马钱子碱对一氧化氮诱导软骨细胞凋亡的影响

目的:观察中药马钱子碱对一氧化氮(nitricoxide,NO)在体外诱导的兔软骨细胞凋亡的影响。方法:取体外培养的新西兰兔软骨细胞,分别加入硝普钠(SNP)培养12,24,48h,用透射电镜和流式细胞仪观察软骨细胞凋亡的变化,并以不同剂量马钱子碱加入NO诱导的软骨细胞凋亡体系培养24h,采用annexinV/PI方法检测凋亡情况。结果:在体外培养兔软骨细胞加入硝普钠24h,流式细胞仪检测早期凋亡率为(38.7±6.5)%。空白对照组为(2.4±1.4)%(t=10.90,P<0.01),透射电镜可见典型软骨细胞早期凋亡形态改变,并有一定时间依赖性,加入不同剂量马钱子碱,其凋亡率明显下降,并以高剂量最为显著为(2.9±1.1)%。马钱子碱高剂量组加入硝普钠后与正常软骨细胞组比较,二者凋亡率无显著差异性(t=0.51,P>0.05)。结论:硝普钠在体外能诱导软骨细胞凋亡,马钱子碱能明显降低NO诱导的软骨细胞早期凋亡,提示马钱子碱能有效治疗骨关节炎,可能与抑制软骨细胞早期凋亡有关。     

铵离子浓度的测定及其在马钱子碱复合磷脂脂质体制备中的应用

目的建立铵离子浓度的测定方法并应用于脂质体制备研究。方法将硫酸铵溶液加入显色剂显色后在630nm处比色测定,并考察了线性、精密度、稳定性、回收率等项目,测定脂质体透析液中的铵离子浓度。结果铵离子在0.95～9.50μg/mL范围内呈现良好的线性关系;回收率为101.29%,精密度与稳定性良好。通过测定铵离子确定了透析工艺。复合磷脂脂质体中的铵离子含量明显高于单一磷脂脂质体,与其载药后包封率的提高具有相关性。结论该方法适于空白脂质体透析液中铵离子含量的测定;复合磷脂脂质体提高马钱子碱载药量的机制与提高脂质体中铵离子的含量相关。     

马钱子碱贴膏剂的抗肿瘤作用研究

目的：评价马钱子碱贴膏剂的抗肿瘤作用。方法：采用 H22荷瘤小鼠模型,按高（240 mg· kg-1）、中（120 mg·kg-1）、低（60 mg·kg-1）三个剂量给予马钱子碱贴膏剂,测定抗肿瘤作用及毒性。结果：与空白对照组相比,马钱子碱贴膏剂中剂量（120 mg·kg-1）和高剂量（240 mg·kg-1）对 H22荷瘤小鼠肿瘤生长抑制差异有显著性,中浓度的抑制率达到46.5%。马钱子碱贴膏剂未观察到具有免疫抑制作用和体重减轻作用,也未观测到血液毒性。结论：马钱子碱贴膏剂具有抗肿瘤药效,并且应用安全。     

马钱子碱隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤作用比较

目的比较马钱子碱隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤作用。方法昆明种小鼠接种肝癌H22瘤株复制成移植性肝癌H22小鼠模型,测定马钱子碱溶液、普通脂质体和隐形脂质体(剂量均为3.23 mg·kg~(-1),ip,8 d)对实体瘤小鼠的抑瘤率,并比较各组实体瘤小鼠的体重、免疫器官(脾和胸腺)指数。结果同剂量的马钱子碱溶液、普通脂质体、隐形脂质体的抑瘤率分别为28.64%、57.96%和71.36%;马钱子碱普通脂质体和隐形脂质体对荷瘤小鼠均无免疫抑制作用。结论与普通脂质体相比,隐形脂质体作为马钱子碱的载体能够进一步增强其抗肿瘤效果。     

马钱子碱双层聚合物可溶性微针的制备及其在不同载药方式下的体外经皮渗透性研究

目的:制备马钱子碱(Bru)双层聚合物可溶性微针,并考察其在不同载药方式下的体外经皮渗透特性。方法:以微针揭膜难易程度、阵列完整性、气泡量、针型、针尖硬度、背衬韧性等为考察指标分别筛选微针的针尖材料和背衬材料,并以微针形态为考察指标筛选基质溶胀方法和干燥方法,然后采用两步法制备双层聚合物可溶性微针,并进行表征和安全性评价。通过Franz扩散池法考察针尖载药、背衬载药、全载药Bru双层聚合物可溶性微针的体外经皮渗透特性,绘制体外透皮曲线并计算累积渗透量(Q)和累积渗透率。结果:优选的双层聚合物可溶性微针的制备工艺为以硫酸软骨素-聚乙烯吡咯烷酮K30(1∶1,m/m)作为针尖材料,15%聚乙烯醇作为背衬材料,在4℃冰箱静置1 h进行基质溶胀,干燥器室温干燥24 h。所制微针阵列完整,机械性能良好,能成功刺穿铝箔和大鼠皮肤,微针处理后皮肤在6 h内即可恢复到原来的状态。体外透皮试验结果显示,微针递药可大大提高Bru的经皮累积渗透量,针尖材料可在10 min内溶解并释放药物;针尖载药微针在8 h内基本释放完全,Q_{8 h}为102.185μg/cm²,累...     

HPLC法测定镇江橡胶膏中士的宁及马钱子碱的含量

目的:建立镇江橡胶膏中士的宁及马钱子碱含量测定方法.方法:采用HPLC法,色谱柱为Kromasil-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为A-B (11:89)[A为乙腈,B由水-冰醋酸-三乙胺(230:2.4:0.3)组成],检测波长254 nm,流速1.0mL·min-1,柱温30C.结果:士的宁、马钱子碱分别在0.0885～1.327 μg(r=0.9997)、0.0522～0.782 μg(r=0.9960)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.6％、98.2％.结论:该方法准确、快速、重现性好,能有效控制本品质量.     

烘焙法炮制马钱子的工艺研究

目的探索烘焙法代替砂烫法炮制马钱子的可行性。方法采用正交试验方法考察烘焙温度、时间对马钱子中士的宁和马钱子碱含量的影响。结果烘焙法可以明显降低马钱子中士的宁和马钱子碱含量。结论烘焙法代替砂烫法炮制马钱子是可行的。     

HPLC法测定荷瘤小鼠组织中马钱子碱的浓度

目的 建立利用HPLC法测定荷瘤小鼠组织中马钱子碱浓度的方法。方法 以石杉碱甲为内标,采用液-液2次萃取处理小鼠肿瘤、肝、肾、脑、血浆样品。采用Kromasil C18（250 mm×4.6mm,5μm）和汉邦C18预柱（10 mi×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈：0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾的等量混合液(用10％磷酸调pH 2.8)(24：76);检测波长：264 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：35℃。结果 内源性杂质对样品测定无干扰。马钱子碱在50～2000 ng/mL范围内线性关系良好。组织和血浆中马钱子碱的绝对回收率为70.23 ％～99.18％,方法回收率为92.57～108.86％,日内RSD≤9.31％,日间RSD≤8.58％。样品冻融与复溶后稳定性良好。结论 该法快速、灵敏、准确,可用于评价马钱子碱制剂在荷瘤小鼠体内的靶向性分布结果。     

HPLC测定马钱子及其提取物中马钱子碱和士的宁含量

目的采用反相高效液相色谱法建立同时测定马钱子药材及其总碱提取物中马钱子碱和士的宁含量的方法。方法采用Licrospherc18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈：0．01mol／mL庚烷磺酸钠与0．02mol／mL磷酸二氢钾等体积混合溶液（用10％磷酸调pH值为2．8）=27：73,检测波长260nm,柱温30℃,流速为1mL／min。结果马钱子碱在0．1—1．0μg、士的宁在0．12～1．2μg范围内线性关系良好（r=1．000）,平均回收率分别为99．88％（RSD=1．06％）、100．060（RSD=0．78％）。结论本方法操作可靠、精确,可用于中药马钱子药材及提取物的含量测定。     

大鼠马钱子碱中毒肝细胞Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的研究

目的:研究马钱子碱中毒后不同时间段内肝细胞Bcl-2和Caspase-3表达的病理变化。方法:用20只Wistar大鼠为正常对照组,40只Wistar大鼠复制马钱子中毒模型,用免疫组织化学技术对中毒后大鼠肝细胞Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达进行检测,并用图像分析对检测结果进行分析。结果:大鼠在马钱子中毒低、中剂量后的1～7d不同时间段内,肝细胞Bcl-2和Caspase-3蛋白阳性表达数均明显高于正常对照组,中毒组与对照组相比,差异有显著性。结论:Bcl-2和Caspase-3参与了马钱子碱中毒的病理生理过程。