高压氧预处理对脊髓神经元氧化损伤中超氧化物歧化酶和血红素氧合酶-1的影响

目的 研究高压氧(HBO)预处理诱导脊髓神经元氧化耐受的机制.方法 取胚胎小鼠脊髓行原代神经元培养,分为正常对照组和HBO预处理组(HBO组).利用Westem Blot、RT-PCR等方法,观察HBO预处理对脊髓神经元抗氧化酶水平的影响.结果 HBO预处理前后超氧化物歧化酶(SOD)表达无统计学差异,血红素氧合酶(HO-1)在处理后表达增多.行RT-PCR检测HBO处理前后HO-1 mRAN水平,发现在预处理后4 h开始明显增多,处理后8 h表达达到高峰,直至处理后24 h其表达量仍比预处理前高.结论 HBO预处理对脊髓神经元氧化损伤的保护作用可能与诱导HO-1表达有关.     

蛋白激酶Cγ基因在脊髓背角跨器官敏化调控中的作用及其机制

目的 探索在内脏高敏感状态下,跨器官敏化模型鼠脊髓背角蛋白激酶(PKC)γ基因表达的改变并探索其与内脏痛敏程度之间的相关性,寻求调控跨器官敏化的新靶点.方法 采用鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合结直肠芥子油(MO)灌注的方法建立跨器官敏化大鼠模型.30只SD大鼠随机分为:正常对照组(A组,n=7);跨器官敏化模型组(B组,n=8),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注;OVA+MO+生理盐水对照组(C组,n=7),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射生理盐水10μl;OVA+MO+PKCγ特异性抑制剂(GF109203X)组(D组,n=8),OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射GF109203X 10μl.采用免疫荧光染色技术及Western blotting检测各组大鼠脊髓PKCγ的表达情况,并探讨PKCγ表达与内脏痛敏程度之间的关系.结果 免疫荧光染色结果显示,跨器官敏化模型组大鼠L4-6脊髓背角组织PKCγ蛋白表达量(98.99±7.73)明显多于正常对照组(56.14±6.22,P<0.05);而鞘内注射GF109203X的D组大鼠PKCγ表达量显著降低,明显低于鞘内注射生理盐水的C组(56.83±7.07 vs 89.59±9.90, P<0.05).Western blotting检测结果也显示,B组大鼠L4-6脊髓背角组织中PKCγ的表达量(1.538±0.228)与A组(1.065±0.064)相比显著增加(P<0.001);D组大鼠PKCγ表达量(1.124±0.169)与C组大鼠(1.605±0.224)比较则显著降低(P<0.001).结论 采用OVA基础致敏联合MO结肠灌注可成功建立跨器官敏化大鼠模型,脊髓背角组织中PKCγ参与了跨器官内脏痛敏信号的传递,在跨器官敏化的产生和维持中发挥了重要作用.     

乳头状胶质神经元肿瘤的影像学特点(4例报告并文献复习)

目的 探讨乳头状胶质神经元肿瘤(papillary glioneuronal tumor,PGNT)的影像学特点及诊断价值.资料与方法 结合文献回顾性分析4例PGNT患者的临床、影像和病理学资料,重点分析其发生部位、肿块形态、密度(信号)及病理学特征.结果 4例PGNT均位于大脑半球,其中2例位于颞叶;1例主要位于皮层区,其余3例均累及皮层下白质并邻近侧脑室.肿瘤大小不等,最大径1.1～7.8 cm,2例占位效应明显,3例病变周围可见轻度水肿;肿瘤边界清楚,2例呈囊带壁结节样肿块,1例呈实性肿块,1例呈囊性肿块;病变实性部分CT呈稍低密度或等密度,其中1例可见钙化,MRI呈稍长T1、稍长T2信号,其中1例呈长T1、混杂T2信号,DWI呈等信号或稍高信号,增强扫描呈明显强化;病变囊性部分CT呈低密度,MRI呈长T1、长T2信号,DWI呈稍低信号或低信号,增强扫描呈环状强化或无强化;镜下均见特征性假乳头状结构.结论 临床表现为头痛或癫痫发作的青年患者,影像学检查发现幕上脑实质内边界清楚的囊实性肿块,尤其是囊带壁结节样肿块,应考虑到PGNT的可能.     

内侧颞叶癫痫皮层下核团改变的MR磁敏感加权成像研究

目的 采用MR磁敏感加权成像(susceptibility weighted imaging,SWI)技术,研究内侧颞叶癫痫(mTLE)患者基底节、丘脑、脑干等区域铁物质含量的改变,揭示皮层下核团在mTLE病理生理机制中的作用.资料与方法 13例临床诊断的mTLE患者及相同数目年龄、性别匹配的正常自愿者参与了本研究,SWI数据采集在Siemens Magnetom Trio 3.0 T下进行.采用基于体素分析的方法(voxel-based analysis,VBA)比较病例组与正常对照组皮层下灰质核团信号的差异(P<0.05,联合强度与范围校正).结果 与正常对照组相比,mTLE患者双侧基底节、丘脑及脑干磁敏感信号明显降低,并且基底节、丘脑等区域的SWI信号与癫痫发病时间呈明显负相关.结论 皮层下灰质核团SWI信号的改变反映其铁含量发生改变,提示其在颞叶癫痫发生发展过程中起到重要作用.SWI可能成为一种新的应用于颞叶癫痫皮层下核团改变的研究手段.     

肿瘤坏死因子及中性粒细胞在脊髓继发性损伤中的作用

目的 探讨炎性反应对脊髓损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 健康Wistar大鼠48只。随机分为2组，实验组与对照组。采用Allen法挫伤大鼠T10节段脊髓，于术后1、8h和1、2、3、7d取材。检测肿瘤坏死因子（TNF）与髓过氧化物酶水平的变化。结果 实验组肿瘤坏死因子与髓过氧化物酶水平均明显升高（P〈0．01）。结论 中性粒细胞及TNF-α参与了脊髓继发性损伤，并可能是触发迟发性神经元凋亡的重要因素之一。     

成人骨髓间充质干细胞的培养及其向神经元样细胞诱导分化的实验研究

目的探讨在体外诱导成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的方法。方法采用梯度离心法和全骨髓法,利用含血清的DMEM培养基培养成人骨髓间充质干细胞,以β-巯基乙醇诱导其向神经元样细胞方向分化。应用免疫细胞化学技术对培养细胞及其分化细胞进行鉴定。结果骨髓细胞培养至第10d时,全骨髓法收获的细胞数为(1.73±0.44)×107/ml,而梯度离心法收获的细胞数为(7.65±0.52)×107/ml,其差异有统计学意义(P<0.01);但两种方法所得细胞的生物学特性没有差别。骨髓间充质干细胞经β-巯基乙醇诱导后细胞形态发生改变,伸出突起并交织成网;免疫细胞化学法检测显示54.76%±3.65%的细胞表达神经元特异性蛋白NSE,同时36.28%±4.27%的细胞表达神经胶质细胞特异性蛋白GFAP。结论梯度离心法较全骨髓法收获细胞数量大。在体外条件下,利用β-巯基乙醇和适宜的培养液可使骨髓间充质干细胞定向分化为神经元。     

杜仲对糖尿病大鼠扑捉行为和阴茎组织神经传导通路的影响

目的:探讨杜仲改善勃起功能的药效和病理学机制。方法:雄性糖尿病(DM)大鼠30只随机分为3组:A组(10只,DM大鼠赋形剂灌胃组)、B组(10只,DM大鼠西地那非灌胃组)、C组(10只,DM大鼠杜仲灌胃组)及10只正常对照组大鼠(赋形剂灌胃,D组);灌胃4周后观察4组大鼠扑捉行为,透射电镜检查阴茎组织有髓神经纤维超微特征;用免疫组化二步法显示阴茎组织中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。结果:与A组比较,C组大鼠扑捉次数显著增多(P<0.05),阴茎组织中nNOS表达显著增强(P<0.001)。透射电镜显示:A组大鼠阴茎组织有髓神经纤维排布失序,部分变性、板层分离形成透明空泡或网络状,C组大鼠有髓神经纤维排列规整,板层结构清晰。结论:杜仲可通过减轻有髓神经的损伤、增强阴茎组织中nNOS表达改善ED。     

生长激素对大鼠海绵体神经移植后再生的影响

目的:研究腓肠神经移植替代损伤的双侧海绵体神经(CN)后,生长激素(GH)对大鼠勃起功能恢复的影响。方法:24只雄性SD大鼠(3~4个月,300~400 g)随机均分为2组:神经移植组(腓肠神经移植替代损伤的双侧CN);GH组(神经移植后皮下注射GH)。2个月及4个月后,CN电刺激检测大鼠阴茎勃起功能,免疫组化SP法检测阴茎海绵体内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)神经纤维并图像分析计算阳性像素值。结果:2个月后GH组有31.25%CN对电刺激有勃起反应,较神经移植组0%差异有显著性(P<0.05),nNOS阳性神经纤维的像素值在GH组为38 971±7 692,而神经移植组为16 538±3 179,差异同样具有显著性(P<0.05);而4个月后GH组有75%的CN对电刺激有勃起反应,神经移植组43.75%的CN有反应,差异无显著性(P>0.05);nNOS阳性神经纤维的像素值分别为91 348±18 965,79 276±12 021,差异亦无显著性(P>0.05)。结论:GH能促进CN移植后的再生,有利于盆腔根治性手术后勃起功能的恢复。     

环化酶激活剂对大鼠感觉神经元保护作用的实验研究

目的探讨环化酶激活剂（前列腺素E1、腺苷及Zn^2＋离子）对周围神经损伤后感觉神经元的保护作用.方法在大鼠坐骨神经夹毁模型术后21 d,取背根节用图像分析法观测前列腺素E1（PGE1）、腺苷（Ade）和高Zn^2＋饲料（Zn^2＋）对背根节细胞数、核偏心率及核等圆径的影响,并与人胎盘神经生长因子（hNGF）的作用相比较.结果NGF及环化酶激活剂组与夹毁对照组相比都能增进背根节细胞的存活和减轻核偏移（P＜0.05）;NGF组和高Zn^2＋饲料组在背根节细胞存活数、核偏心率及核等圆径方面与假手术组无差别（P＞0.05）.结论PEG1、Ade及Zn^2＋离子等环化酶激活剂对DRG神经元均有保护作用,其中Zn^2＋离子的保护效应与NGF无差别.     

异丙酚对大鼠海马神经元NMDA受体通道电流的影响

目的 研究异丙酚对大鼠海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体通道电流的影响。方法 体外培养新生Wistar大鼠海马神经元8—12d，采用全细胞膜片钳技术和压力喷射给药方式，钳制电压为-80mV，记录3、48μg∥ml异丙酚对100μmol／LNMDA诱发NMDA受体通道电流的影响；然后用7-氨基丁酸（GABA）受体拮抗剂荷包牡丹碱100μmol／L阻断GABA．受体，观察3、48μg／ml异丙酚对NMDA受体通道电流的影响。结果 3、48μg／ml异丙酚抑制自发兴奋性突触后电流并直接激动GABA．受体，使Cl．内流，产生外向超极化的GABA电流，从而间接抑制NMDA受体通道电流。用荷包牡丹碱100μmol／L阻断GABA．受体后，3、48μg∥ml异丙酚仍可抑制100μmol／LNMDA诱发的NMDA受体通道电流（P〈0．05）。结论 异丙酚通过激活GABA．受体影响NMDA受体通道电流，对NMDA受体通道也有直接抑制作用。