Protective effects of papaverine salicylate in mouse ear dermatitis and PAF-induced rat paw oedema

Papaverine salicylate (MR-800) has been tested as a topical antiinflammatory agent in several models of skin inflammation in rodents, such as mouse ear dermatitis induced by croton oil, cantharidin or zymosan, and rat paw oedema induced by PAF. MR-800 exerted a dose-dependent inhibitory activity in all assays, when equimolar doses of sodium salicylate or papaverine were less effective, suggesting the existence of a favourable synergism between salicylate and papaverine.     

斑蝥素抑制人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移的体外实验研究

背景与目的:斑蝥素在治疗癌症方面显示出其独特的疗效,已有较多文献证实核因子鄄κB(nuclearfactor鄄kappaB,NF鄄资B)与肿瘤侵袭转移关系密切。本研究旨在观察斑蝥素对人高转移卵巢癌细胞HO鄄8910PM转移相关能力的影响,并探讨其作用机理。方法:MTT法及细胞粘附人工重组基底膜实验检测斑蝥素对HO鄄8910PM细胞的细胞毒作用及粘附能力的影响;用Transwell小室法检测斑蝥素对HO鄄8910PM细胞侵袭能力和趋化运动能力的影响;Westernblot法分析斑蝥素对HO鄄8910PM细胞中NF鄄κB和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的影响。结果:20μmol/L的斑蝥素作用6h对HO鄄8910PM细胞抑制率及体外侵袭、趋化运动和粘附的抑制率分别为(8.4±2.2)%及(38.8±1.7)%、(40.3±5.6)%和(55.1±6.7)%。20μmol/L斑蝥素能明显下调HO鄄8910PM细胞中NF鄄κB和VEGF的表达。结论:斑蝥素能抑制HO鄄8910PM细胞的侵袭、运动和粘附能力。斑蝥素抗肿瘤侵袭转移的作用机制与NF鄄κB和VEGF蛋白的表达下调有关。     

用强化靶向材料修饰斑蟊素多相脂质体与其肝脏定向作用的实验研究

本试验合成了一种含氧乙基的半乳糖衍生物Galβ1－（CH2－CH2－O）3－C14H29做为强化靶向材料，使其与卵磷脂（EYL）制得的斑蟊素脂质体相融合，测定其一系列理化性质。结果表明，此种强化靶向材料的加入并不影响脂质体的常规理化性质。小鼠尾静脉注射3．5h后，强化斑蟊素脂质体是普通斑蟊素脂质体在肝内浓度的3．6倍（P＜0．05），滞留时间亦显著延长。因为半乳糖可识别的动物凝聚素存在于肝内，所以此种半乳糖衍生物修饰的脂质体可充当治疗肝病药物的理想载体。     

斑蝥素诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨斑蝥素（Cantharidin）对人胰腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法观察斑蝥素对人胰腺癌细胞株SW1990细胞增殖的抑制作用。采用Hoechst33258染色、TUNNEL染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变，并以RT—PCR和Westernblot检测凋亡调节基因p53和Bcl-2、Bax的表达。结果 5mol／L斑蝥素能明显抑制人胰腺癌SW1990细胞的生长，呈现凋亡特征。RT—PCR和Westernblot检测可见Bax、p53基因表达显著增加，而Bcl—2基因表达减少。结论 斑蝥素能诱导人胰腺癌细胞凋亡，其作用可能与上调p53、Bax基因和下调Bcl-2基因有关。     

斑蝥致肝、肾毒性研究进展

芫菁科昆虫斑蝥(Mylabris)是我国经典大毒抗肿瘤中药之一,斑蝥素(cantharidin,CTD)是其主要活性成分。因其具有独特的升白提高免疫的优势,斑蝥素类上市中药大品种已成为目前临床联合化疗的主流用药。然而,民间常因为误食、多食频发斑蝥中毒事件,临床应用也常出现不良反应,尤其是肝、肾毒性。其靶器官损伤机制尚不十分清楚,极大地制约了其临床应用,因此亟须厘清斑蝥病理损伤及毒理机制。本文对近年来斑蝥致肝、肾毒性研究进行综述,探析其共性毒性规律、毒理机制及减毒保护策略,以期为斑蝥的减毒策略及新药研发提供参考。     

去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制

目的 探讨去甲斑蝥素（NCTD）对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制。方法 在建立裸鼠胆囊癌移植瘤动物模型的基础上进行肿瘤增殖、侵袭、转移体内干预实验,实验分空白对照、氟尿嘧啶、NCTD、NCTD＋氟尿嘧啶4组。6周末应用链霉素亲和生物素复合物（SABC）法检测移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67、细胞周期素D1（cyclin D1）、p27、Bcl-2蛋白,逆转录PCR（RT-PCR）检测PCNA、cyclin D1、p27、Bcl-2、Bax、存活素（Survivin）基因mRNA。HE染色观察瘤周癌细胞浸润、侵袭,解剖显微镜下观察肺组织转移瘤结节,并采用SABC和RT-PCR检测nm23、金属蛋白酶2（MMP2）及其组织抑制剂（TIMP2）蛋白和mRNA。结果 NCTD组增殖相关PCNA、Ki-67、cyclin D1蛋白表达下降,p27蛋白表达上升;PCNA mRNA、cyclin D1 mRNA表达下降,p27 mRNA表达增高。NCTD组凋亡相关Bcl-2蛋白表达下降;Bcl-2 mRNA、Survivin mRNA表达下降,Bax mRNA表达增高。NCTD显著减少荷瘤鼠移植瘤的瘤周癌细胞浸润和肺转移结节（P〈0．01）;NCTD组转移相关MMP2蛋白表达下降,nm23、TIMP2蛋白表达上升;nm23-H,mRNA、TIMP2 mRNA表达增高。结论 NCTD抑制荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤增殖、侵袭和转移的机制可能与NCTD干扰胆囊癌移植瘤细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻止细胞迁移运动,以及影响细胞增殖、细胞周期调控、细胞凋亡、细胞基质溶解和转移相关基因蛋白表达有关。     

去甲斑蝥素对白蛋白刺激肾小管上皮细胞增殖及上调纤维连接蛋白表达的影响

目的观察去甲斑蝥素（NCTD）对白蛋白刺激人近端肾小管上皮细胞株（HK-2）增殖及上调FN表达的影响,初步探讨NCTD延缓肾间质纤维化的体外作用机制。方法通过细胞毒性实验筛选出对HK-2细胞无明显损伤的NCTD适合浓度。将HK-2细胞随机分为5组：对照组（1640培基组）,白蛋白组（1640＋白蛋白5g/L）,各浓度NCTD组（1640＋白蛋白5g/L＋NCTD 0.5,1,2.5mg/L）。在各组HK-2细胞中加入相应干预液孵育24h后,采用细胞增殖法（MTT法）检测NCTD对白蛋白刺激HK-2细胞增殖的影响;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清中FN的蛋白含量;RT-PCR法半定量分析HK-2细胞中FN mRNA的表达。结果①比较对照组及NCTD（0.5,1.0,2.5 mg/L）各组的乳酸脱氢酶（LDH）浓度,各组间的差异无统计学意义（P〉0.05）;②白蛋白组MTT值（0.438±0.073）明显高于对照组（0.330±0.060）（P〈0.05）,而NCTD（2.5 mg/L）组MTT值（0.327±0.080）较白蛋白组降低（P〈0.05）;③与白蛋白组比较,NCTD（2.5mg/L）组HK-2细胞上清中FN蛋白含量降低,差异有统计学意义（P〈0.01）;NCTD（1mg/L和2.5mg/L）组细胞上清中FN mRNA的表达较白蛋白组明显下调,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论白蛋白（5g/L）诱导HK-2细胞增殖及FN过表达,一定浓度去甲斑蝥素可抑制白蛋白对HK-2细胞的活化作用。     

Tumor specific low pH environments enhance the cytotoxicity of lovastatin and cantharidin

In tumor cell masses, the extracellular pH decreases below 6.5. The effect of external acidic pH on the efficacy of 24 chemical compounds including molecular-targeted inhibitors and anti-tumor reagents was investigated in human cancer cells. Lovastatin showed no cytotoxicity in mesothelioma or pancreatic carcinoma cells at concentrations up to 10 μM and pH around 7.4, but 10 μM lovastatin decreased the survival of these cells below 40% at acidic pH. Lovastatin inhibits HMG-CoA reductase, resulting in a decrease in the levels of cholesterol and prenylated proteins. An inhibitor of the former pathway showed pH-independent cytotoxic activity, whereas an inhibitor of the latter pathway had stronger activity at acidic pH. The inhibitory efficacy of cantharidin also increased at acidic pH. On the other hands, no pH dependency or slightly impaired efficacy at low pH conditions was observed in other 20 reagents, and especially, the activity of aphidicolin was suppressed under acidic conditions. These results suggested that screening under acidic conditions would be useful for developing new chemotherapeutic reagents.