鼠50只,体重250 ～ 280 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=10):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚后处理组(Spo组)、七氟醚后处理+二甲基亚砜组(Spo+D组)和七氟醚后处理+ PI3K特异性抑制剂LY294002组(Spo+L组).I/R组、Spo组、Spo+D组和Spo+L组采用结扎左冠状动脉前降支30 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型.Spo组、Spo+D组和Spo+L组进行七氟醚后处理:再灌注前1 min使呼气末七氟醚浓度达到2.5％～3.0％,持续吸入5min; Spo+L组于再灌注前5min静脉注射LY294002 0.3 mg/kg,Spo+D组给予等容量二甲基亚砜.再灌注120 min时,每组取10只大鼠,采集动脉血样,检测血清LDH、CK-MB的活性和cTnI浓度.每组处死5只大鼠,取心脏,分离左心室,计算心肌梗死体积;每组处死5只大鼠,取心肌组织,测定Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、eNOS和磷酸化eNOS(p- eNOS)的表达,计算p-Akt表达与Akt表达的比值(p-Akt/Akt)和p-eNOS表达与eNOS表达的比值(p-eNOS/eNOS).结果 与S组比较,其余4组血清CK-MB、LDH的活性、cTnI浓度、心肌梗死体积升高,心肌p-Akt/Akt和p-eNOS/eNOS升高(P＜0.05或0.01);与I/R组比较,Spo组和Spo+D组血清CK-MB、LDH的活性、cTnI浓度和心肌梗死体积降低,心肌p-Akt/Akt和p-eNOS/eNOS升高(P＜0.05或0.01),Spo+L组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);Spo组与Spo+D组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PI3K-Akt-eNOS信号转导通路介导了七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用.     

氧化应激介导的Ras-ERK信号通路活化参与醛固酮诱导的肾小球系膜细胞增殖

目的 探讨氧化应激介导的Ras-胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化在醛同酮( ALDO)诱导的系膜细胞增殖中的作用.方法 体外培养人肾小球系膜细胞,应用3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法和细胞计数测定系膜细胞增殖;Western印迹检测Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2活化.结果 ALDO可显著促进系膜细胞增殖,抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)显著抑制ALDO诱导的系膜细胞增殖(均P＜ 0.01).ALDO刺激系膜细胞3h,活化的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2表达显著增强,分别是对照组的4.05倍、3.62倍、4.52倍和3.40倍(均P＜0.01).抗氧化剂NAC几乎完全阻断ALDO诱导的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK 1/2活化(均P＜0.01).Ki-RasA siRNA可呈浓度依赖性降低系膜细胞Ki-RasA表达,并显著抑制ALDO诱导的Ki-RasA活化及系膜细胞增殖(P＜0.01).c-Raf抑制剂GW5074和MEK1/2抑制剂PD98059亦显著抑制ALDO诱导的系膜细胞增殖,其抑制率均达到65％(P＜0.01).Ki- RasA siRNA不能降低ALDO诱导的磷酸肌醇-3激酶( PI3K)磷酸化.联合应用PI3K抑制剂LY294002和MEKl/2抑制剂PD98059可完全阻断ALDO诱导的系膜细胞增殖(P＜0.01).结论 ALDO可通过氧化应激活化Ki-RasA-c-Raf-MEK-ERK信号通路.同时阻断ERK1/2和PI3K信号通路可完全抑制ALDO诱导的系膜细胞增殖.     

BANCR对甲状腺乳头状癌TSHR表达调控的研究进展

目的本文通过综述相关文献并分析甲状腺乳头状癌(PTC)发生发展过程中TSH/TSHR/c AMP和Ras/Raf/MEK/ERK(MAPK通路)两条信号通路,探讨了BRAF激活的长链非编码RNA(BANCR)对PTC组织中促甲状腺激素受体(TSHR)表达调节表达调控的意义。BANCR表达上调可能会使PTC组织中TSHR的表达降低,从而促进了PTC的发生发展,并可能影响患者预后。因此,明确BANCR对PTC组织TSHR表达调控的作用机制,有助于进一步明确PTC的发生机制,并可能会为PTC的临床诊断和治疗提供新的靶标。