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C端序列的删除对非出血重组蛇毒纤溶酶的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
[目的]研究C端序列对非出血重组纤溶酶(rFⅡ)特异性、活性和热敏感性的影响.[方法]通过SOEing PCR方法构建删除C端序列的突变体,突变体和rFⅡ分别在P.pastoris中诱导表达.表达和纯化的蛋白用SDS-PAGE和Westeren blot进行鉴定.之后分析其生化特性.[结果]rFⅡ及突变体通过SDS-PAGE和Westeren blot得到证实.生化分析揭示:①突变体对显色底物N-(p-Tosyl)-Gly-Pro-Lys-pNA的催化效率(Kcat/Km)是rFⅡ的1.9倍;②突变体和rFⅡ对氧化的胰岛素B链拥有共同的优先裂解位点,可是在随后的裂解中开始展现差异;③突变体显示了更高的纤(原)活性;④热处理表明突变体相较r FⅡ对温度的增加更敏感;⑤通过圆二色谱测量,突变体的螺旋比例有所增加.[结论]删除的序列参与rFⅡ的特异性、活性和热敏感性,该序列可作为下一步优化的候选序列. 相似文献
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贾凤香 《中华实用中西医杂志》2006,19(18):2245-2246
随着人类社会的发展及物质的丰富,思想观念越来越新,药剂科的管理也要不断地更新发展。在缺医少药的年代,药剂科的工作主要是保障共应药品,改革开放之后药品市场上的种类、数量、质量都有很大提高,人们对医疗的要求也不仅是把病治愈,还要提高生存质量。因此社地对药剂科的工作提出了更高的要求,促使21世纪药剂科的工作从保障供应型向技术服务型转变,并提出药学监护的概念(Pharmaceutical Care)。 相似文献
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目的:探讨细胞活素肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、SNAP(S-Nitroso-Nacetyl-penicillamine)对胰腺癌细胞产生血管内皮生长因子A、C(VEGF-A、C)的调节.方法:用Northern杂交和Western杂交法分析6种人胰腺癌细胞株中VEGF-A、C基因和蛋白的表达;以TNF-α或SNAP刺激其中两个细胞株后用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)分析其VEGF-A、C基因的表达.结果:Northern杂交法显示这6种胰腺癌细胞株均有4.1kb VEGF-A基因和2.4kb VEGF-C基因的表达;Western杂交法显示它们均有分子量为43kD的VEGF-A蛋白质和分子量为55kD的VEGF-C蛋白质的表达.RT-PCR分析法显示:TNF-α使细胞株COLO-357产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1~2.5倍、1~2倍,使细胞株CAPAN-1产生VEGF-A、VEGF-C mRNA分别减少约1倍、1.6~2.5倍;而SNAP刺激细胞株COLO-357产生VEGF-A mRNA增加约5倍,刺激细胞株CAPAN-1产生VEGF-A mRNA增加约4倍,但对这两种细胞株产生VEGF-C mRNA均无明显刺激作用.结论:细胞活素TNF-α和低氧通过调节血管内皮生长因子A、C的表达而影响胰腺癌细胞的生物学特性,抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡、死亡或进展、恶化. 相似文献
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为了探讨抑癌基因P53、癌基因c-erbB-2与口腔颌面部鳞癌的关系,应用S-P免疫组化方法,对65例口腔颌面部鳞癌患者作上述两种基因蛋白的检测,结果发现:P53蛋白表达阳性38例,阳性率为58.5%;c-erbB-2蛋白表达阳性50例,阳性率为76.9%。临床分期越高,阳性率也越高(P53:X^2=0.54,P〈0.05;c-erbB-2:X^2=5.168,P〈0.05);与病理分级亦有关系( 相似文献
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120例肾小球疾病C—RP检测的临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
120例肾小球疾病C-RP检测的临床意义段新美,朱德全(临沂市人民医院山东临沂276003)C-反应蛋白(C-RP)是一种急性时相蛋白,在炎症期或组织破坏时升高。1993年Tillet和Francis首先在急性肺炎病人的血清中发现了此种蛋白,因其能与... 相似文献