黄芩苷对肝星状细胞iNOS/PUMA信号通路的影响

目的研究黄芩苷通过iNOS/PUMA信号通路促进肝星状细胞凋亡的作用。方法MTT检测细胞增殖抑制率,Western Blot检测iNOS、PUMA蛋白表达,real-time PCR检测PUMA mRNA表达,一氧化氮检测试剂盒检测NO含量,iNOS抑制剂L-NAME预处理后检测细胞增殖抑制率和PUMA表达,Hoechst 33342核染色检测细胞凋亡。结果50 mM黄芩苷引起肝星状细胞活化诱导性死亡;黄芩苷促进肝星状细胞PUMA mRNA、蛋白表达;iNOS抑制剂L-NAME预处理后PUMA表达降低、细胞凋亡减少。结论黄芩苷能通过iNOS/PUMA信号通路促进肝星状细胞凋亡。     

黄芩苷调控活化Toll样受体4/核因子-κB信号通路对复发性流产小鼠的影响

目的:探讨黄芩苷对复发性流产小鼠的影响及作用机制。方法:参照Clark经典模型构建复发性流产小鼠,并将成功构建好的小鼠随机分为模型组和实验组,每组10只;同时建立正常妊娠小鼠模型10只作为对照组。于妊娠第2天,实验组灌胃0.4 mL/mg黄芩苷,模型组和对照组灌胃等量0.9%氯化钠注射液,1次/d,连续干预7 d。酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中激素水平及母胎界面中炎性反应递质水平;免疫组织化学检测小鼠子宫组织巨噬细胞分布情况;蛋白免疫印迹法检测各组小鼠子宫组织活化Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达情况。结果:对照组、模型组和实验组小鼠母胎界面中TNF-α/IL-4为(2.78±0.36),(4.89±0.58)和(3.39±0.34),血清中E 2为(25.16±3.69),(17.56±4.52),(22.36±4.16)ng/L。小鼠子宫组织中分化抗原14(CD14)蛋白相对表达量分别为(9.36±2.34),(68.12±13.52),(33.46±2.85)%,子宫组织中TLR4蛋白表达量为(0.23±0.02),(1.25±0.33),(0.45±0.12),核因子-κB蛋白表达量为(0.59±0.14),(1.52±0.36),(0.78±0.25),MyD88蛋白表达量为(0.63±0.24),(2.34±0.22),(1.26±0.31),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩苷可提高复发性流产小鼠雌激素水平,降低母胎界面中炎性状态,与抑制子宫内膜巨噬细胞浸润,调控TLR4-核因子-κB信号通路活性有关。     

黄芩苷对小肠二糖酶的抑制作用

目的：研究黄芩苷对糖尿病大鼠的降血糖作用及其对大鼠小肠二糖酶的影响。方法：用大鼠小肠刷状缘膜匀浆分析黄芩苷对二糖酶活性的抑制作用;测定黄芩苷对正常小鼠蔗糖负荷糖耐量的影响;观察腹腔注射65mg．kg^-1链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠用黄芩苷100和200mg.kg^-1治疗4周后,蔗糖负荷糖耐量,实验结束后,分析十二指肠、空肠和回肠黏膜中蔗糖酶的活力。结果：黄芩苷对蔗糖酶活性有抑制作用,对麦芽糖酶活性无抑制作用：正常小鼠灌胃给予黄芩苷后,显著降低蔗糖引起的血糖水平升高。糖尿病大鼠灌胃给予黄芩苷周后,黄芩苷显著降低糖尿病大鼠的血糖水平,减缓糖尿病大鼠体重降低的趋势,同时黄芩苷显著降低糖尿病导致的蔗糖酶活力增强。结论：黄芩苷降低血糖的机制之一可能是抑制小肠蔗糖酶的活性。     

HPLC法测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量

目的建立HPLC法同时测定双黄连口服液中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（AgilentZORBAXEclipseXDB-C18,4.6mm×150mm,5Micron）。流动相A：甲醇-水-磷酸（50∶950∶5）,流动相B：甲醇。梯度洗脱程序：0～30,A：95%～35%,B：5%～65%;流速：1ml/min,检测波长327nm。结果绿原酸和黄芩苷的保留时间分别约为10.6、24min,与各自相邻峰的分离度均〉1.5。以峰面积（X）对进样浓度（Y）线性回归,绿原酸回归方程：Y=0.03298X-0.09386,r=0.9999,线性范围5.040～45.36μg·ml^-1。黄芩苷回归方程：Y=0.05155X-1.2864,r=0.9999线性范围：44.88～403.9μg·ml^-1。绿原酸、黄芩苷回收率（n=6）分别为99.6%和100.0%、RSD分别为0.32%和1.0%。结论本方法与2005版中国药典法含量测定结果一致,准确度好且操作简便。     

高效液相色谱法测定菊兰颗粒中黄芩苷的含量

目的 建立以高效液相色谱法测定菊兰颗粒中黄芩苷含量的方法.方法 固定相采用Waters:SymmetryC18色谱柱(3.9mm×150mm,5μm);流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);检测波长:280nm;流速:1.0ml/min.结果 线性范围0.08～0.72μg,r=0.999 6,平均回收率为98.76%,RSD为1.52%(n=9).结论 该方法简单快速,结果可靠,可用于控制菊兰颗粒的质量.     

当归拈痛丸的鉴别及黄芩苷的测定

目的 建立当归拈痛丸的鉴别和含量测定的方法.方法 采用TLC法对处方中的当归、苦参、苍术、葛根、羌活等进行定性鉴别;采用HPLC法测定黄芩中黄芩苷的含量.结果 TLC能检出处方中当归、苦参、苍术、葛根、羌活等;HPLC测定时,黄芩苷0.080～0.401 μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.28%,RSD:1.01%.结论 所建方法准确可靠,能有效控制药品的质量.     

黄芩苷对氧化应激诱导牙龈上皮细胞凋亡的保护作用研究

目的：研究黄芩苷对氧化应激诱导牙龈上皮细胞凋亡的保护作用及其机制。方法采用过氧化氢刺激人牙龈上皮细胞系构建细胞凋亡模型,并应用黄芩苷进行干预,分别检测细胞增殖率,细胞凋亡水平及蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）?糖原合酶激酶?3β（glycogen synthase kinase3β,GSK3β）蛋白表达水平。结果黄芩苷能有效地缓解氧化应激介导的牙龈上皮细胞增殖抑制,缓解凋亡发生,促进Akt?GSK3β信号通路磷酸化水平的提高。结论黄芩苷对氧化应激诱导的牙龈上皮细胞凋亡具有显著保护作用,该作用可能与调控Akt?GSK3β信号通路有关。     

黄芩中四种主要黄酮成分与环氧酶-2的分子对接研究

目的:黄芩中四种主要黄酮与COX-2进行分子对接。方法:采用软件Molegro Virtual Docker(MVD),以选择性COX-2抑制剂SC-558和6COX共结晶复合物作为受体模板,建立COX-2的活性位点,并对黄芩苷等四种黄酮进行分子对接。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素与6COX发生分子对接的MVD分值分别为-121.64KJ/moL、-124.76KJ/moL、-96.11KJ/moL和-96.68KJ/moL。黄芩苷、汉黄芩苷以及SC-558均能作用于以Leu352,Phe518,Gly526,Val523,Ala527和Ser353等氨基酸残基组成的活性位点。结论:黄芩苷等四种黄酮与COX-2能够成功进行分子对接,其对接位点信息有助于该类化合物抑制COX-2的活性机制的阐释。     

黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α和sICAM-1的调节作用

目的 研究黄芩苷对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和可溶性细胞黏附分子1（sICAM-1）的调节作用。 方法 49只SD大鼠随机均分7组,分别为正常对照组（A组）、免疫抑制对照组（B组）、有效药物对照组（C组)、黄芩苷预防组（D组）、黄芩苷低（E组）、中（F组）和高剂量治疗组（G组）。A组不做任何处理,其他各组均于腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠（每次3.5 mg/只,每周2次,连续注射6周),诱导其免疫抑制建立大鼠卡氏肺孢子虫感染动物模型。D组注射地塞米松磷酸钠3周后,灌胃黄芩苷100 mg/(kg?d)连续5周。C、E、F和G组于连续注射地塞米松磷酸钠6周后给药,其中C组灌胃磺胺甲基异恶唑（SMZ）250 mg/(kg?d)和甲氧苄胺嘧啶（TMP） 50 mg/(kg?d),连续2周; E、F和G组分别灌胃黄芩苷100、200和400 mg/(kg?d),均连续2周。B组不给药。各组大鼠均于第8周末摘眼球取血、分离血清,用放射免疫分析法检测TNF-α含量,ELISA法检测sICAM-1含量。同时剖杀大鼠取肺组织制作印片（六胺银染色）和病理切片（HE染色）,观察其病理学变化。 结果 大鼠血清TNF-α含量,黄芩苷预防组［（2．14±0.14） ng/ml］及低［（2.57±0.15） ng/ml］、 中［（1.46±0.14） ng/ml］和高［（1.12±0.13） ng/ml］剂量治疗组均高于正常对照组［（0.70±0.21） ng/ml］（P<0.05）, 低于免疫抑制对照组［（3.65±0.73） ng/ml］（P<0.01）。有效药物对照组［（1.59±0.14） ng/ml］明显高于正常对照组（P<0.01）, 低于免疫抑制对照组（P<0.01）。血清sICAM-1含量, 黄芩苷预防组［（618.68±52.42） pg/ml］及低［（814.29±61.11） pg/ml］、 中［（498.08±32.56） pg/ml］、 高［（377.06±56.56） pg/ml］剂量治疗组均低于免疫抑制对照组［（1 247.39±288.57） pg/ml］（P<0.05）,有效药物对照组［（386.95±44.98） pg/ml］低于免疫抑制对照组（P<0.01）。黄芩苷各治疗组肺组织炎症较免疫抑制对照组明显减轻,肺间质炎性细胞浸润及肺泡腔泡沫样渗出物均明显减少。 结论 黄芩苷能降低PCP大鼠血清TNF-α和sICAM-1含量,减轻肺部炎性反应。     

HPLC法测定妇宁栓中黄芩苷的含量

目的:建立妇宁栓中黄芩苷的含量测定方法.方法:高效液相色谱法,迪马C_(18)(150mm×4.6mm),甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波长为280nm.结果:黄芩苷的峰面积和浓度呈良好的线性关系,线性范围为10.1～80.8μg/ml.回归方程:Y=529.01X 624.99,R=0.9999,平均回收率为99.2%,RSD(%)=0.43%.结论:本方法专属性强、操作简便、结果准确可靠。