HPLC-ELSD法测定贝母中异甾类生物碱及糖苷类成分的含量

目的建立同时测定贝母中5种异甾类生物碱——peimissine, imperialine, sinpeinine A, imperialine-3β-glucoside和yibeinoside A含量的HPLC分析方法。方法C₁₈柱;流动相:乙腈-水(含0.1%二乙胺);梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1;检测器:Alltech 500蒸发光散射检测器(ELSD)。结果线性范围为peimissine 13.1～288.2 mg·L^-1(r²=0.997 5), imperialine-3β-glucoside 7.7～169.4 mg·L^-1 (r²=0.999 3), yibeinoside A 7.3～160.6 mg·L^-1 (r²=0.999 7), imperialine 16.5～363.0 mg·L^-1 (r²=0.999 2), sinpeinine A 8.7～191.4 mg·L^-1 (r²=0.994 2)。 5个化合物的精密度和重现性RSD均<5%。结论本方法简便、有效、可行,可用于贝母中5种异甾类生物碱的含量测定。     

橐吾属植物中肝毒吡咯里西啶生物碱的LC/MSn检测

目的橐吾属植物中微量成分肝毒吡咯里西啶生物碱(HPA)的检测。方法采用薄层色谱法(TLC)、液相色谱与多级质谱联用法(LC/MSⁿ)。结果对橐吾属22种植物进行了HPA的LC/MSⁿ法检测，其中18种橐吾属植物中检测到了HPA。结论利用LC/MSⁿ法首次检测到东俄洛橐吾等15种橐吾属植物含有不同类型和种类的HPA，应进一步进行提取、分离与鉴定，并研究其毒性与活性；对不同种类、不同来源的橐吾属植物材料应分别检测其HPA。     

臭椿吲哚生物碱成分及其生物活性研究进展

臭椿是一种来源丰富、成本低廉且有很好药用价值的中药植物。吲哚类生物碱是臭椿中的主要活性成分之一,具有较强的抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗寄生虫等生物活性。对臭椿吲哚生物碱成分以及生物活性等研究进展进行综述,为今后该植物的研究与应用提供参考。     

阿朴菲类生物碱抗癌活性研究进展

阿朴菲类生物碱是一类重要的天然产物,其抗癌活性是近几年药学研究的热点。查阅国内外相关文献,总结阿朴菲类生物碱抗癌活性的基本构效关系、抗癌活性及其作用机制。1,2-亚甲二氧基及N-甲基取代对于该类化合物的细胞毒活性较关键,C-7的氧化和脱氢有助于提高该类化合物的抗癌活性,C-6a的手性及其他位置取代基对于抗癌活性的贡献目前尚未明确。阿朴菲类生物碱主要通过诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖以及抑制DNA拓扑异构酶机制发挥抗癌作用。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性(MDR)的逆转作用及机制。方法以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素(ADR)蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶(5-FU)给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

几种吡咯里西啶类生物碱对肝细胞毒性的探讨

目的：考察几种吡咯里西啶类生物碱体外实验中对肝细胞的毒性。方法：用MTF法检测了6种吡咯里西啶类生物碱clivorine，monocrotaline，isoline，LP-01(yamataimine)，LP-02(12-acetyl yamataimine)，LJ-09(platyphylline)对人正常肝细胞株L-02细胞活性的影响，对于其中有毒性的clivorine又用结晶紫染色的方法进一步确证其毒性。结果：Clivorine对肝细胞具有强烈的毒性作用，未发现其它几种吡咯里西啶生物碱对肝细胞的毒性。结论：Clivorine体外对肝细胞具毒性作用。     

磷脂组成对马钱子总生物碱脂质体药动学的影响

 目的 比较不同磷脂组成马钱子总生物碱脂质体的体内药动学性质。方法 采用硫酸铵梯度法和隐形脂质体技术制备了马钱子总生物碱脂质体,除去游离药物后,测定了其中总生物碱和士的宁的含量。测定了马钱子总生物碱溶液和不同磷脂组成马钱子总生物碱脂质体静脉注射给药后不同时间点士的宁的血药浓度,药动学参数采用3P97程序进行拟合。结果 不同磷脂组成脂质体中士的宁占总生物碱的比例基本相同。与大豆磷脂（SPC）脂质体相比,马钱子总生物碱复合磷脂脂质体静脉注射给药后士的宁的AUC增加了1.8倍,清除率显著下降,而氢化大豆磷脂（HSPC）脂质体给药后士的宁的药动学性质没有显著改变。结论 复合磷脂脂质体作为马钱子总生物碱的载体能够改善给药后士的宁的体内药动学性质。     

Differential metabolism of the pyrrolizidine alkaloid,senecionine, in fischer 344 and sprague-dawley Rats

The pyrrolizidine alkaloids (PAs), contained in a number of traditional remedies in Africa and Asia, show wide variations in metabolism between animal species but little work has been done to investigate differences between animal strains. The metabolism of the PA senecionine (SN) in Fischer 344 (F344) rats has been studied in order to compare to that found in the previously investigated Sprague-Dawley (SD) rats (Drug Metab. Dispos. 17: 387, 1989). There was no difference in the formation of (+/-) 6,7-dihydro-7-hydroxy-1-hydroxymethyl-5H-pyrrolizine (DHP, bioactivation) by hepatic microsomes from either sex of SD and F344 rats. However, hepatic microsomes from male and female F344 rats had greater activity in the N-oxidation (detoxication) of SN by 88% and 180%, respectively, when compared to that of male and female SD rats. Experiments conducted at various pH showed an optimum pH of 8.5, the optimal pH for flavin-containing monooxygenase (FMO), for SN N-oxidation by hepatic microsomes from F344 females. In F344 males, however, a bimodal pattern was obtained with activity peaks at pH 7.6 and 8.5 reflecting the possible involvement of both cytochrome P450 (CYP) and FMO. Use of specific inhibitors (SKF525A, 1-benzylimidazole and methimazole) showed that the N-oxide of SN was primarily produced by FMO in both sexes of F344 rats. In contrast, SN N-oxide formation is known to be catalyzed mainly by CYP2C11 rather than FMO in SD rats. This study, therefore, demonstrated that there were substantial differences in the formation of SN N-oxide by hepatic microsomes from F344 and SD rats and that this detoxification is catalyzed primarily by two different enzymes in the two rat strains. These findings suggest that significant variations in PA biotransformation can exist between different animal strains.     

黑顺片炮制过程中6种酯型生物碱的变化规律研究

研究黑顺片炮制过程中6种酯型生物碱的变化规律及特征图谱,为黑顺片的炮制原理研究奠定基础.采用Phenomenex Gemini C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-40 mmol·L-1醋酸铵(浓氨调pH 10.0)梯度洗脱,流速0.8 mL·min-,检测波长235 nm,进样量10 ～ 20 μL,测定6种酯型生物碱含量的变化以及建立炮制过程的特征图谱.随着炮制过程的进行,双酯型生物碱含量降低,单酯型生物碱变化规律不明显,各炮制过程环节的7种附子“状态”特征图谱差异明显.特征图谱中共标记13个峰,除6种已知单双酯型生物碱外,其余7个峰峰面积变化趋势与双酯型生物碱的变化趋势一致.该方法准确可靠,重复性好,可为揭示黑顺片炮制过程中指标成分的变化规律以及阐明炮制原理提供参考.     

马钱子组分对人HaCaT细胞毒性作用的比较

目的研究马钱子生物碱及其不同组分对人永生化表皮细胞系Ha Ca T细胞的毒性作用。方法体外培养Ha Ca T细胞,加入相同质量浓度的马钱子碱、士的宁、马钱子碱与士的宁的混合物,和马钱子总生物碱作用于细胞24 h后,采用MTT比色法测定不同生物碱的细胞增殖抑制作用;流式细胞仪检测对Ha Ca T细胞的凋亡,比较马钱子生物碱不同组分对Ha Ca T细胞的毒性作用。结果士的宁对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子碱;马钱子碱和士的宁混合物组对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子总生物碱。结论马钱子生物碱组分均对Ha Ca T细胞存在细胞毒作用,呈剂量依赖关系,但马钱子碱的细胞毒性明显小于士的宁。