Presence and integration of HBV DNA in mouse oocytes

AIM: Hepatitis B is a worldwide public health problem. To explore the feasibility of hepatitis B virus (HBV) vertical transmission via oocytes, the presence and integration of HBV DNA in mouse oocytes were studied. METHODS: Genomic DNA was isolated and metaphases were prepared, respectively from mouse oocytes cocultured with pBR322-HBV DNA plasmids. PCR, Southern blot, dot hybridization and fluorescence in situ hybridization (FISH) were performed to explore the existence and integration of HBV DNA in oocytes. RESULTS: PCR detected positive bands in the tested samples, and then Southern blot revealed clear hybridization signals in PCR products. Final washing solutions were collected for dot hybridization and no signal for HBV DNA was observed, which excluded the possibility that contamination of washing solutions gave rise to positive results of PCR and Southern blot. FISH demonstrated that 36 of 1 000 metaphases presented positive signals. CONCLUSION: HBV DNA sequences are able to pass through the zona and oolemma to enter into oocytes and to integrate into their chromosomes. HBV DNA sequences might be brought into embryo via oocytes as vectors when they are fertilized with normal spermatozoa.     

681例男性不育患者的染色体核型分析

目的探讨染色体异常与男性不育症的关系。方法用常规方法制备外周血淋巴细胞染色体标本，对681例男性不育患者进行染色体G显带核型分析。结果发现异常染色体核型28例，占不育患者总数的4．11％，其中性染色体数目、结构异常者21例，常染色体异常者7例。结论染色体变异对男性生育有重要影响，对久治不愈的不孕不育患者应检查染色体以排除染色体畸变的可能。     

乳腺癌17号染色体多体的临床病理意义

目的 探讨乳腺癌17号染色体多体异常的临床病理学意义.方法 回顾性分析200例乳腺癌荧光原位杂交结果,并分析17号染色体多体与年龄、核异型性、淋巴结转移以及HER2基因扩增、HER2蛋白表达的关系.结果 200例乳腺癌患者中表现为17号染色体多体异常的52例(26.0%),均为浸润性导管癌;占180例浸润性导管癌的52.8%.17号染色体多体与HER2基因扩增和HER2蛋白表达有关(均P=0.000),并且多体伴HER2基因扩增时也与HER2蛋白表达有关(P=0.001).多体和(或)多体伴HER2基因扩增都与乳腺癌癌细胞的高度异型性(P=0.010或P=0.012)及淋巴结转移有关(P=0.009或P=0.002).17号染色体多体或多体伴HER2基因扩增与乳腺癌患者的年龄无关(P=0.415或P=1.000).结论 17号染色体多体可能与乳腺癌患者的预后不良有关.     

少突胶质细胞瘤染色体1p/19 q杂合性缺失与p53蛋白表达的相关性研究

目的 探讨少突胶质细胞瘤染色体1p/19q杂合性缺失及p53蛋白的表达情况,与星形细胞起源的肿瘤进行比较研究并探讨其意义.方法 选择2004-2005年间,经病理组织学诊断为不同类型和级别的胶质瘤合计191例,包括:WHOⅡ级少突胶质细胞瘤116例,其中30例为新鲜组织;间变性少突胶质细胞瘤45例和不同级别星形细胞起源的肿瘤石蜡组织30例;采用PCR-微卫星技术检测染色体1p/19q杂合性缺失情况;采用免疫组织化学方法 对184例胶质瘤石蜡切片p53蛋白表达情况进行半定量分析.结果 86例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤石蜡标本染色体1p缺失率为69.8%(60/86)、19q缺失率为64.0%(55/86)、1p/19q联合缺失率为57.0%(49/86);45例间变性少突胶质细胞瘤中,1p缺失率为71.1%(32/45)、19q缺失率为60.0%(27/45)、1p/19q联合缺失率为55.6%(25/45);两种级别间差异无统计学意义(P>0.05).30例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤新鲜标本染色体1p缺失率为70.0%(21/30)、19q缺失率为63.3%(19/30)、1p/19q联合缺失率为60.0%(18/30),与石蜡标本的缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05).30例星形细胞起源的肿瘤染色体对应三种缺失率分别为23.3%(7/30)、33.3%(10/30)及20.0%(6/30),与少突胶质细胞瘤差异有统计学意义(P<0.05).86例WHO Ⅱ级少突胶质细胞瘤中,仅7例有p53蛋白阳性表达(占8.1%);45例间变性少突胶质细胞瘤中,有14例呈阳性表达(31.1%),两者差异有统计学意义(P=0.007).少突胶质细胞瘤p53蛋白阳性表达明显低于星形细胞起源的肿瘤(P=0.001).在间变性少突胶质细胞瘤中,染色体1p/19q杂合性缺失与p53蛋白阳性表达呈负相关(P<0.05).结论 石蜡和新鲜组织均可用于染色体1p/19q杂合性缺失的检测.在间变性少突胶质细胞瘤中,染色体1p/19q杂合性缺失与p53蛋白阳性表达呈负相关.检测少突胶质细胞瘤染色体1p/19q杂合性缺失和p53蛋白表达,对提高病理诊断的精确性、指导治疗及预后判断具有重要意义.     

河南省一例致死性家族性失眠症病例研究

目的 调查和研究报道1例散发型致死性家族性失眠症(sporadic Family Fatal isomnia,sFFI)的临床症状,分析人类朊病毒病(Human prion protein,PrP)基因特征.方法 随访调查1例疑为FFI患者的临床特征和家族发病史;采集患者脑脊液及抗凝全血标本后Western-Blot检测14-3-3脑蛋白及常染色体PrP基因突变及测序分析;采集患者家族成员抗凝全血进行PrP基因突变检测.结果 根据患者的临床表现及PrP基因检测结果,PrP呈D178N/129M/M突变基因型;且脑蛋白14-3-3阳性,这在以往少有报道,提示今后在临床鉴别、诊断人类克.雅病(CJD)与FFI患者时,应注重甄别临床症状及实验室结果;14名直系及旁系家族成员PrP基因均未出现突变,且家族内无其他人患类似疾病.结论 该患者为致死性家族性失眠症单发性病例;患者的临床表现及PrP基因突变检测对甄别单发、家族聚集性的致死性失眠症及人类CJD作用重大.该FFI病例为我国首次报道,具有较大的临床意义和科研意义.     

滑膜肉瘤t(X;18)易位断裂点基因组DNA序列特征分析

目的 分析滑膜肉瘤t(X;18)染色体易位断裂点基因组DNA序列特征,探讨其与滑膜肉瘤t(X;18)染色体易位发生的关系。方法 采用长距离聚合酶链反应（PCR）及DNA测序技术,对2例滑膜肉瘤新鲜标本t(X;18)染色体易位断裂点基因组DNA序列进行了扩增及序列分析。结果 2例滑膜肉瘤标本均存在t(X;18)染色体易位,分别导致SYT-SSX1和SYT-SSX2融合基因形成,DNA序列分析显示,SYT基因第10内含子分别与SSX1和SSX2基因的第4内含子发生融合。在3种基因的断裂点附近均存在与共有易位素（translin)识别序列高度同源的序列,还发现3种基因的断裂点靠近,甚至位于呈回文结构的寡核革酸序列中,SSX1和SSX2基因第4内含子断裂点位于Alu重复序列附近,而SYT基因第10内含子断裂点上游和下游各500碱基内均未发现Alu或其他重复序列。在SYT两断裂点之间的DNA序列中存在一处拓扑异构酶Ⅱ的识别序列,但与两断裂点距离较远。结论 滑膜肉瘤染色体易位所涉及的3种基因的基因组断裂点区域存在特征性的序列,可能与滑膜肉瘤染色体易位的发生有关。     

Genetics of bladder cancer

Bladder cancer manifests many different forms, ranging from superficial to aggressive muscle invasion, which suggests that various genetic alterations are responsible. Several attempts have been made to establish correlations between specific genetic alterations and various grades of the disease. Numerous types of chromosomal abnormalities have been observed, involving [1p, 1q, 2q, 3p, 4p, 5q, i(5p), +7, +8, 8p, 9p, 9q, 10q23–25, 11p, 11q, +11, 13q, 14q, 17p, 18q, 21q, and Y]. In addition, p53 mutations and loss of heterozygosity on various chromosomes have recently begun to shed light on the molecular pathways of transitional cell carcinomas of the bladder. We have begun to focus on specific genomic sites (especially 9q), although the heterogeneity of the disease and the variable presentation suggests divergent progression pathways. When the genetic basis of bladder cancer is fully understood, new diagnostic and therapeutic strategies will be developed, which in turn may promote better clinical management by pathologists and urologists.Abbreviations CIS Carcinoma in situ - LOH Loss of heterozygosity - p Short arm - q Long arm     

多色FISH技术快速检测未培养羊水细胞染色体

目的探讨采用多色荧光原位杂交（fluo rescence in situ hybridization,FISH）技术检测未培养羊水细胞染色体异常的可行性。方法应用着丝粒探针、特异性序列探针对16例孕妇的未培养羊水细胞进行FISH分析,对5条染色体（13号、18号、21号、X和Y）进行检测并和常规核型分析进行对照。结果16例羊水细胞检测均获得诊断结果,发现1例异常胎儿为18-三体。FISH检测与常规核型分析结果一致。结论多色FISH技术快速、简便、可靠,可一次实验检测多条染色体异常。具有较大临床应用价值。     

染色体臂间倒位在成人中遗传效应的分析

目的研究人类染色体臂间倒位的遗传效应，分析染色体臂间倒位与不育、流产和畸胎的关系。方法采取受检者外周血淋巴细胞培养制备染色体G显带标本，按人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN1995）进行核型分析。结果染色体臂间倒位在受检的4462份成人中，检出94例，计有inv（9）79例、inv（Y）（p11q11）11例、inv（1）（p35q31）1侈4、inv（2）（p23q23）1侈4，inv（5）（p14q13）inv（9）（p11q13）1侈4，ivn（6）（p25q23）1侈4。结论inv（9）一般认为本身不具有病理学意义，但在临床检出率要高于普通人群发生率，其遗传效应有待进一步研究，而其它染色体臂间倒位与流产，不育和畸胎有关。     

鼻咽癌染色体1pter-p36.11杂合性缺失

目的构建鼻咽癌染色体1pter-p36.11(63.4cM)区域内的杂合性缺失精细图谱,为进一步寻找鼻咽癌相关基因提供依据。方法在比较基因组杂交和间期荧光原位杂交研究基础上,应用淋巴分离液将肿瘤组织的肿瘤细胞与淋巴细胞分离并以淋巴细胞DNA作相应正常对照,利用1pter-p36.11区域内的20个微卫星多态位点(平均间距3cM)对47例鼻咽癌活检组织用杂合性缺失(LOH)分析法进行LOH分析并绘制其精细缺失图谱。结果在47例鼻咽癌患者中,至少有一个位点存在LOH的有37例(82.2%),其中LOH频率最高的为D1S234(50.0%),位于1p36.13,其次为D1S2644(37.5%),位于1p36.22;微卫星不稳定频率最高的为D1S243(37.5%),位于1p36.33,其次为D1S199(30.2%),位于1p36.21;D1S234的LOH及D1S199的MI与临床分期相关无显著性意义（P>0.05）。结论鼻咽癌染色体1pter-p36.11之间63.4cM区域内有两个共同的缺失区,分别位于1p36.13(D1S234,2.0cM)与1p36.22(D1S436-D1S2644,6.3cM),其间有一个微卫星不稳定位点D1S199,D1S436-D1S199-D1S234区域内可能有一个或几个在早期与鼻咽癌形成相关的肿瘤抑制基因。