高效液相色谱法测定复方盐酸阿米洛利血药浓度

目的建立一种反相高效液相色谱法同时测定血浆中阿米洛利和氢氯噻嗪浓度。方法样品处理采用蛋白沉淀法。色谱条件:Lichrispher C18,粒径5μm,4.6 mm×150 mm;流动相为乙腈:水:三乙胺(10∶160∶1),用磷酸调pH至2.8,流速为1.5 ml/min,柱温30℃;阿米洛利采用荧光检测,激发波长368 nm发射波长415 nm。氢氯噻嗪采用紫外检测,波长271 nm。结果阿米洛利线性范围0.5～20μg/L(r=0.999 7),最低检测浓度为0.5μg/L,批内、批间的相对标准偏差值(RSD)皆<10%。氢氯噻嗪线性范围在30～1200μg/L(r=0.999 8)最低检测浓度为30μg/L,批内、批间的RSD皆<10%。结论本法具有操作简便,分析快速准确、干扰小等特点。可用于测定阿米洛利及氢氯噻嗪的体内药代动力学研究。     

二甲基阿米洛利对高转移性肺癌细胞侵袭能力的影响及其作用机制

目的:研究二甲基阿米洛利(dimethyl amiloride, DMA)对人高转移性肺癌PGCL3细胞体外侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肺癌PGCL3细胞经DMA处理后,用Transwell小室法检测其对细胞侵袭和运动能力的影响,发色底物法检测DMA对细胞分泌的尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, uPA)和纤溶酶原激活物抑制剂1(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)活性的影响,RT-PCR检测DMA对细胞uPA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor, uPAR)和PAI-1 mRNA表达的影响,Western印迹法检测细胞外调节蛋白激酶2(extracellular regulated protein kinases 2,ERK2)和ras蛋白表达的变化.结果:DMA能抑制PGCL3细胞的体外侵袭和运动能力,下调uPA、uPAR和PAI-1的mRNA表达,上调ras蛋白的表达;高浓度时DMA可降低细胞分泌的uPA活性,但对分泌型PAI-1活性和ERK2蛋白表达无影响.结论:DMA能抑制高转移性肺癌PGCL3细胞的侵袭和运动,其作用机制可能与抑制uPA系统的表达有关.     

uPA合成抑制剂阿米洛利对卵巢癌细胞迁徙、侵袭能力的影响

目的探索urokinase-type plasminogen activator(u PA)合成抑制剂阿米洛利(氨氯吡咪,Amiloride)在卵巢癌细胞迁徙、侵袭过程中的作用。方法检测阿米洛利处理后卵巢癌细胞OVCAR3的迁徙及侵袭能力变化,RT-RCR及Western Blotting检测u PA表达水平变化。结果卵巢癌细胞OVCAR3经阿米洛利处理后u PA m RNA及蛋白表达水平及细胞迁徙、侵袭能力显著下降,且呈浓度依赖性。结论 u PA合成抑制剂阿米洛利可能通过下调u PA表达水平抑制卵巢癌细胞迁徙及侵袭,是一种潜在的抑制卵巢癌发展的药物。     

阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将雄性Wistar大鼠54只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、阿米洛利组(A组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min3个时点处死6只大鼠,留取血浆和右肺组织,测定肺组织湿干质量比值(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,肺组织中细胞凋亡指数(AI)及血清丙二醛(MDA)含量,并进行肺组织病理学检查。结果再灌注期间IR组肺组织W/D、MPO活性、AI、血清MDA均升高,而预先给予阿米洛利干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的升高。肺组织病理学检查显示阿米洛利预先给药减轻肺缺血再灌注损伤。结论阿米洛利对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润及细胞凋亡有关。     

正常人口服阿米洛利片剂的药物动力学

阿米洛利(氨氯吡咪,amiloride,1)是一种保钾排钠的利尿药,具有利尿降压作用,临床上用于肝腹水、心衰及高血压病人。我们应用英国产的1片剂,研究其在正常中国人体内的药物动力学,可供国内合理使用该药参考。材料与药品     

大黄虫丸联合复方盐酸阿米洛利治疗肝硬化腹腔积液12例

目的：总结使用大黄虫丸联合复方盐酸阿米洛利治疗肝硬化腹腔积液的疗效与经验。方法：选取12例肝硬化腹腔积液患者,在常规保肝、降酶、利尿的基础上加用大黄虫丸联合复方盐酸阿米洛利,1个月为1个疗程,共观察治疗2～3个月。结果：治疗结束根据疗效评定标准判断,显效7例,占58%;有效3例,占25%;无效2例,占17%;总有效率为83%。结论：临床上将两种药物联合使用,可以明显改善肝硬化腹腔积液患者的腹腔积液的消退与临床症状的改善,且价格适宜、疗程短、疗效确切,临床值得推广。     

Amiloride通过抑制缺氧诱导的NHE1表达而延缓calpain介导的ABCA1降解

目的:研究缺氧对钠氢交换体1(NHE1)表达、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和钙蛋白酶(calpain)活性的影响,探讨NHE1抑制剂阿米洛利(amiloride)对ABCA1降解的影响以及与calpain相关的机制。方法:RAW264.7细胞缺氧0、12、24和48 h。MTT法检测细胞活力,real-time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[Ca2+]i,荧光素法检测细胞内calpain活性。进而,经缺氧24 h处理的细胞,cycloheximide干预条件下,NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h,检测ABCA1蛋白含量。最后,给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h,检测ABCA1含量及calpain活性。结果:缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调,增加[Ca2+]i及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解,而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量,降低calpain活性。结论:Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解,提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。     

血小板活化因子诱导血小板P-选择素表达及相关信号传导机制(英文)

目的:研究PAF诱导P-选择素表达的细胞内信号机制。方法:置备人血小板悬液,用流式细胞术测定PAF诱导的P-选择素表达。结果:用依他酸2mmol·L~(-1)和BAPTA200μmol·L~(-1)分别阻断外钙内流和络合内钙,显著抑制PAF诱导的P-选择素表达[13.3±0.9)％;(16.8±1.9)％ vs PAF对照组(47.5±1.3)％,P<0.01]。用阿米洛利400μmol·L~(-1)抑制Na~ /H~ 交换,Genistein 300μmol·L~(-1)抑制蛋白酪氨酸磷酸化也均可抑制PAF引起的P-选择素上调[(37.5±2.1)％;(29±4)％ vsPAF对照组(47.5±1.3)％,P<0.01)]。结论:蛋白酪氨酸磷酸化,细胞内钙动员及Na~ /H~ 交换激活中介PAF诱导的血小板P-选择素表达。     

替米沙坦与复方盐酸阿米洛利联合氨氯地平治疗高血压合并左室肥厚的疗效观察

目的探讨在高血压合并左室肥厚治疗中采用氨氯地平联合替米沙坦或复方盐酸阿米洛利的治疗效果。方法选取高血压合并左室肥厚患者84例为观察对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各42例,2组均给予氨氯地平治疗,对照组加用复方盐酸阿米洛利,观察组加用替米沙坦,观察2组患者治疗效果、降压效果、心室改善效果及不良反应发生情况。结果观察组治疗总有效率为90%,对照组为93%,2组比较差异无统计学意义(P0.05);2组患者治疗后血压均明显下降,但治疗后2组间比较无明显差异(P0.05),2组患者治疗后LVPWT、IVST及LVMI均明显低于治疗前(P均0.05),但治疗后2组比较差异不明显(P均0.05),观察组用药后不良反应发生率为12%,对照组为24%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论氨氯地平同复方盐酸阿米洛利或替米沙坦联合治疗高血压合并左室肥厚均具有较好治疗效果,能有效控制血压,改善心室结构与心肌功能,但氨氯地平联合替米沙坦不良反应发生率较低,安全性更高,值得推广运用。     

阿米洛利抑制脂多糖诱导的足细胞活动力

目的观察阿米洛利对脂多糖诱导的足细胞活动力的影响,并探讨其机制。方法足细胞分为3组:正常对照组,脂多糖组(50mg·L~(-1)脂多糖诱导损伤足细胞24h),脂多糖+阿米洛利组(50 mg·L~(-1)脂多糖与50 mg·L~(-1)阿米洛利共同作用于足细胞24h)。利用免疫荧光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR、转板迁移实验、划痕实验等技术,检测足细胞uPAR蛋白和Plaur mRNA的表达情况以及足细胞活动力的改变。结果脂多糖组足细胞uPAR蛋白及PlaurmRNA的表达均高于正常对照组和脂多糖+阿米洛利组(P<0.05),正常对照组和脂多糖+阿米洛利组无显著差异(P>0.05)。转板迁移、划痕实验中脂多糖组每个视野足细胞数[(324±15),(43±7)个]高于正常对照组[(249±10),(15±5)个]和脂多糖+阿米洛利组[(274±8),(18±6)个](P<0.01),正常对照组和脂多糖+阿米洛利组无显著差异(P>0.05)。结论阿米洛利可能通过抑制uPAR的表达,降低足细胞活动力,起到稳定、保护足细胞的作用。