ATP50荧光表达载体构建及其在TM3小鼠睾丸Leydig细胞定位研究

目的:构建ATP50的荧光表达载体,研究其在原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中的表达和在TM3小鼠睾丸Leyd ig细胞中的定位。方法:原代培养小鼠睾丸Leyd ig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究ATP50在小鼠睾丸Leyd ig细胞中的表达。利用BamH I和EcoR I酶切位点把ATP50克隆到pEYFP-N1。细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-ATP50在TM3小鼠睾丸Leydig细胞的定位。结果:ATP50表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中。TM3小鼠睾丸Leydig细胞中,绿色荧光的YFP-ATP50和红色荧光的线粒体标记物M ito-tracker有完全的共定位。结论:ATP50在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建了ATP50真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-ATP50定位在Leydig细胞的线粒体。这些结果将对老年男性睾丸间质细胞睾酮合成功能障碍的研究提供重要的信息,有利于进一步深入研究。     

胃肠动力学的重大进展--胃肠起搏者Cajal间质细胞研究状况与临床意义展望

已知平滑肌和壁内神经是胃肠动力发生与调节的重要结构。一百多年前,西班牙神经解剖学家Santiago Ramony Ca-jal率先在肠道发现一种特殊的间质细胞。其后学者们进行了大量有关研究。越来越多的研究显示,这类间质细胞在胃肠电和动力发生及动力障碍机制上具有举足轻重的作用。为纪念SR Cajal的这个重要发现,人们将此类细胞命名为Ca-jal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)。一、Cajal间质细胞研究的五个时期ICC的研究可分为五个时期。在1889年之前的三十年,已有学者报道动物肠道存在特殊的结缔组织细胞;这很可能就是后来Cajal发…     

Cox7a2荧光载体构建及其在小鼠睾丸Leydig细胞表达和定位研究

目的构建Cox7a2的荧光表达载体,研究其在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达和定位。方法原代培养小鼠睾丸Leydig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达。利用BglⅡ和EcoRⅠ酶切位点把Cox7a2克隆到pEYFP-N1。细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-Cox7a2定位。结果Cox7a2表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中。绿色荧光的YFP-Cox7a2和红色荧光的线粒体标记物- Mitotracker有完全的共定位。结论Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建Cox7a2真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-Cox7a2定位在Leydig细胞的线粒体。这些结果将对老年男性睾丸间质细胞合成功能障碍的研究提供重要的信息。     

胃肠道间质瘤临床病理诊断进展

胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）是一类发生于消化道的少见肿瘤,它属于间叶肿瘤的一种,由于其具有非定向分化的特点,即GIST可以向平滑肌或神经方向分化,也可同时向两双向分化,但GIST与胃肠道肌源性和神经源性肿瘤相比,又有特殊的组织学特点及免疫表型,是消化道独立的一类肿瘤.目前对GIST的认识可归纳为：胃肠道除外平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、神经鞘瘤及神经纤维瘤,并且表达CD117或CD34和CD117同时表达的梭形、上皮形或多形性间叶源性肿瘤,起源于胃肠道Cajal间质细胞.     

Cajal间质细胞在大鼠“泻剂结肠”结肠肌电变化中的 …

目的 研究长期服用接触性泻剂对大鼠结肠肌电的影响，探讨Ｃａｊａｌ间质细胞（ＩＣＣ）在“泻剂结肠”肌电变化中的作用。方法 ３２只大鼠随机分为２组，实验组饲以含酚酞饲料，３个月后测定结肠慢波频率及振幅；用碘化锌－锇酸法（ＺＩＯ）观察肌间丛ＩＣＣ变化，透射电镜观察肌间丛神经和ＩＣＣ的超微结构变化。结果“泻剂结肠”结肠慢波频率明显减慢（Ｐ〈０．０５），肌间丛ＩＣＣ分布不均匀，突起连接杂乱；电镜下见肌间丛神     

整合素β_1和表皮生长因子在不孕症子宫内膜上的表达及意义

整合素和表皮生长因子(EGF)在生殖过程中起重要作用.本实验采用免疫组化技术,检测整合素β1和EGF在生育组及不孕组分泌期子宫内膜上的表达及二者相关性. 1临床资料 ①一般资料:不孕组病例选自门诊不孕症诊刮子宫内膜患者26例,年龄24～36岁,月经周期28～30 d,排除其他因素所致不孕,确诊为女性原因不明不孕症.对照组选自有生育史并发子宫肌瘤住院患者22例,年龄28～40岁,月经周期28～30 d,无不规则流血,于月经周期的分泌期行子宫切除术,术后病理证实为分泌期子宫内膜.②方法:采用免疫组化染色S-P法,DAB显色,不复染,以PBS代替一抗做阴性对照,以已知的阳性切片做阳性对照.③结果判定及统计学处理:阴性对照不着色,阳性反应呈棕红色.随机选择5～10个高倍(400×)视野,分别记数间质细胞(腺体)阳性数占总间质细胞(腺体)数的百分比,取其平均数作为阳性细胞的表达率,以-x±s表示.采用SAS统计软件进行成组t检验和相关分析.     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠睾丸间质细胞雄激素合成的影响

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对2型糖尿病大鼠睾丸间质细胞雄激素合成的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机均分成3组:正常对照组、2型糖尿病组、EGB治疗组。用光镜和透射电镜观察EGB对2型糖尿病大鼠睾丸的形态学改变;ELISA法检测血清LH、T水平;半定量RT-PCR检测睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017a-羟化酶(P450c17)、3β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型(3β-HSD1)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅲ型(17β-HSD3)的mRNA水平。结果:糖尿病组光镜下睾丸间质细胞较正常对照组缩小;透射电镜下见到间质细胞核固缩,胞质内内质网减少。糖尿病组血清LH及T水平显著低于正常对照组(P<0.05);睾丸组织P450scc的mRNA水平显著低于正常对照组(P<0.01),StAR、17β-HSD3及3β-HSD1的mRNA水平也明显低于正常对照组(P<0.05),P450c17基因表达呈下降趋势(P>0.05);EGB治疗12周与糖尿病组比较睾丸组织病理改变较轻,血清LH、T含量升高(P<0.05),StAR、P450scc的mRNA水平升高(P<0.05),P450c17、17β-HSD3及3β-HSD1的mRNA水平呈上升趋势(P>0.05)。结论:EGB能减轻糖尿病大鼠睾丸损害并使2型糖尿病大鼠睾丸间质细胞合成和分泌T能力增强。     

顽固性便秘结肠旷置术前、后Cajal间质细胞的家兔实验研究

100年前，西班牙神经解剖学家Cajal第一次发现并描述了Cajal间质细胞（interstitial cell of Cajal，ICC）的形态结构。后来人们进一步研究发现ICC是胃肠道起搏细胞，胃肠动力障碍性疾病与其数量和形态异常有关。顽固性便秘作为最常见的胃肠动力障碍性疾病之一，其发生、发展与ICC紧密相关。本实验通过分析结肠旷置术前、后家兔结肠壁内ICC形态和数量变化，进一步探讨顽固性便秘的病因，并为临床实施结肠旷置术提供理论依据。     

Cajal间质细胞与胃肠运动功能

近年来大量研究发现，Cajal间质细胞(ICC)是胃肠道的起搏细胞，具有自发性电活动和产生、传播慢波的功能。超微结构研究发现，ICC与胃肠平滑肌细胞间存在缝隙连接，并能够传导肠神经系统至平滑肌的信号，对胃肠运动具有非常重要的调节作用。本文主要就近年来有关这方面的研究作一概述。     

骨髓基质细胞治疗脑梗死的研究现状

目前,治疗脑梗死的药物虽然很多,但均未取得满意疗效.骨髓基质细胞(mesenchymalstromal cell,MSC)具有多向分化潜能和自我更新能力,可分化为神经细胞.通过分泌营养因子和生长因子、促进血管发生等机制,移植的MSC能改善梗死后神经功能缺损,促进神经功能恢复,从而降低脑梗死的致残率.利用MSC进行细胞移植很可能成为治疗脑梗死的一种理想手段.