Molecular epidemiology of enterovirus 71 infection in the Western Pacific Region

BACKGROUND: Recently, there have been large outbreaks of hand, foot and mouth disease (HFMD) mainly caused by enterovirus 71 (EV71) associated with severe neurological diseases in the Western Pacific Region (WPR). To monitor the realtime trend of EV71 transmission throughout the WPR, the authors conducted a molecular epidemiological analysis of EV71 infection. METHODS: Viruses were isolated from clinical samples from patients with HFMD or those with neurological complications. The EV71 isolates were identified by microneutralization assay. The VP4 and/or VP1 regions of recent EV71 isolates were sequenced and subjected to phylogenetic analysis using reference EV71 strains. RESULTS: The phylogenetic analysis of EV71 isolates from the WPR revealed two major genogroups, B and C, based on the nucleotide sequence alignment of the VP1 or VP4 region. These two major genogroups were further divided into subgenogroups, B1, B2, B3, and B4 and C1, C2, C3 and C4, respectively. CONCLUSIONS: The molecular epidemiological analyses of recent and previous EV71 isolates in the WPR indicated that two major genogroups of EV71 are co-circulating in Australia, Malaysia, Singapore, Taiwan and Japan. Recent EV71 isolates in Mainland China constitute a new distinct genetic cluster, subgenogroup C4. Two major lineages of EV71 are the major causative agents of the present HFMD epidemics in the WPR and both are considered to be neurovirulent.     

CD71和HbF用于流式细胞仪分选母血中的胎儿细胞

目的:比较CD71单染、HbF单染和CD71、HbF双染对单个核细胞的标记情况,同时探讨孕妇外周血中胎儿有核红细胞的含量与孕周的关系。方法:选用红细胞特异性抗体CD71、HbF对正常孕妇外周血和胎儿脐血单个核细胞进行标记,并结合流式细胞仪对有核红细胞进行分选。结果:用CD71和HbF进行双染色标记,正常孕妇和脐血单个核细胞的阳性标记率明显低于CD71和HbF单染色标记(t检验P<0.01)。孕早中期胎儿NRBC比例随孕周的增加呈上升趋势,至21~24周比例最大,约为1.92±0.84×10-2。结论:采用CD71和HbF双染色标记,可提高NRBC的特异性标记和分选纯度,分选胎儿细胞的最佳时间应在孕21~24周。     

Critical management in patients with severe enterovirus 71 infection

OBJECTIVE: The aim of this study was to analyze clinical details occurring in children with severe enterovirus 71 (EV71) infection and synthesize the critical care experience for patients with severe EV71 infection. METHODS: A retrospective clinical, laboratory, and hemodynamic study was performed in a pediatric intensive care unit in a university hospital. From March 1998 to April 2000, seven consecutive pediatric patients with severe EV71 infection were retrospectively analyzed as the comparison group. From May 2000 to March 2003, eight consecutive patients with severe EV71 infection who had received the protocol therapy were enrolled as the study group. Detailed information about clinical treatment and pharmacological therapy was collected for comparison. RESULTS: The clinical presentations and laboratory findings between the comparison and the study groups were not significantly different. The amount of intravenous fluid in the first 24 h was significantly higher in the comparison group (9.2+/-5.0 vs 4.9+/-1.3 mL/kg per h). More patients in the study group received low doses of dopamine infusion, patients in the comparison group received more epinephrine, and none of them received milrinone. The acute-stage and long-term survival rates were higher in the study group (100% vs 43%, 87% vs 29%). CONCLUSION: Early cardiopulmonary support may prevent the vicious cycle of cardiopulmonary failure and improve the clinical outcome of severe EV71 infection. Milrinone may be the ideal inotropic agent for these patients. Echocardiography, a central line, and an arterial line could be an alternate method to replace direct intracardiac hemodynamic monitoring for guiding critical management.     

河南省1999～2000年急性弛缓性麻痹病例肠道病毒感染流行病学分析

河南省 1999～ 2 0 0 0年从 10 87例急性弛缓性麻痹 (AFP)病例粪便标本中 ,共分离出 92株脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒 (PV)和 70株非脊灰肠道病毒 (NPEV) ,分离率分别为 8 4 6 %和 6 4 4 %。Ⅱ型为PV的主要型别 ,共 4 5株 ,占4 8 91%。NPEV中埃可 (ECHO)病毒 6 5株 ,占 92 86 % ,病毒型别以ECHO11、7、12 为优势血清型。柯萨奇A组病毒(Cox A) 1株 ,柯萨奇B组病毒 (Cox B) 4株。检出PV多在冬春季 ,NPEV流行高峰期在 8～ 10月 ;感染均以小年龄儿童为主。多数肠道病毒 (EV)感染者伴有发热、腹泻或肌肉疼痛等症状。 38例发病 6 0d后仍残留麻痹 ,其中多数为PV感染 ,且未完成全程免疫。EV感染病例临床诊断以格林 巴利综合征和NPEV感染为主。在无脊灰证实以后 ,应该加强对PV和NPEV的监测和研究     

白细胞介素-10基因多态性与儿童肠道病毒71型感染的相关性研究

目的 探讨白细胞介素-10（IL-10）基因位点-1082A/G、-819C/T和-592C/A多态性与IL-10水平及儿童肠道病毒71型（EV71）感染程度的关系。方法 选取EV71感染的手足口病患儿137例为研究对象,其中轻症组91例,重症组46例,另选取行健康体检儿童122例为健康对照组,采集临床数据。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-10水平。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析技术检测IL-10基因位点-1082A/G、-819C/T和-592C/A的多态性。结果 与健康对照组相比,EV71感染组患儿的-1082位点AA基因型频率和A等位基因频率更高（P < 0.05）。在EV71感染组中,重症组-1082位点AA基因型频率和A等位基因频率高于轻症组（P < 0.05）。两组间IL-10基因位点-819C/T和-592C/A多态性的分布比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。重症组患儿血清IL-10水平明显高于轻症组和健康对照组（P < 0.05）。IL-10-1082 AA基因型、-819 TT基因型和-592 AA基因型与IL-10的低表达有关（P < 0.05）。在单倍型构建上,EV71感染组GCC单倍型的频率低于健康对照组（P < 0.05）。在EV71重症感染组中,ATA单倍型患儿的IL-10水平较其他单倍型显著降低,而GCC患儿的IL-10水平较其他单倍型显著升高（P < 0.05）;轻症组和健康对照组各单倍型间的IL-10水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 IL-10基因多态性与IL-10表达水平及EV71感染严重程度有关。     

伴颞下颌关节紊乱病症状的偏侧咀嚼者咬合分析

目的采用TeeTester数字化咬合系统比较分析伴颞下颌关节紊乱病（TMD）症状的偏侧咀嚼者和非偏侧咀嚼者的咬合情况。方法根据调查问卷和口腔检查筛查出80名受试者，分为4组：伴TMD症状的偏侧咀嚼者20名，不伴TMD症状的偏侧咀嚼者20名，伴TMD症状的非偏侧咀嚼者20名，不伴TMD症状的非偏侧咀嚼者20名。使用TeeTester数字化咬合系统测定4组对象的全牙列最大接触面积、全牙列最大咬合力、力不对称指数、咬合力中心点、咬合接触时间、分离时间等。采用SPSS 25.0软件进行统计分析。结果牙尖交错位时，4组的全牙列最大咬合力、最大咬合接触面积差异有统计学意义（P<0.05）；伴/不伴TMD症状的偏侧咀嚼组习惯侧与非习惯侧咬合力分布比较差异有统计学意义（P<0.05）；4组的咬合力中心点、中心点偏移方向、中心点距中线垂直距离差异有统计学意义（P<0.05）。经Spearman相关性分析，习惯侧最大咬合力、习惯侧最大接触面积、咬合力中心点与偏侧咀嚼呈正相关（P<0.05），全牙列最大咬合力、最大接触面积与TMD呈负相关（P<0.05）。结论1）伴TMD症状的偏侧咀嚼者和伴TMD症状的非偏侧咀嚼者的咬合特点存在一定的差异，数字化咬合系统为动态评估偏侧咀嚼者的咬合情况提供了客观参数。2）咬合分析指标中习惯侧最大咬合力、最大接触面积、咬合力中心点与偏侧咀嚼呈正相关。偏侧咀嚼引起的异常咬合（全牙列最大咬合力，最大接触面积）与TMD呈负相关。     

儿童危重肠道病毒71型脑炎及神经源性肺水肿的临床特征与救治

目的 探讨儿童重症手足口病合并中枢神经系统感染及神经源性肺水肿(NPE)的临床特征、救治经验和转归.方法 总结2008年5月至6月收入安徽省阜阳市级医院儿童重症监护病房(PICU)手足口病合并巾枢神经系统感染及NPE救治资料.结果 36例患儿中,平均年龄15.8个月(4月至4岁),死亡7例,病死率为19.4%.出现危重症状平均病程2.1 d(0.5～5.0 d).12例(33.3%)无皮疹.神经系统表现为脑干脑炎27例(75%)、脑干脑炎伴脊髓炎6例(16.7%)、腩炎3例(8.3%).NPE突出表现是突然呼吸急促、粉红色或血性泡沫液(痰)、非对称性肺水肿或肺出血,是最直接死亡原因.主要救治措施为机械通气、甘露醇、甲基强的松龙、静脉丙种球蛋白、血管活性药物,其中9例患儿(25%)进行容量复苏.结论 EV71脑炎合并NPE,发病年龄小,进展快,病死率较高.早期诊断、及时呼吸支持、积极降颅压、维护循环功能是救治成功的关键.     

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目的探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β对肠道病毒71型(EV71)脑炎的早期诊断及脑损伤程度的评估价值。方法选取2008年5月至2010年12月山东大学齐鲁儿童医院重症监护室(PICU)收治的EV71脑炎患儿(EV71脑炎组)100例,同期住院的其他病毒性脑炎患儿89例为其他病毒性脑炎组,非神经系统感染患儿22例为阴性对照组。采用ELISA法检测所有EV71脑炎组及其他病毒性脑炎组患儿急性期及恢复期脑脊液与血清NSE及S-100β蛋白含量,检测阴性对照组患儿急性期及恢复期血清NSE及S-100β蛋白含量及急性期脑脊液NSE及S-100β蛋白含量,并分别进行比较。结果 EV71脑炎组急性期脑脊液、血清及恢复期血清中NSE与S-100β高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.01)。EV71脑炎组急性期脑脊液中NSE低于其他病毒性脑炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。EV71脑炎组急性期血清与恢复期脑脊液、血清中S-100β蛋白低于其他病毒性脑炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。EV71脑干脑炎组急性期与恢复期脑脊液、血清中NSE显著高于普通脑炎组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);EV71脑干脑炎组急性期与恢复期脑脊液、血清中S-100β蛋白显著高于EV71普通脑炎组,差异有统计学意义(P<0.01)。血清与脑脊液中NSE与S-100β有明显相关性(r=0.782、0.734,P均<0.01)。结论监测手足口病患儿脑脊液与血清NSE、S-100β可早期诊断是否合并中枢神经感染,并可评估脑损伤程度及预后。     

长春市小儿手足口病临床特点及病原学分析

目的 了解长春市儿童医院2009至2010年住院的手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)患儿的临床表现及病原情况.方法 采集2009年5月至2010年11月在长春市儿童医院就诊的HFMD患儿1 862例的临床资料及患儿粪便和咽拭子标本,用RT-PCR方法对1 514份粪便标本进行肠道病毒71犁(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(Coxsackie virus A16,CoxA16)扩增,用人横纹肌肉瘤细胞对530份咽拭子标本进行病毒分离.结果 HFMD住院数2009年687人次,2010年1 175人次;其中重患率2009年6.26％( 43/687),2010年为16.51％( 194/1 175).季节分布:2009年6月及2010年6、7、8月为发病高峰月份.性别分布男1 241例,女621例.发病平均年龄(28.32±15.22)个月.城乡分布为1∶1.05.临床表现:100％出现皮疹;就诊时首发症状发热55.69％(1 037/1 862)、神经系统症状6.07％ (113/1 862)、呕吐1.41％ (26/1 862).病程中出现心肌损伤547例(29.41％),神经系统并发症548例(29.43％),呼吸系统并发症82例(4.39％).病毒分离阳性166例,阳性率31.32％.2009年EV71检出率9.62％,CoxA16检出率10.57％:2010年EV71检出率32.52％,CoxA 16检出率39.53％.结论 小儿HFMD发病数2010年较2009年增多,重患率亦增高;在夏秋季对发热患儿应注意HFMD;HFMD可引起消化系统、呼吸系统、循环系统、神经系统等多器官损害,重症患儿以神经系统损害为主;HFMD病原呈现多样性,以EV71和CoxA16为主,重患多数为EV71感染.