大黄对大鼠结肠动力的影响

目的观察大黄对慢传输型便秘大鼠结肠传输能力的影响,揭示大黄与该病发展的相关性。方法将健康SD大鼠24只随机分为大黄组及对照组,大黄组应用中药大黄喂养制作慢传输型便秘的动物模型。分别于禁食后,经口灌入活性炭悬液10 mL/kg,动物处死后剖腹取出幽门到直肠末段的全部肠管并测量肠管长度、碳末推进长度及肠道传输功能。取结肠组织进行HE染色及电镜下观察。同时进行免疫组织化学染色,观察血管活性肠肽(VIP)的表达状况。结果大黄组碳末推进长度、肠道传输功能低于对照组。大黄组大鼠结肠肌间神经丛VIP含量较对照组明显下降,光镜及电镜下均可见结肠细胞结构明显退行性改变,结肠肌间神经丛内未找到Cajal间质细胞(ICC)。结论大黄等蒽醌类泻剂损伤结肠壁神经丛,使结肠传输功能下降。因此,对慢传输型便秘患者治疗时,应避免长期应用此类药物。     

神经细胞黏附分子在隐睾组织中病理表达的意义分析

目的 探讨神经细胞黏附分子(NCAM)在人隐睾中的病理表达及意义.方法 48例隐睾患儿,年龄6个月～13岁,平均3岁.单侧隐睾43例,双侧隐睾 5 例.共50个隐睾组织活检样本,应用免疫组化法检测NCAM在生精小管和间质细胞的表达.结果 58%(29/50)的标本NCAM生精小管阳性或间质细胞阴性病理表达.30%(15/50)的标本NCAM在生精小管阳性病理表达,不同年龄、睾丸位置的阳性表达率间差异无统计学意义(P>0.05).32%(16/50)的标本NCAM在间质细胞性病理表达,不同睾丸位置的阴性表达率间差异无统计学意义(P>0.05),在不同年龄组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 NCAM在隐睾中的病理性表达情况反映了生殖母细胞的迁移、分化障碍以及间质细胞分化延迟,可以作为预测隐睾生殖潜能的可靠分子标志物.     

大鼠睾丸间质细胞中结晶紫染色法半薄切片技术应用

随着科学技术的不断提高,半薄切片技术在生物医学形态学领域方面的应用也越来越广泛,它的应用弥补了常规组织学石蜡切片较厚,细胞成份重叠,难以分辨细胞的细微结构、细胞成份的破坏以及固有结构的丧失等缺点,尽可能保持材料的结构和某些化学成分生活时的状态。结合用电子显微镜样品制备方法,进行材料的定位,光镜电镜的对比观察以及用电镜包埋法对大白鼠的睾丸间质细胞进行研究。     

不稳定膀胱逼尿肌中Cajal样间质细胞的分布

目的:了解Cajal(ICCs)样间质细胞在不稳定膀胱逼尿肌中的分布,探讨其与逼尿肌不稳定(DI)发病机制的相关性。方法:建立豚鼠膀胱出口梗阻模型,行充盈性膀胱测压确定DI组14只,另设对照组10只,采用组织冰冻切片、酪氨酸蛋白激酶受体(KIT)单克隆抗体间接免疫荧光检测技术观察逼尿肌中ICCs样细胞的分布情况。结果:KIT阳性细胞走向与逼尿肌肌束平行,主要分布于逼尿肌肌束边缘和逼尿肌肌束中,呈梭形双极细胞。与对照组比较,DI组KIT阳性细胞数量明显增多(P<0.01)。结论:膀胱ICCs样间质细胞增多引起逼尿肌自发收缩活动增加可能是DI发病的重要因素之一。     

基因转染DKK1对17β-雌二醇促进子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞VEGF和MMP-9表达的影响

目的 利用基因转染pcDNA3.1-DKK1阻断Wnt/β-catenin信号通路,观察对17β-雌二醇(17β-E 2)作用后子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞(ESCs)中血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及蛋白表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路在介导雌激素促进异位内膜粘附、侵袭和转移中的作用.方法 体外分离培养内异症患者ESCs,利用Lipofectamine TM 2000,分别将pcDNA3.1-DKK1质粒,pcDNA3.1空载质粒转入ESCs.选用10 -10 mol/L 17β-E 2处理ESCs不同时间,RT-PCR和Western blot检测转染DKK1前后ESCs VEGF、MMP-9 mRNA及蛋白表达.结果 17β-E 2能明显促进内异症患者ESCs VEGF、MMP-9 mRNA及蛋白的表达,于10 -10 mol/L作用48 h最明显(P ＜0.05).转染pcDNA3.1-DKK1质粒组内异症患者ESCs VEGF和MMP-9 mRNA及蛋白表达较空白组和空载体组均显著下降(均 P ＜0.05).结论 阻断Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制17β-E 2对内异症患者ESCs VEGF、MMP-9 mRNA及蛋白表达的促进作用.雌激素可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进内异症患者在位子宫内膜的异位种植.     

三七总皂苷对慢性肾缺血肾间质纤维化的防治作用

目的观察三七总皂苷（PNS）对大鼠慢性肾缺血的保护作用及其机制。方法将大鼠随机分为假手术组,模型组及PNS治疗组。建立肾动脉狭窄肾缺血大鼠模型,分别于造模后第7,28,45．60天处死大鼠。观察肾间质病理形态学变化,应用免疫组织化学法检测肾小管－间质a—SMA在不同时间点的表达,放射免疫分析法检测血清IL-2的含量、EuSA检测血清血小板源性生长因子（PDGF）的含量。结果模型组肾间质纤维化的程度,肾小管上皮细胞及间质α—SMA的表达和血清PDGF的含量在各时间点明显高于假手术组（P〈0．01）,PNS治疗组上述各项指标在不同时间点明显低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。模型组血清IL-2含量在7d时显著升高（P〈0．01）,之后迅速下降到假手术组水平,45d时显著低于假手术组（P〈0．05）。PNS治疗组血清IL－2含量在7d时低于模型组（P〈0．05）,其他时间点差别无统计学意义。结论PNS可能通过抑制肾小管间质细胞表型转化,降低细胞因子PDGF的水平和早期IL-2的水平减轻和改善慢性肾缺血肾间质纤维化。     

糖原合成酶激酶-3β磷酸化 促进人腹膜间皮细胞转分化的实验研究

目的：探讨糖原合成酶激酶（GSK）-3β磷酸化在人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用。方法：从人腹膜组织中分离和培养人原代腹膜间皮细胞。观察GSK-3β抑制剂氯化锂（LiCl）对HPMC GSK-3β磷酸化的影响,在不同时间点（0,1,3,6,12 h）和不同浓度（0,5,10,20,40 mmol/L）LiCl下Western 印迹检测p-GSK-3β和总GSK-3β表达水平的变化。Western 印迹检测20 mmol/L LiCl作用HPMC不同时间,α-SMA和E-cadherin蛋白的表达。间接免疫荧光染色方法检测α-SMA的表达和分布。结果：LiCl促进HPMC GSK-3β磷酸化在一定范围内呈浓度依赖性和时间依赖性（P＜0.05）,但总GSK-3β水平不变（P＞0.05）。20 mmol/L LiCl干预HPMC 24 h后,α-SMA表达显著增高（P＜0.05）,E-cadherin表达显著下调（P＜0.05）。间接免疫荧光结果显示20 mmol/L LiCl作用24 h后α-SMA表达显著增高（P＜0.05）。结论：GSK-3β磷酸化能诱导HPMC发生上皮-间质细胞转分化,为治疗腹膜纤维化提供了新的思路。     

四磨汤对胃肠道Cajal间质细胞的体外增殖干预作用

目的:探讨四磨汤对胃肠道Cajal间质细胞(Interstitial Cells of Cajal,ICC)体外增殖的干预作用,为四磨汤对胃肠动力障碍性疾病的临床治疗提供实验依据。方法:采用Ⅱ型胶原酶消化法体外培养ICC,通过直接给药和含药血清2种给药途径研究四磨汤对胃肠道ICC的体外增殖干预作用。结果:采用MTT法对ICC的增殖干预作以评价,通过直接给药途径:四磨汤中、高剂量组均有促进细胞增殖作用,与空白对照组比较有显著的统计学意义(P<0.01);通过含药血清给药途径:给药各组均与空白对照组比较有显著统计学意义(P<0.01),其中10%、20%浓度的四磨汤组具有促进ICC增殖作用,而30%浓度组呈现对体外ICC有抑制增殖作用。结论:通过直接给药途径四磨汤低剂量组与空白对照组比较无统计学意义,中、高剂量组对ICC具有提高增殖率作用;通过含药血清给药途径四磨汤10%、20%含药血清组具有提高ICC增殖率的作用,而30%含药血清组的细胞增殖率低于空白对照组,有抑制ICC的趋势。结论:四磨汤在一定浓度及给药途径下能促进ICC的增殖。     

膀胱Cajal样间质细胞的分布和结构与功能

西班牙神经解剖学家Cajal于1893年首先在胃肠道发现一种特殊的间质细胞,学术界后将此类细胞命名为Cajal间质细胞( ICC)[1-2].这类细胞分布在消化道自主神经末梢和平滑肌之间,表达c-Kit、波形蛋白和缝隙连接蛋白( Cx43)[3-5].ICC有自发的电节律活动,是胃肠道运动的起搏细胞,作为神经信号向肌肉传递的中转站,在调控消化道运动中起重要作用[6].1996年,Smet等[7]在豚鼠和人逼尿肌上发现了类似胃肠ICC的间质细胞(膀胱ICC样间质细胞).其后,一系列研究也证实膀胱间质具有与胃肠间质细胞类似的功能.我们对膀胱ICC的分布、结构与功能做一综述.     

通里攻下法对胆囊神经-Cajal间质细胞-平滑肌网络损伤防治作用研究

目的:观察豚鼠胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络在结石性胆囊炎时的形态学变化,探讨通里攻下方剂防治胆石症的机制。方法:将50只豚鼠随机分为对照组、模型组和防治组,采用免疫荧光标记和共聚焦显微镜,对比观察各组豚鼠胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络形态学变化。结果:模型组较对照组胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络结构不完整,Cajal细胞荧光强度明显减少(P<0.05),治疗组较模型组胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络结构完整。结论:结石性胆囊炎时,胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络损伤明显,通里攻下方剂对胆囊神经-Caja间质细胞-平滑肌网络的保护作用为其防治胆石症的机制之一。