胎儿肠道Cajal间质细胞的发育

目的:研究胎儿肠道Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)分布及发育情况. 方法: 搜集中止妊娠3～8 mo胎儿标本12份,采用酪氨酸激酶受体(c-kit)抗体免疫组织化学方法标记胎儿肠道ICC. 结果: ①ICC分布于肠肌间神经丛、纵肌和环肌层面;②不同胎龄胎儿标本,不同层面ICC分布存在差异,随胎龄增加,ICC数目增多;③ICC的呈现按一定时间顺序,肠肌间神经丛,ICC呈现最早,肌内次之,深肌丛较晚;④ICC胞体逐渐增大,足突延长并互相连接,形成细胞间网络结构. 结论: 胎儿肠道ICC主要分布肠肌间神经丛周围,不同胎龄ICC分布及发育存在差异,不同层面ICC分布不同,随着胎龄增加,ICC数目增多,逐渐形成网络结构.     

MST1重组腺病毒的制备及对人子宫内膜间质细胞蜕膜化的作用

目的:探讨丝/苏氨酸激酶MST1在人子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中的作用。方法:制备Ad-FLAG-MST1重组腺病毒,用于感染人子宫内膜间质细胞;采用荧光定量PCR实验结合腺病毒介导的MST1基因过表达,分析人子宫内膜间质细胞蜕膜化进程中MST1的表达及其对蜕膜化特异性基因的调控。结果:获得滴度为2×1011ifu/ml的重组Ad-FLAG-MST1腺病毒,该腺病毒感染人子宫内膜间质细胞后,可高水平表达FLAG-MST1融合蛋白,过表达的MST1显著增加人子宫内膜间质细胞中PRL、IGFBP1、TIMP3和DCN等蜕膜化特异性基因的表达;体外培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP(0.5mmol/L)和MPA(1μmol/L)刺激后,细胞中MST1总蛋白水平增加3倍以上,同时磷酸化的MST1(Thr183)显著增加。结论:MST1的活化可能参与子宫内膜间质细胞的蜕膜化相关基因的调控。     

上皮细胞间质转型调控胰腺癌侵袭转移的分子机制

上皮细胞间质转型(EMT)以上皮细胞表型的缺失和问质特性的获得为主要特征.EMT增加细胞迁移、侵袭和抗凋亡能力,在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用.钙黏素转换、生长因子、转录因子、microRNA和信号通路等在EMT调控胰腺癌侵袭转移中发挥重要作用.     

人子宫内膜细胞中 miRNAs 的表达及功能分析

摘要： 目的 探索微小 RNAs （miRNAs, miR） -125b、 miR-30b 和 miR-424 在子宫内膜中的表达及功能。方法 收 集自然周期患者（增殖期和分泌期）和促排卵周期患者（高孕组和非高孕组）的子宫内膜标本, 体外分离培养子宫内 膜上皮细胞和间质细胞, 并用免疫荧光验证。实时定量 PCR 检测 miR-125b、 miR-30b 和 miR-424 的表达。结果 增 殖期, 间质细胞中 miR-125b、 miR-30b 和 miR-424 的表达高于上皮细胞; 分泌期, 间质细胞中 miR-125b 和 miR-424 的表达仍高于上皮细胞, 而 miR-30b 的表达低于上皮细胞。上皮细胞中, 分泌期 miR-125b、 miR-30b 和 miR-424 的 表达显著高于增殖期, 而间质细胞中 3 种 miRNAs 的表达差异无统计学意义。HCG 日高孕组上皮细胞中 miR-125b 的表达高于非高孕组, 间质细胞中 miR-30b 的表达高于非高孕组。miR-125b、 miR-30b 和 miR-424 的靶基因功能 分析发现, 其涉及的生物过程主要有细胞迁移、 运动、 细胞间黏附连接等, 主要富集的信号通路包括胰岛素信号通 路、 VEGF 信号通路、 MAPK 信号通路、 焦点黏附和 Wnt 信号通路。结论 miR-125b、 miR-30b 和 miR-424 在子宫内 膜不同细胞类型、 不同时期和 HCG 日高孕酮患者中的表达存在差异, 可能参与子宫内膜容受性的调节。     

Notch1蛋白在人心脏瓣膜间质细胞凋亡与钙化关系中的作用

目的用人心脏瓣膜间质细胞(hVICs)在体外培养并用钙化诱导液建立瓣膜钙化模型,观察hVICs钙化过程中Notch1蛋白表达及细胞凋亡情况,探讨Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中的作用。方法将体外培养的hVICs随机分为两组,钙化组用含钙化诱导液的培养基培养,以建立钙化模型,并按1~7天分别诱导细胞,观察钙化的动态过程;空白组用正常培养基(I-GRO PLUS)培养。所有hVICs均培养7天。检测两组细胞钙化结节数目、BMP-4蛋白、Notch1蛋白的表达及hVICs凋亡率。然后将钙化组中诱导钙化细胞再随机分脂多糖组(LPS)、Notch1抑制剂组(γ分泌酶抑制剂,DAPT)、对照组(只加钙化诱导液)体外培养3天,检测BMP-4、Notch1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达。结果与空白组细胞比较,钙化组细胞钙化及Notch1蛋白的表达均高于空白组,且随着诱导天数的增加而增加;细胞凋亡率在钙化诱导3天时最高,随后逐渐下降。LPS组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均随着Notch1蛋白的表达增加而增加;DAPT组与对照组比较,细胞凋亡和钙化均减少。结论hVICs钙化与细胞凋亡有着密切的关系,且Notch1蛋白在hVICs凋亡与钙化关系中起着重要的作用。     

大鼠睾丸间质细胞体外培养不同时间3β-羟基类固醇脱氢酶的表达

目的探讨通过差速贴壁法获得的7天龄、3周龄大鼠睾丸间质内细胞的细胞群体构成、体外培养不同时间3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）的表达水平变化,以及细胞睾酮分泌功能变化。方法联合应用胶原酶消化、不锈钢滤网过滤及差速贴壁法获得7天龄、3周龄雄性Wistar大鼠睾丸间质组织内细胞,贴壁细胞以DMEM/F12培养液培养,分别对原代培养2h、4d细胞进行3β-HSD免疫化学染色及流式细胞分析,原代培养细胞同时给予人绒毛膜促性腺激素（HCG）刺激,测定HCG刺激组和非刺激组各代细胞培养液上清中睾酮水平及其对HCG刺激的反应。结果7天龄、3周龄鼠差速贴壁法获得的睾丸间质内细胞群经流式细胞鉴定,3β-HSD阳性细胞所占比例分别为（5.4±1.2）%、（59.2±3.2）%;培养4d后,两组3β-HSD阳性细胞比例分别为（93.6±1.2）%、（95.4±3.2）%。两组原代培养细胞均有睾酮生成功能,在HCG刺激下睾酮分泌均明显上升,7天龄组培养细胞睾酮分泌高峰迟于3周龄组。结论差速贴壁法获得的7天龄、3周龄大鼠睾丸间质细胞群中均含有部分Leydig干细胞（Stem Leydig cells,SLCs）,SLCs在体外培养过程中逐渐分化,表达3β-羟基类固醇脱氢酶,并产生睾酮。     

Cajal样间质细胞在豚鼠膀胱肌层的分布及意义

目的研究豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的分布、超微结构特点并探讨其功能。方法选择健康豚鼠10只,利用激光共聚焦显微镜和透射电镜观察膀胱Cajal样间质细胞在肌层的分布和结构特点。结果豚鼠膀胱肌层Cajal样间质细胞形成网状和平行状两种不同的分布。超微结构核大、具有丰富的细胞器。结论膀胱Cajal样间质细胞分布和超微结构与胃肠道的ICCs相似,具有起搏细胞特征。     

Leydig cell transplantation restores androgen production in surgically castrated prepubertal rats

Prepubertal testicular dysfunction and the subsequent development of hypogonadism affects an estimated one in 200 children worldwide. As the testosterone levels are dynamic during development and puberty, traditional hormone treatment regimens are often inadequate, thereby leaving associated physiological conditions unresolved. Therefore, we have investigated the potential therapeutic effect of mature Leydig cell transplantation for the treatment of prepubertal primary hypogonadism through the use of a surgically induced hypogonadistic rat model system. In the experiment, Leydig cells were surgically isolated from mature Sprague-Dawley rats and transplanted into prepubertal recipients. Serum testosterone levels and microscopic analysis of the stained testicular interstitium were compared with sham-treated controls, as well as with castrated and intact rats during sexual development. At 4 weeks post-implantation, serum testosterone was detectable in Leydig cell recipients, but not in surgical controls, and progressively increased as a function of time until reaching levels comparable with sexually mature males at 12 weeks post-implantation. Histological analysis revealed a high rate of Leydig cell survival as well as steroidogenic secretory activity. Therefore, we conclude that mature Leydig cell transplantation in prepubertal hypogonadism recipients has therapeutic potential in rats and merits further investigation for clinical application.     

The diverse and contrasting effects of using human prostate cancer cell lines to study androgen receptor roles in prostate cancer

The androgen receptor （AR） plays an important role in the development and progression of prostate cancer （PCa）. Androgen deprivation therapy is initially effective in blocking tumor growth, but it eventually leads to the hormonerefractory state. The detailed mechanisms of the conversion from androgen dependence to androgen independence remain unclear. Several PCa cell lines were established to study the role of AR in PCa, but the results were often inconsistent or contrasting in different cell lines, or in the same cell line grown under different conditions. The cellular and molecular alteration of epithelial cells and their microenvironments are complicated, and it is difficult to use a single cell line to address this important issue and also to study the pathophysiological effects of AR. In this paper, we summarize the different effects of AR on multiple cell lines and show the disadvantages of using a single human PCa cell line to study AR effects on PCa. We also discuss the advantages of widely used epithelium-stroma co-culture systems, xenograft mouse models, and genetically engineered PCa mouse models. The combination of in vitro cell line studies and in vivo mouse models might lead to more credible results and better strategies for the study of AR roles in PCa.     

直肠间质瘤12例诊治分析

直肠间质瘤是一种起于直肠间质细胞的消化道间叶性肿瘤,由未分化或多能的梭形或上皮细胞组成。临床少见,约占胃肠间质瘤的5％。直肠间质瘤早期临床症状较为隐匿,对其诊断和治疗,缺乏统一的共识。近年来文献报道越来越多,自2001年9月～2008年3月,鲁西南十个医院共收治直肠间质瘤患者12例,现报告如下。