联合检测评估糖尿病合并甲亢患者病情进展的价值

为研究甲状旁腺激素(PTH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)联合检测在糖尿病合并甲亢患者病情评估中的应用价值。选取95例糖尿病合并甲亢患者(观察组)和50例健康者(对照组),检测血浆中PTH、TPOAb、GADA水平,并绘制ROC曲线,以分析联合检测的灵敏度和特异度。结果显示, PTH、TPOAb、GADA联合检测的灵敏度、特异度均显著高于各指标单一检测(P<0.05),提示PTH、TPOAb和GADA三者联合检测有利于提高诊断的准确度,对较好预测有无甲亢发生具有重要意义。     

鸡枞菌的培养条件研究

研究鸡枞菌营养要求,实现鸡枞菌的人工栽培.采用液体振荡培养法,研究鸡枞菌菌丝体对不同矿物质、维生素、氨基酸等营养物质的需要.结果表明,鸡枞菌菌丝体在葡萄糖为碳源,氨基酸为氮源时,最适C/N为12～14:1.在分别以谷氨酸、天门冬氨酸和精氨酸为氮源时,鸡枞菌菌丝体的生长最好,其生物量最高,鸡枞菌菌丝体对Ca2 的需要量最大,其次是K1 和Mn2 .对VB1、VB2、VB3,VB5、VC、VM的需要量在3.5mg/L时鸡枞菌菌丝体生物量最高,对VB6、VB12的需要量在2.0～2.5 mg/L时,其菌丝体生物量最高.     

骨癌痛小鼠脊髓谷氨酸转运体GLAST表达下调

目的 观察谷氨酸转运体GLAST在骨癌痛小鼠脊髓中表达的变化.方法 35只C3H/HeJ小鼠随机分为2组:骨癌痛组(Ca组,n=30)和假手术组(Sham组,n=5).Ca组小鼠是将含2×105个NCTc2472细胞的20μl的最小必需培养基注入右股骨远端骨髓腔中制备癌痛模型.Sham组是不注射NCTC2472细胞,余操作同于骨癌痛组.Ca组小鼠注射肿瘤细胞后1 d、3 d、7 d、10 d、14 d、21 d观察小鼠的机械缩足阈值(MWT)和热辐射缩足反射潜伏期(PWL),并于注射肿瘤细胞前、注射后7 d、14 d、21 d进行X线检查评估股骨破坏程度.Ca组分别于肿瘤细胞后1 d、3 d、7 d、10 d、14 d、21 d检测行为学实验后处死小鼠取右侧腰段脊髓,Sham组直接取右侧腰段脊髓,采用Western blot方法测定GLAST在脊髓的蛋白表达.结果 Ca组小鼠在接种肿瘤细胞后第7天MWT显著降低,低于术前的基础值(P<0.05),持续下降至第21天;接种后第14天PWL显著降低,低于术前的基础值(P<0.05),持续下降至第21天.ca组小鼠第7天的X线片仅见股骨远端有小的病灶,第14天骨质破坏增多,到第21天骨破坏进一步加重,骨质破坏范围加大,有骨质缺损或骨折出现.Ca组小鼠接种肿瘤细胞后第10天脊髓GLAST蛋白含量开始减少,第14天明显减少,持续降低至术后21 d(P<0.01).结论 骨癌痛小鼠脊髓的谷氨酸转运体GLAST的蛋白表达下降,提示脊髓谷氨酸转运体GLAST参与骨癌痛的形成.     

11β羟化类固醇脱氢酶1与成骨细胞分化之间相互关系的研究

目的 通过体外地塞米松刺激原代大鼠成骨细胞分化,观察11β羟化类固醇脱氢酶1（11β-HSD1）在成骨细胞分化中的变化以及相关成骨基因的表达情况,探讨11β-HSD1与成骨细胞分化之间关系以及可能的作用机制.方法 采用酶消化法获得大鼠成骨细胞,建立地塞米松（Dex）药物刺激模型（Dex组1×10-8 mol/L和正常对照组）,分别于培养0、2、4、6、8、10 d抽提RNA行RT-PCR和蛋白行Western Blot,检测成骨细胞相关基因和11β-HSD1的表达情况.结果 11β-HSD1在正常成骨细胞中随着培养表达逐渐升高,在Dex刺激组中成骨细胞分化指标ALP、COLⅠ较对照组明显升高,伴有11β-HSD1 mRNA和蛋白水平的下调.结论 在成骨分化过程中,11β-HSD1表达下降,与分化呈逆相关.11β-HSD1可能通过自分泌的方式参与调节成骨细胞的分化.     

星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环在大鼠神经病理性痛形成中的作用

目的 评价星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环在大鼠神经病理性痛形成中的作用.方法 成年雄性SD大鼠48只,体重200～230 g,采用结扎胫神经和腓总神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型.随机分成8组(n=6):对照组(C组)不进行任何处理;假手术组(S组)仅穿线不结扎;神经病理性痛组(NP组)模型制备成功后鞘内注射PBS 50μl,M1～4组分别鞘内注射0.01、0.03、0.05、0.10 mmol/L谷氨酰胺合成酶抑制剂MSO 50μl,MG组鞘内注射0.05 mmol/L MSO 50μl,15 min后鞘内注射0.25 mmol/L氨酰胺50μl.于结扎前1周(T0)、结扎后1周(T1)、注射MSO后15、30、45、60 min(T2～5)时测定机械痛阈,最后1次测痛阈后处死大鼠,取L4～6段脊髓,采用免疫组化法测定神经胶质酸性蛋白(GFAP)和谷氨酰胺合成酶(GS)的表达及共表达(GFAP/GS)情况.结果 与NP组和MG组相比,S组CP组T1～5时、M3,4组T2～4时机械痛阈升高,S组、C组和M3组脊髓背角GFAP、GS和GFAP/GS表达下调(P＜0.05);MG组和NP组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环参与了大鼠神经病理性痛的形成.     

脊髓蛋白激酶C表达在代谢型谷氨酸受体5参与大鼠吗啡耐受形成中的作用

目的 评价脊髓蛋白激酶C(PKC)表达在代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)参与大鼠吗啡耐受形成中的作用.方法 鞘内置管成功的雄性SD大鼠32只,体重180～240 g,随机分为4组(n=8):对照组(C组)、吗啡耐受组(M组)、反义链组(ANT组)和错义链组(MIS组).M组鞘内注射0.9%生理盐水5μl、ANT组和MIC组分别鞘内注射30 nmol反义、错义寡聚脱氧核苷酸(溶于5μl0.9%生理盐水),2次/d,连续8 d,于第6～8天鞘内注射吗啡15μg,2次/d,C组注射等容量生理盐水.于鞘内注射寡聚脱氧核苷酸6、7、8 d(T1～3)时测定大鼠的热痛阈和机械痛阈,第9天(T4)时处死大鼠取L4.5脊髓,采用RT-PCR法测定mGluR5、PKCα、PKCγ的mRNA表达,采用Western blot法测定PKCα、PKCγ的表达.结果 与C组比较,M组和MIS组T1.2时、ANT组T1～3时大鼠热痛阈和机械痛阈升高,T4时M组和MIS组脊髓mGluR5 mRNA、PKCα、PKCγ的表达上调,ANT组脊髓mGluR5 mRNA表达下调(P＜0.05);与M组比较,ANT组T2.3时大鼠热痛阈和机械痛阈升高,脊髓mGluR5 mRNA、PKCα、PKCγ的表达下调(P＜0.05),MIS组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓PKC表达在mGluR5参与大鼠吗啡耐受形成中起重要作用.     

二次脑损伤后鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体5mRNA表达改变及α-甲基-4-羧基苯丙氨酸的治疗作用

目的 研究二次脑损伤后鼠脑皮层代谢性谷氨酸受体5(mGluR5)mRNA的变化及I类mGluR5拮抗剂α－甲基－4－羟基苯丙氨酸（MCPG）的作用。方法 90只SD大鼠随机分为原位杂交组（60只）和MCPG作用组（30只）,每组又分为不同的亚组。在Marmarou大鼠加速性弥漫性脑损伤模型基础上,采用血造成低血压。在伤后不同时间进行原位杂交和病理学研究。结果 单纯脑损伤后脑皮层mGR5mRNA于伤后1d开始降低,7d最低（P＜0．05）;而脑损伤合并二次脑损伤后脑皮层mGluR5mRNA水平在伤后变化更明显。I类mGluRs拮抗剂MCPG可减少二次脑损伤后的损伤神经元的数目。结论 脑损伤可以抑制mGluR5的表达和生成,其作用可能与mGluR1、mGluR1α不同,对神经元具有保护作用。     

大鼠脑内3H-MK-801结合位点受体放射自显影

目的研究大鼠脑内(第29层面)N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体的分布特征。方法采用     

谷氨酸介导中枢系统损伤神经毒性的分子机制概述

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统（CNS）中主要的兴奋性神经递质。谷氨酸释放到突触后能够激活离子型和代谢型受体。多数谷氨酸受体家族成员都会参与介导兴奋性毒性作用,但最为关键的是离子型受体。     

ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂对脑缺血/再灌注大鼠谷氨酸受体1a和谷氨酸转运体1的影响

目的 研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂克罗卡林对大鼠脑缺血/再灌注后脑梗死体积、代谢型谷氨酸受体1α(mGluRlα)和谷氨酸转运体1(GLT-1或者EAAT-2)的影响.方法 雄性Wistar大鼠按序号随机分为假手术组(A组)、缺血/再灌注脑缺血对照组(middle cerebral artery occlusion MCAOB,B组)、MCAO+ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂克罗卡林组(C组).应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,大鼠脑缺血/再灌注24 h后,Bederson法评价动物的神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,免疫组化测定谷氨酸受体1α(mGluR1α)和GLT-1.结果 脑缺血/再灌注24 h后,动物均表现神经行为功能障碍,大鼠神经行为功能评分C组(2.23±0.11)较B组(2.61±0.19)明显改善,差异有统计学意义(P＜0.05);缺血侧出现脑梗塞病灶,脑梗死体积C组(138.3±29.9)较B组(182.5±34.5)显著减小,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组mGluR1α吸光度(0.293±0.009)与A组mGluR1α吸光度(0.183±0.008)相比,吸光度明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05)、B组GLT-吸光度(0.147±0.009)与A组GLT-吸光度(0.255±0.009)相比,吸光度明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05);C组mGluR1α吸光度(0.227±0.009)与B组mGluR1α吸光度(0.293±0.009)相比,其吸光度明显减小,差异有统计学意义(P＜0.05)、C组GLT-1吸光度(0.212±0.008)与B组GLT-1吸光度(0.147±0.009)相比明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 预防性应用克罗卡林可能通过减少mGluR1α表达,增强GLT-1表达,减少谷氨酸堆积,减小脑梗死体积,从而减轻脑组织缺血/再灌注损伤.