甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定

目的：从大容量甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma,MTC）人源噬菌体单链抗体（single chain variable fragments,scFv）库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法：分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性scFv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450 nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度svFv反应并读取A490 nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率。结果：5轮筛选后,抗体得到了明显富集。随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA 和scFv ELISA阳性率分别为65%和50%。SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 kD左右。ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度（0.41±0.12）较SW 480细胞组（0.20±0.03）、TEC细胞组（0.13±0.01）、PBS空白对照组（0.07±0.01）明显增加（P=0.000）。MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在scFv浓度为0.1、1、10 μmol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=0.006;t=7.324,P=0.000,且在scFv浓度为10 μmol /L时,对TT细胞的抑制率最高（0.59±0.15）％。结论：利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体。     

中药材GAP研究与实施的整体观

GAP是一个复杂的系统 ,本文论述了源 库理论、化学调控及其它多学科领域对中药材产量和质量提高方面的重要意义 ;从整个生产过程与经济效益的关系 ,提出了规范化栽培和研究的重要性 ;在质量分析方面 ,提出了影响因素的整体观     

顺式阿曲库铵的临床药理学研究进展

顺式阿曲库铵(cisatracurium)是阿曲库铵的10种同分异构体之一,为顺式旋光异构体。它是近年来开发的一种新型的中时效非去极化肌松药,肌松强度约为阿曲库铵的4~5倍,而代谢产物N-甲基罂粟碱的生成量仅是阿曲库铵的1/10。顺式阿曲库铵具有作用强、毒性小、恢复迅速、代谢不依赖器官功能状态、对心血管影响小的特点,最接近理想的肌松药,目前已安全的应用于临床麻醉。为了拓展其在临床不同领域的     

癌痛通腑汤联合多库酯钠片治疗阿片类药物所致便秘30例临床观察

根据WHO癌痛三阶梯止痛原则,中重度癌痛均采用阿片类药物止痛,但阿片类药物最顽固、持久的不良反应是便秘,发病率达80％～90％。带给患者极大的痛苦。2012年3月～2013年5月期间,笔者应用癌痛通腑汤联合多库酯钠片治疗阿片类止痛药物所致便秘患者30例,取得较好的疗效,现报道如下。     

肌松药对新生儿及婴儿腹腔镜手术操作空间的影响

目的观察新生儿及3个月以内婴儿腹腔镜手术中,使用肌松药对手术操作空间的影响。方法将40例腹腔镜手术患儿,随机分为对照组（Ⅰ组）和肌松组（II组）,每组各20例,分别予5mmHg和10mmHg气腹压力建立人工C02气腹,并记录气腹前、5mmHg及10mmHg气腹压力下两组患儿腹围的变化。结果气腹前Ⅰ组腹围（31．90±2．15）cm,Ⅱ组腹围（32．25±2．37）cm,t=0．489,P=0．628,两组腹围比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;气腹压力5mmHg时,Ⅰ组腹围（33．98±2．27）cm,Ⅱ组腹围（35．61±2．52）cm,t=2．150,P=0．038,Ⅱ组腹围值高于Ⅰ组（P〈0．05）。气腹压力10mmHg时,Ⅰ组腹围（35．13±2．34）cm,Ⅱ组腹围（36．95±2．53）cm,t=2．364,P=0．023,Ⅱ组腹围值亦高于Ⅰ组（P〈0．05）。结论在相同气腹压力下,肌松药的使用可有效增加腹腔容积,从而降低对CO2气腹压力的需求,并进一步降低CO2气腹对呼吸循环功能的影响。     

MMP-2、TIMP-2、Ki-67在库肯勃氏瘤中的表达及意义

目的 :探讨MMP 2、TIMP 2、Ki 67表达与库肯勃氏瘤病理生物学行为的关系。方法 :采用免疫组化SP法对 32例库肯勃氏瘤组织和 10例正常卵巢组织进行MMP 2、TIMP 2和Ki 67表达的检测。结果 :MMP 2、TIMP 2、Ki 67在库肯勃氏瘤组织中的表达量显著高于正常卵巢组织 (P <0 .0 1)。有合并转移的库肯勃氏瘤中MMP 2、Ki 67高于无合并转移者 (P <0 .0 5 ) ,TIMP 2低于无合并转移者 (P <0 .0 5 )。MMP 2、Ki 67与术后生存时间呈负相关 (P <0 .0 1) ,TIMP 2与术后生存时间呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 :MMP 2、TIMP 2、Ki 67在库肯勃氏瘤发生、发展中起重要作用 ,可作为判断卵巢转移癌恶性程度、临床分期和评估预后的临床参考指标     

用LC-MS法测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度

目的 建立高效液相色谱串联质谱方法（LC-MS）测定人血浆中顺式阿曲库铵的浓度,并应用于临床治疗药物监测。方法 采用盐酸普罗帕酮同位素内标,样品经2%甲酸水和含内标的乙腈溶液沉淀蛋白处理。HPLC色谱柱为Agilent SB-C₁₈,柱温35 ℃,流速0.3 ml/min,流动相为0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测阿曲库铵m/z 464.6~358.4,盐酸普罗帕酮（内标）m/z 342.2~116.2。结果 人血浆中顺式阿曲库铵在该条件下分离良好,在2~500 ng/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.996 5）,定量下限为2 ng/ml。方法日内精密度RSD<16.0%;日间精密度RSD<6.0%。平均回收率为97.63%~111.93%;血浆样品室温放置4 h,-80 ℃放置14 d,处理后室温放置24 h,稳定性良好。结论 本方法简便、准确、快速、稳定,适用于顺式阿曲库铵的血药浓度测定。     

不同剂量顺阿曲库铵应用于非青光眼眼科手术患者对其全身麻醉诱导期眼内压的临床疗效观察

目的 探究非青光眼眼科手术患者应用不同剂量顺阿曲库铵麻醉阻滞对其全身麻醉诱导期眼内压的临床疗效,为临床提供参考。方法 选取2020年2月至2022年1月河北省眼科医院收治的108例非青光眼患者作为研究对象进行回顾性分析,根据患者术中顺阿曲库铵使用剂量的不同,将应用2倍95%有效药物剂量[ED-(95)]的36例患者纳入2倍组,将应用3倍ED-(95)的36例患者纳入3倍组,将应用4倍ED-(95)的36例患者纳入4倍组。术中待脑电双频指数(BIS)稳定在45～55范围内时,给予各组机械通气,依次给予2倍组、3倍组、4倍组患者顺阿曲库铵0.10、0.15、0.20 mg/kg。之后采取肌松监测,4个成串刺激(TOF)值均降至0时置入喉罩进行机械通气,各组均采用芬太尼1.5～2 μg/kg,术中维持麻醉使用七氟烷吸入。比较两组患者不同时间点的血流动力学指标水平[心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)]、眼内压(IOP)以及患者的手术情况(自主呼吸恢复用时、意识恢复用时、肌力恢复用时)。结果 BIS稳定于45～55(T₁)、4个TOF值均降至0(T_2...     

药物开发的新策略:并联有机合成及库筛选

药物开发的新策略：并联有机合成及库筛选王德心（中国医学科学院、中国协和医科大学药物研究所北京１０００５０）近几年随着分子生物学、计算机辅助分子模型分析（ＣＡＭＭ）与药物化学的密切配合，使构效关系（ＳＡＲ）研究及合理的药物设计（ｒａｔｉｏｎａｌｄｒｕｇ...     

高效动态配置护理一线人力资源模式的探讨

目的 探讨动态配置护理一线人力资源在临床护理中的应用效果。方法 选取四川大学华西医院上锦医院32个护理单元的临床护士为研究对象,对2018年1—12月实施临床一线护理人力资源动态配置管理模式前计为“实施前”,2019年1—12月开始实施临床一线护理人力资源动态配置管理模式计为“实施后”,统计实施前后各护理单元床位使用情况、护理人员休假人数,按实际业务量匹配一线护理人力资源,每月进行均衡动态配置调整,比较实施动态配置护理人力资源管理前后护理管理质量评分、护士对护理工作满意度评分及护士离职率。结果 实施临床护理单元护士人力资源动态配置后,四川大学华西医院上锦医院护理管理质量评分总分由（89.375±11.251）分提升至（97.016±3.200）分,差异有统计学意义（P<0.05）;护士工作满意度评分中管理评分、工作负荷评分等6个维度评分均高于实施前,差异有统计学意义（P<0.05）;护士离职率从7.32%降至3.26%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 业务量客观指标可作为动态调配护理人力资源的重要依据,通过建立机动人才库动态调整各护理单元护理人员配置数量;通过...