日本血吸虫NP30抗体检测方法的优化

目的为了提高单克隆抗独特型抗体NP30抗体检测系统在大山区日本血吸虫病疫区的诊断效能,在原有的双抗体夹心ELISA方法的基础上对其进行优化、改良,建立间接ELISA血清学诊断方法。方法通过正交设计,选用L27(313)正交表,对NP30腹水包被酶标板的浓度、血清浓度、血清孵育时间和辣根过氧化物酶标记抗人IgG的二抗孵育时间共4个因素的3个水平进行不同组合的实验,确定该间接法的最佳实验条件。并用建立的方法对50份云南大山区日本血吸虫粪孵阳性病人血清样本和50份非疫区正常人血清样本进行检测,评价其敏感性和特异性。结果确定的该间接法最佳检测条件为:NP30腹水4μg/ml包被酶标板,血清浓度为1∶100,37℃孵育60min,二抗为37℃孵育30min。该方法的敏感性和特异性分别为88%和96%。结论该方法具有较高的诊断价值,可用于大山区日本血吸虫病疫区的诊断检测。     

吡喹酮缓释包埋剂预防小鼠血吸虫病的初步研究

目的研制吡喹酮缓释包埋剂,观察其预防小鼠血吸虫病的效果。方法将吡喹酮原药与控释材料硫化硅橡胶、交联剂和催化剂等按一定比例经一定工艺制成吡喹酮缓释包埋剂,经体外释放试验确定最佳配方剂型,并进行动物实验观察其预防小鼠血吸虫病的效果。结果缓释剂型为棒状,长2cm,外径 2mm,每根含吡喹酮原药30mg。小鼠植入药棒(2根/鼠)后4周进行感染(40尾/鼠),感染后7周解剖观察,其预防保护率为40.2％,肝虫卵减少率64.3％,粪EPG减少率70.5％。结论吡喹酮缓释包埋剂是一种有希望的预防动物感染的新缓释剂型。     

晚期日本血吸虫病患者肝组织基质金属蛋白酶2和9的表达

目的研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)在晚期日本血吸虫病患者肝组织中的表达及意义。方法26例晚期日本血吸虫病患者肝活检标本和5例正常人肝标本行常规病理检查,用MMP-2、MMP-9和Ⅳ型胶原(G-Ⅳ)单克隆抗体进行免疫组织化学染色进行定量和定位研究。结果MMP-2主要表达在肝细胞浆、肝细胞膜和肝窦,肌成纤维细胞和血管内皮细胞也有表达。MMP-9主要表达在肝星状细胞、肝窦和肌成纤维细胞,偶见肝细胞浆和胆管上皮细胞表达。晚期日本血吸虫病患者肝组织MMP-2、MMP-9和G-Ⅳ的表达明显高于正常人(P<0.05),随着汇管区炎症活动度和肝纤维化程度的升高,MMP-2的表达也明显增强(P<0.01),MMP-9的表达无明显改变(P>0.05),C-Ⅳ表达与MMP-2呈同步关系。结论MMP-2与日本血吸虫病肝纤维化的发生、发展有关,MMP-9表达与日本血吸虫病肝纤维化的发生有关。     

慢性日本血吸虫病对患者劳动力影响的研究

在1个洲垸型疫区村和2个洲岛型疫区村流行病学和社会经济学调查的基础上,就慢性日本血吸虫病对患者劳动力及经济收入影响问题,进行了配对研究。结果显示:慢性血吸虫病能导致患者劳动力下降和收入减少,平均年收入比正常人减少18.2％。血吸虫病患者劳动力下降的主要原因是血吸虫病所致的乏力、血便、脾脏肿大等。     

蓝萼香茶菜化学成分与生物活性研究

目的研究蓝萼香茶菜叶的化学成分,为进一步研究其生物活性提供依据。方法利用硅胶柱层析对蓝萼香茶菜叶进行分离和纯化其化合物,用波谱分析方法鉴定其结构,并运用四甲基偶氮唑盐比色法对从该植物中分离得到的部分化合物进行了细胞毒活性筛选。结果从蓝萼香茶菜叶中分离鉴定了10个化合物,分别是蓝萼香茶菜庚素(1)、蓝萼香茶菜辛素(2)、蓝萼香茶菜壬素(3)、蓝萼香茶菜甲素(4)、蓝萼香茶菜乙素(5)、毛叶醇(6)、entkaurane-3β,16β-diol(7)、木犀草素-7-甲醚(8)、胡麻素(9)、水杨酸(10)。其中化合物1、4、5具有较强的细胞毒活性。结论化合物1、2、3、6、7、9、10首次从蓝萼香茶菜中分离得到,且化合物1、4、5对肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用。     

紫外-可见分光光度法测定龙爪槐叶中总黄酮含量

目的建立龙爪槐叶中总黄酮质量控制的方法。方法龙爪槐叶粉碎后,置索氏提取器中,甲醇连续提取,低温放置24 h以上,过滤去除叶绿素及杂质,滤液即为提取液。以芦丁为标准,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色,采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,测定波长为500 nm。结果芦丁的线性范围为8～48μg·ml-1,回归方程：A=10.7318 C-0.0514,r=0.9991,平均回收率为94.85%,RSD=1.84%。结论龙爪槐叶甲醇提取后直接测定总黄酮含量,方法简便,结果准确,可用于龙爪槐叶总黄酮的质量控制。     

Changes in the level of IL-2, T cell subsets and the function of T suppressor cells in patients with schistosomiasis japonica

Summary The level of interleukin-2 (IL-2) produced by peripheral blood mononuclear cells in vitro, T cell subsets and the function of T suppressor cells (Ts) in patients with schistosomiasis japonica were investigated. It was found that the level of IL-2 induced by schistosomal antigens was significantly high and positively related to the percentage of CD4⁺ cells. In the groups of chronic and advanced schistosomiasis japonica, the level of IL-2 induced by schistosomal antigens was markedly lower than that in the group of acute schistosomiasis japonica, but significantly higher than that in the group of normal controls. The IL-2 level was negatively related to the percentage of CD8⁺ T cells and the ratio of CD4⁺/CD8⁺. The level of IL-2 induced by PHA was greatly reduced in the group of advanced schistosomiasis japonica. The changes in the level of IL-2 and its relationship with T cell subsets and the function of Ts are also discussed.     

湖滩地区日本血吸虫病的传播模型

通过对湖滩地区日本血吸虫病传播过程的研究，在两阶段催化模型的基础上，建立了湖滩地区日本血吸虫病的传播模型。根据大规模的流行病学调查资料，估计传播模型的各个参数；发现日本血吸虫感染的阴转速率约为０２５，同时对不同类型人群的各个参数（β１、β２）进行估计，这些参数决定着传染源、钉螺等因素对传播所起作用的大小；并用南矶山（鄱阳湖区）和新尚村（洞庭湖区）实际观察资料对模型的有效性进行了验证。该模型对湖滩地区各种不同的控制策略进行了系统分析，以从理论上寻找优化的综合防治措施。     

组合单克隆抗体夹心斑点-ELISA检测日本血吸虫循环抗原的研究

本研究将抗不同表位单抗组合，首次用于夹心斑点-ＥＬＩＳＡ检测血吸由感染。对慢性日本血吸虫病患者的阳性检出率为８５％，１２例急性患者均阳性，１０例晚血病人４例阳性，非疫区正常人的假阳性率为２．２％。用单盲法检测的-组血清其符合率亦较满意。在基本消灭血吸虫病地区检测了１１００人，用夹心斑点-ＥＬＩＳＡ测抗原，阳性率为６．５％，以ＩＨＡ测抗体阳性率为２５．２％。在低年龄组人群，斑点ＥＬＩＳＡ与ＣＯＰＴ符合率为８８．９％，明显高于ＩＨＡ与ＣＯＰＴ的符合率（３５．７％），Ｐ＜０．０５。动物实验中，组合单抗夹心班点ＥＬＩＳＡ对低感染兔的阳性检出率高于单个单抗直接斑点-ＥＬＩＳＡ。     

海带褐藻多糖硫酸酯的抗氧化活性研究

目的 研究海带褐藻多糖硫酸醋的抗氧化作用。方法 采用体外实验研究海带褐藻多糖硫酸醢对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果 海带褐藻多糖硫酸醋对超氧阴离子具有良好的清除作用，IC50为20．3μg／mL，其对羟自由基的清除作用较弱，对有机自由基DPPH的作用很弱。褐藻多糖硫酸醋能够抑制H2O2诱导的红细胞氧化溶血，对FeSO4-抗坏血酸体系造成的脂质过氧化具有良好的保护作用。结论 海带褐藻多糖硫酸醋具有显著的体外抗氧化活性。