血管生成抑制剂Canstatin研究概况

人血管能抑素Canstatin是近年发现的血管生成抑制剂,具有强大的抑制血管生成作用.本文综述了该药的发现命名、生物学效应、作用机制、应用前景.     

As2O3联合重组canstatin蛋白对体外肿瘤血管内皮细胞的影响

目的 探讨As2O3联合canstatin蛋白对肿瘤血管内皮细胞(Td-EC)增殖、迁移、血管形成的影响及其凋亡的机制.方法 用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成为Td-EC.As2O3联合canstatin干预Td-EC,通过细胞迁移,流式细胞术,观察血管形成.结果 As2O3、canstatin及联合影响Td-EC迁移细胞数分别为32.60±1.51、26.60±1.14、21.00 ±1.87,显著低于对照组50.60±2.30(P＜0.01),并促进凋亡、抑制管腔形成,以联合应用更显著.结论 As2O3联合canstatin在体外可特异地抑制Td-EC增殖、迁移、血管形成及其凋亡.     

人canstatin基因的克隆、表达、纯化及其生物活性测定

目的:克隆人Canstatin cDNA,在E.coli中融合表达和纯化,并测定表达产物抑制新生血管生成活性.方法:从中国人胎盘组织提取总RNA,RT-PCR扩增出Canstatin cDNA,克隆入pTYB1载体中并测序,构建原核表达载体pTYB1-hCAN,IPTG诱导表达,几丁质亲和纯化,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成实验进行活性测定.结果:RT-PCR产物约为700bp,测序结果与文献报道序列一致.构建了人Canstatin原核表达载体vTYB1-hCAN,在大肠杆菌中表达.纯化的融合蛋白在CAM实验中能明显抑制血管生成.结论:克隆、表达了具有生物学活性的人canstatin蛋白.     

人canstatin基因对人食管癌裸鼠移植瘤中bcl-xl和cyclin D1表达的影响及意义

目的探讨人canstatin基因对人食管癌裸鼠移植瘤的的影响作用,寻求其抑制肿瘤生长的机制。方法 KYSE150细胞建立裸鼠食管癌动物模型,Ad-canstatin实施干预,RT-PCR检测肿瘤组织bcl-xl、cy-clinD1的mRNA的表达水平。免疫组织化学方法检测微血管密度（MVD）。结果治疗组肿瘤体积明显小于两个对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,而两对照组间差异无统计学意义。对电泳结果进行灰度分析和统计学分析显示canstatin治疗组cyclinD1、bcl-xl的mRNA表达明显低于GFP组和PBS组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。canstatin治疗组MVD明显低于对照组。结论人canstatin基因对人食管癌移植瘤的生长具有抑制作用,其作用机制可能与抑制cyclin D1、bcl-xl表达而抑制肿瘤血管生成有关。     

两种源于胶原Ⅳ非胶原区具有抑制血管形成和肿瘤生长的功能肽

Tum statin和 Canstatin是继 Restin、angiostatin和 endostatin之后最新发现的基底膜来源人胶原 肿瘤血管生成抑制因子。 Tumstatin来源于胶原 α3链 ,其 N-端 5 4～ 132氨基酸功能肽能够抑制内皮细胞增殖和诱导内皮细胞凋亡 ,N -端 197～ 2 15氨基酸 [α3( ) NC1185～ 2 0 3氨基酸 ]功能肽能够抑制多种恶性肿瘤细胞的增殖。 Canstatin是来源于 型胶原α2链的 2 4 k D的血管生成和肿瘤生长抑制因子 ,它能剂量依赖性抑制内皮细胞管状结构的形成 ,有效抑制内皮细胞的增殖和迁移 ,并能诱导内皮细胞凋亡。在小鼠移植瘤模型体内实验中 ,Tum-statin和 Canstatin都显示出对实体瘤生长的显著抑制作用     

人canstatin基因治疗人食管癌裸鼠移植瘤的实验研究

背景与目的：Canstatin是一种新内源性血管生成抑制剂,以往的研究显示canstatin能有效的抑制肿瘤的生长,作用甚至强于endostatin。本研究将探讨人canstatin基因对人食管鳞状细胞癌移植瘤模型的抑制作用。方法：应用人食管癌细胞株KYSE150建立移植瘤模型。将裸鼠随机分成3组：腺病毒携带的canstatin基因组（Ad—GFP—canstatin）、腺病毒携带的绿色荧光蛋白组（Ad—GFP）和磷酸盐缓冲液组（PBS）。治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30d后处死裸鼠,取下肿瘤行常规病理切片,观察药物的毒性反应;检测肿瘤组织中caspase-3、内皮细胞生长因子受体1（fetal liver kinase-1,Flk-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达和微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：第二次注射病毒后3d,canstatin基因治疗组肿瘤体积显著小于其余两组（P〈0．05）,治疗第6天抑瘤率达到61％;HE染色显示：各组肿瘤组织中都有坏死．尤其在canstatin基因治疗组坏死更加明显;canstatin基因治疗组caspase-3表达高于空载体组和对照组（P〈0．05）;Flk-1的表达低于空载体组和对照组（P〈0．05）：VEGF的表达3组相比差异无统计学意义（P〉0．05）：canstatin基因治疗组MVD低于空载体组和对照组（P〈0．05）。结论：人canstatin基因对人食管癌移植瘤的生长具有抑制作用,作用机制可能是降低Flk-1的表达进而抑制肿瘤的血管生成,抑制肿瘤的生长。     

癌抑素Canstatin的抗肿瘤作用及其机制

Canstatin是一种来源于Ⅳ型胶原α2链非胶原(NC1)区的血管生成和肿瘤生长抑制因子.它能剂量依赖性抑制血管内皮细胞增殖和迁移,诱导内皮细胞凋亡,在体内实验中Canstatin显著抑制实体瘤的生长.Canstatin的抗肿瘤作用可能与诱导凋亡有关,其作用机制在于抑制磷脂酰肌醇3-激酶/Akt(PI3-k/Akt)信号通路,并依赖膜死亡受体介导的信号事件.     

结肠癌组织中canstatin基因的表达

目的 观察canstatin基因在结肠癌组织中的表达及意义.方法 采用RT-PCR检测40例结肠癌癌组织、相应的癌旁组织和远癌组织中canstatin mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较各组织中canstatin与GAPDH条带的灰度值之比.半定量分析canstatin mRNA的表达水平.结果 癌组织中canstatin mRNA表达水平(0.47±0.14)低于癌旁组织(0.58±0.18)和远癌组织(0.62±0.21);随着肿瘤分化程度的升高,canstatin mRNA在癌组织中的表达也增加(P<0.05),但canstatin mRNA表达与结肠癌临床分期(TNM)、淋巴结转移和病理类型均无统计学差异(P>0.05).结论 canstatin mRNA在结肠癌组织中低表达,说明can-statin基因在结肠癌的发生发展中可能发挥重要作用.     

Canstatin基因转染对体外培养血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨电转染Canstatin基因对体外培养人脐静脉内皮细胞生长的影响。方法将Canstatin基因通过电穿孔法转染人脐静脉内皮细胞HUV-ECC,行G418筛选获得转基因细胞克隆。用SDS-PAGE电泳检测Canstatin蛋白在转基因细胞培养上清液中的表达,以流式细胞仪分析细胞周期,并比较转基因和未转基因细胞的生长特性。结果Canstatin在转染人脐静脉内皮细胞中表达并分泌至上清液中,Canstatin基因转染内皮细胞组的凋亡率（16.90%）高于空载体组（1.47%）和亲代细胞组（2.85%,P<0.01）,转染细胞生长明显受抑。结论Canstatin能特异地抑制血管内皮细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

血管生成抑制因子canstatin与肿瘤的关系

Canstatin为Ⅳ型胶原α2 链双链片段的内源性蛋白 ,作为特异性的血管生成抑制因子 ,能抑制内皮细胞 (EC)增生、迁移并有抑制EC形成血管等功能 ,有望成为抑制肿瘤生长的新途径。作者对canstatin的发现、生物学特性及其与肿瘤的关系进行了综述