阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的AmpC酶肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究

目的了解我院临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性及超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的AmpC酶基因型.方法采用Microscan微生物鉴定仪、微量肉汤稀释法,测定临床分离的肺炎克雷伯菌对21种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)及测序技术分析超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的AmpC酶基因型.结果肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感,对环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/舒巴坦、阿米卡星、头孢噻肟和头孢哌酮的耐药率分别为36.6%、38.3%、56.7%、63.4%、81.7%、86.7%、96.6%、98.3%和98.3%,对其他药物的耐药率为100%;60株肺炎克雷伯菌全部扩增出TEM基因,有25株细菌检出CTX-M-Ⅰ群基因,有54株细菌扩增出DHA基因,而PER和MIR(ACT-1)全部为阴性;且有21株肺炎克雷伯菌同时携带CTX-M-Ⅰ群、DHA和TEM基因.结论我院临床分离的肺炎克雷伯菌为多重耐药菌,同时存在CTX-M-3型超广谱β-内酰胺酶和DHA-1型质粒介导的AmpC酶,尚未发现PER型超广谱β-内酰胺酶和MIR型质粒介导的AmpC酶.     

脉冲场凝胶电泳检测院内产ESBLs肺炎克雷伯菌及流行病学分析

目的分析院内产ESBLs肺炎克雷伯菌的感染流行株及可能的流行环节,以制定出更合理的医院感染预防措施. 方法收集本院患者及环境中产ESBLs肺炎克雷伯菌共57株,用纸片法检测其对18种抗菌药物的耐药性,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行限制性内切酶多态性分析. 结果 57株产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性:亚胺培南耐药率为0,含酶抑制剂的头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/舒巴坦的耐药率分别为35.1%、45.6%,头孢替坦(CTH)耐药率为43.8%、头孢吡肟(FEP)38.6%,其他抗菌药物耐药率均＞60%;57株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为28个克隆株,其中33株PFGE图谱分为A、B、C、D 4型:A型是主要流行株(22株),主要集中在NCU、ICU.结论本院产ESBLs肺炎克雷伯菌流行主要为A、B、C、D型,NCU和ICU是医院感染高发区域;临床应慎用头孢三代类药物,以减少药物对菌株的筛选作用;各病区应进一步加强消毒隔离措施,严格遵守无菌操作规程.     

重症监护室阴沟肠杆菌感染的耐药监测

目的对近年耐第三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰胺酶监测，以指导临床用药。方法收集来自重症监护室的各种标本中对第三代头孢耐药的阴沟肠杆菌165株，用三维试验检测ESBLs与AmpC酶。结果165株阴沟肠杆菌中，产ESBLs 120株，占72．7％，产AmpC酶40株，占24．24％。结论我院重症监护室对第三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs，体外试验表明对亚胺培南敏感率为97．66％，对其他抗生素敏感性差。     

临床分离菌ESBLs发生情况及耐药性分析

目的了解临床不同分离、不同来源标本,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生ESBLs内的情况及耐药特点,以合理使用抗生素。方法采用全自动细菌鉴定/药敏分析仪结合双纸片确认法对我院2005年1月-2006年12月微生物室检测各类标本的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌523株进行检测。结果产ESBLs的大肠埃希菌占26.3%,肺炎克雷伯菌占23.3%;ESBLs的发生情况为ICU病房发生率最高,其次为呼吸科病房;其他内科病房、外科病房、门诊患者ESBLs的发生率为10.5%,儿科病房最低;产ESBLs菌株对抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs菌株,且呈现多重耐药。结论产ESBLs菌在我院各个病房、不同标本均有发生,对抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs菌,除亚胺培南外,产ESBLs对多种抗生素均出现不同程度耐药性。     

下呼吸道感染病原菌变迁及耐药状况分析

目的:了解下呼吸道感染病原菌的变迁、主要流行病原菌的耐药状况,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法:用WHONET 5.3软件统计分析2005～2006年南京医科大学第一附属医院住院患者痰液培养标本及药敏结果.结果:革兰阴性菌占所有非重复阳性标本的51.1%;其次为真菌占33.7%.所有病原菌中,白色念珠菌位居第一,铜绿假单胞菌、不动杆菌属、肺炎克雷伯菌亦较为常见,常见细菌的耐药菌株比例较高.2006年不动杆菌属、大肠埃希菌占所有病原菌比例较2005年明显升高.产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBLs)菌株检出率为8.3%,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs比例在两年间亦有显著性变化,对第三、四代头孢菌素及氟喹诺酮类耐药比例较高.2006年耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistantstaphylococcus,MRS)检出率明显高于2005年.占所有葡萄球菌的59%.对大环内酯类、氟喹诺酮类及头孢菌素类呈现高度耐药.结论:目前下呼吸道感染病原菌中多药耐药比例逐年增加,针对产ESBLs菌株建议选用碳青霉烯类,对MRS推荐用万古霉素.     

败血症病原菌临床分布及耐药性研究

目的 了解败血症病原菌临床分布及其耐药性的变化,以指导临床合理用药.方法 采用全自动血培养仪进行血液培养,用VITEK-AMS微生物鉴定仪进行病原菌鉴定和体外药敏试验.并采用体外扩散确证试验对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测.结果 221株败血症病原菌主要分布于重症监护病房(ICU)、血液科和感染科;分离出大肠埃希菌61株、肺炎克雷伯菌26株.其中产ESBLs菌株分别为24株(39.3%)、7株(26.9 0A);ESBLs阳性株对多种抗菌药物耐药性明显高于ESBLs阴性株;分离出葡萄球菌属32株.其中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)20株(62.5%);葡萄球菌属产β-内酰胺酶27株(84.4%);病原菌出现多药耐药且耐药水平增高;对革兰阳性菌和革兰阴性菌最敏感的药物分别是万古霉素和亚胺培南.结论 ICU、血液科和感染科是败血症的高发科室;败血症病原菌出现多药耐药且耐药水平增高,产ESBLs是革兰阴性菌耐药的主要机制;应重视败血症的防治.常规开展产ESBLs菌株的检测,指导抗菌药物合理应用,延缓耐药株的产生.     

ESBLs耐药菌株感染病例经济损失分析

目的:为准确了解超广谱β-内酰胺酶(extendspectrumβ-lactamase ESBLs)耐药菌株感染病例所造成的经济损失.方法:采用1:1病例对照研究的方法,调查ESBLs感染病例的直接经济损失,共16对.结果:病例组的住院总费用中位数为29 017.40元,对照组为10 264.01元,病例组是对照组的2.85倍,耐药菌株感染患者多支出住院费用为18 753.40元,平均每例病人多支出1 172.09元,病例组与对照组住院费用比较有显著差异(t=19.0873;P.结论:耐药菌株感染将会使患者经济负担加重,增加医务人员工作量,降低病床周转率,使医院经济收入下降.因此,预防和控制耐药菌株感染将获得巨大的社会效益和经济效益.     

大肠埃希菌耐药性及耐药基因检测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）与非产ESBLs大肠埃希菌（ECO）的耐药性及耐药基因携带情况,并阐明产ESBLs ECO基因型分布。方法K-B法检测54株ECO对22种抗菌药物的敏感性,PCR方法扩增ESBLs基因、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物耐药基因。结果54株ECO对阿米卡星、奈替米星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、氨曲南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南和美罗培南敏感性达70.0%～100.0%;对喹诺酮类、庆大霉素、哌拉西林敏感性〈27.8%;27株产ESBLs ECO中,CTX-M-1型9株、SHV型5株、TEM型16株、OXA-1型8株、6株未检测出ESBLs基因型、10株有≥2种ESBLs基因型;54株ECO中耐氨基糖苷类抗菌药物44株,aac（3）-Ⅰ4株、aac（3）-Ⅱ38株、aac（6′）-Ⅰ17株、aac（6′）-Ⅱ11株、ant（2″）-Ⅰ8株及ant（3″）-Ⅰ12株;54株ECO中耐喹诺酮类抗菌药物41株,qnr基因检出率为7.3%。结论碳青酶烯类为治疗ESBLs阳性ECO的首选药物;除氨基糖苷类抗菌药物和呋喃妥因外,产ESBLs组耐药性明显高于非产ESBLs组;产ESBLsECO中TEM型为最常见的ESBLs型别;氨基糖苷类抗菌药物耐药基因以aac（3）-Ⅱ和aac（6）-Ⅰ为主;ECO对喹诺酮耐药率较高,且检测到qnr基因。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性

目的：了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性。方法:用VITEK-32全自动微生物分析仪对650株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌进行ESBLs及耐药性检测。结果:650株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中176株产ESBLs，ESBLs总阳性率为27．1％。产ESBLs菌对氨苄西林、替卡西林、头孢西丁、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率为93．1％-100％，对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类均有不同程度的耐药(26．9％-93．1％)，对亚胺培南的耐药率最低。结论:治疗产ESBLs菌感染，应用亚胺培南及其它药敏试验显示敏感的药物。