改良鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸复合体法转染卵巢癌SKOV3细胞

目的:优化鱼精蛋白-脂质体-寡聚核苷酸(oligodeoxynuleotides,ODN)复合体(1iposome-protamine-ODN,LPD)法以提高SKOV3细胞的转染效率,并探讨该转染法对细胞体外增殖能力的影响.方法:参照文献设计核转录因子-κB(NF-κB)诱捕物ODN和对照物Scrambled ODN,并用FITC标记.LPD表面 /-电荷比例设计为1,2,4,6,并按转染液中是否含有小牛血清分成2组.用荧光光度计、流式细胞仪测定转染效率.用MTT法观察LPD法对SKOV3细胞在体外增殖的影响.结果:SKOV3细胞经LPD法转染, /-电荷比例为4时转染效率最高,达96.41%,而无鱼精蛋白-脂质体的裸露ODN细胞转染效率为12.87%,两者差异有统计学上的高度显著性意义.培养液中10%小牛血清对转染效率无明显影响.结论:适宜电荷比例的LPD法是一种不受血清影响的高效率转染方法,有望用于体内转染.     

两种膜截留分子量超滤及醇沉对清热解毒口服液纯化效果的比较

目的：考察超滤膜截留分子量对纯化效果的影响，并与醇沉法进行比较。方法：采用超滤法(膜截留分子量20000、70000，称之20000膜、70000膜，下同)和乙醇沉淀法纯化清热解毒口服液。以黄芩中黄芩苷、金银花中绿原酸保留率、杂质多糖和鞣质的清除率以及膜通量变化为指标，比较两种膜超滤效果，并与乙醇沉淀法比较。结果：黄芩苷、绿原酸保留率两种截留分子量的膜相差不大．但明显高于醇沉；去除多糖以20000膜最好，其次为70000膜，醇沉最差；去除鞣质以70000膜最好，其次为醇沉，20000膜最差；70000膜膜通量衰减小于20000膜，超滤等量药液所需时间缩短两倍。结论：选择适宜的超滤膜截留分子量可以达到纯化中药的效果。     

鱼精蛋白中和肝素引起致命性肺血管收缩1例

患儿,女,4岁,体质量13.5kg.因先天性房间隔缺损(ASD)在体外循环下行缺损修补术.     

鱼精蛋白抑制血管生成诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨鱼精蛋白治疗恶性肿瘤的治疗机制。方法 :通过建立动物肿瘤模型 ,鱼精蛋白实验治疗 ,结合免疫组化及原位DNA缺口末端标记法 ,检测肿瘤内血管密度和凋亡指数。结果 :实验组血管密度明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,同时观察到瘤细胞凋亡的现象 ,凋亡指数为 (7.6 7± 1.70 ) %。结论 :鱼精蛋白可明显降低肿瘤内血管密度 ,同时诱导细胞凋亡 ,治疗效果来自抑制血管生成和诱导瘤细胞凋亡的作用     

心内直视手术中鱼精蛋白毒性反应的发生及处理

目的分析心内直视手术中鱼精蛋白毒性反应发生情况、临床特点，探讨处理措施。方法2001年1月～2006年1月，连续行1163例心内直视手术中发生鱼精蛋白毒性反应31例，其中轻度反应（血压下降〈30mmHg）26例，中度、重度反应（中度反应血压下降30～49mmHg，重度反应血压下降≥50mmHg）5例；低血压型28例，过敏反应／类过敏反应型2例，肺血管收缩型1例。所有患者均给予立即停止使用鱼精蛋白或减慢鱼精蛋白泵入速度、补充血容量、抗过敏、血管活性药物或再次体外循环治疗。结果26例出现轻度鱼精蛋白毒性反应者经停止使用或减慢鱼精蛋白泵入速度及相应治疗后，均很快好转；5例出现中度、重度鱼精蛋白毒性反应者，经停止使用鱼精蛋白、抗过敏、补充血容量、血管活性药物和再次体外循环支持，4例好转，1例死亡。27例门诊随访3个月，恢复正常学习和工作。结论心内直视手术中鱼精蛋白毒性反应发生率高，中度、重度反应者死亡率高。鱼精蛋白毒性反应的发生与其用量和使用方法密切有关，充分认识鱼精蛋白毒性反应的临床特点，精确鱼精蛋白用量和改进使用方法能在一定程度上防治毒性反应的发生。     

皮下注射精蛋白合成人胰岛素(预混30R)致不良反应5例

精蛋白合成人胰岛素注射液(预混30R)因其疗效好、用法简单、不良反应少,可减轻胰岛素抵抗而在临床上广泛使用.但在治疗中仍有发生不良反应的病例.收集2000-2006年使用精蛋白合成人胰岛素注射液(预混30R)治疗时发生不良反应的5例2型糖尿病患者的临床资料,对其进行分析和讨论,以指导今后更合理地用药.     

麦芽凝集素沉淀法检测骨碱性磷酸酶同工酶及应用

目的：应用麦芽凝集素（WGA）沉淀法检测骨碱性磷酸酶同工酶（B－ALP）水平，并探索B－ALP与骨矿含量的相关性。方法：建立维生素D和钙缺乏所致的佝偻病动物模型，测定骨矿含量和血清钙、磷、25－OHD3、总碱性磷酸酶（T－ALP）水平；采用WGA沉淀法检测不同生长阶段大鼠血清中的B－ALP活性。结果：血清B－ALP在佝偻病组明显升高，且出现时间较T－ALP早；B－ALP与同期骨矿含量呈显著负相关。结论：血清B－ALP活性是反映成骨细胞功能更为敏感和可靠的指标。     

心脏手术中鱼精蛋白不良反应及其处理

鱼精蛋白自1939年首次应用以来,已被广泛用于心脏外科手术,是目前体外循环手术中惟一有效拮抗肝素的药物,但对其不良反应的严重程度尚未引起足够的重视。我科自1997年以来发现鱼精蛋白不良反应共7例,其中2例为严重毒性反应,经抢救,1例存活,1例死亡,其余5例均为过敏性反应。现报告如下。1　临床资料例1,男性,20岁,在体外循环下行三尖瓣乳头肌重建、三尖瓣成形术,术中顺利。停机后经主动脉缓慢注射鱼精蛋白时,突然出现心跳缓慢,心脏膨胀、收缩无力,血压下降至1.2kPa。即刻停止注射,给予心内按压、静推肾上腺素1mg无效。再次肝素化,右房插管转…     

关于开展玻片离心沉淀法进行临床脑脊液细胞学检查的呼吁

脑脊液细胞学的检查和临床应用虽已开展了百余年,由于一般脑脊液中的细胞数量很少,以及细胞收集器械的制作和检查方法上的滞后,前半个世纪一直停滞在应用古老的血细胞计数板进行简单而不精确的检查方法,严重地影响了该项检查的发展和临床应用.