SLE病人外周血T淋巴细胞Fas的表达及其与ANA的关系

应用流式细胞仪检测系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）２０例正常人外周血新鲜分离的Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ抗原的表达，并采用ＥＬＩＳＡ法检测病人血浆中抗核抗体（ＡＮＡ）的含量，结果发现，ＳＬＥ病人外周血Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ的表达明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），且活动期明显非活动期（Ｐ〈０．０１）。活动期血浆ＡＮＡ含量明显高非活动期（Ｐ〈０．０５）。外周血Ｔ淋巴细胞Ｆａｓ阳性率与血浆ＡＮＡ含量呈正相关。结果提示：在ＳＬ     

应用PCR检测HL—60细胞诱导分化前后c—myc癌基因的扩增

应用ＰＣＲ方法研究了维甲酸（ＲＡ）和二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）诱导ＨＬ－６０细胞分化过程中ｃ－ｍｙｃ基因扩增的变化。结果：ＨＬ－６０细胞内ｃ－ｍｙｃ基因扩增为１１，经ＲＡ诱导６ｄ后，其扩增程度无明显变化，而ＤＭＳＯ诱导３ｄ后，ｃ－ｍｙｃ基因扩增出现下降，至５ｄ，较未诱导分化前下降约３０％。提示了ＲＡ和ＤＭＳＯ对ＨＬ－６０细胞不同的诱导分化机制。     

PCR技术检测DMD/BMD的策略和方法

假肥大性肌营养不良 (ＤＭＤ/ＢＭＤ)是由营养不良性基因突变引起的Ｘ 连锁性疾病。应用分子遗传学分析方法检测突变 ,在常规诊断实验中很难实现 ,主要是由于基因的大小和结构所决定的。这段基因长度为 2 4Ｍｂ ,包括 79个外显子 ,这些外显子由 14ｋｂ的ｍＲＮＡ编码。每个外显子均 <2 0 0ｂｐ ,而内含子却在 10 9ｂｐ到 2 0 0ｋｂ以上变化不等。由于发生新突变 (约占ＤＭＤ的 1/ 3) ,基因重组率高于正常水平 (约 10 % ) [1 ] 以及种系镶嵌现象 ,进一步阻碍了其研究[2 ] 。1　策　略建立一套固定的基因诊断程序来分析所有的ＤＭＤ/ＢＭＤ是…     

结核病的基因研究及应用

结核病分子流行病学研究始于 1984年[1 ] 。 1985年Ｍｕｌｌｉｓ创建了聚合酶链反应 (ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＰＣＲ)技术。1989年Ｈａｎｃｅ等首先将该技术应用于检测分支杆菌 ,1990年我国引进该项技术 ,从而开辟了以ＰＣＲ为代表的分子生物学技术检测结核分支杆菌阶段[2 ] 及ＤＮＡ指纹技术。ＤＮＡ指纹的基本方法———标准的ＰＦＬＰ分析法 ,由Ｅｍｂｄｅｎ等[3 ] 1993年推荐 ,已在国际上得到广泛认同并采用。这一技术使全球范围内结核分支杆菌菌株水平鉴定的比较成为可能 ,我国于1999年首次报道[4] 。随着分…     

常染色体显性遗传视网膜色素变性致病基因Peripherin/RDS的突变筛选

目的：了解中国视网膜色素变性患者（rtinitis pigmentosa,RP)中peripherin/RDS基因的突变谱及突变率。方法：应用聚合酶链-异源双链-单链构象多态性（polymerase chain reaction heteroduplex-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)及DNA序列分析技术对收集的15个常染色体显性遗传视网膜色素变性家系和55例散发视网膜色素变性病人peripherin/RDS基因的第一、二外显子进行检测。结果：15个家系及55例散发病人未检测到peripherin/RDS基因突变。结论：本研究所检测的视网膜色素变性病人与RDS基因无关。显示视网膜色素变性的遗传异质性。     

杂交瘤细胞株功能性与非功能性Vk基因结构分析

本研究利用逆转录ＰＣＲ技术和家族特异性引物，先后从９株分泌不同特异性单抗杂交瘤细胞株中扩增出轻，重链可变区基因，并经克隆和序列测定。其中利用轻链引物从分泌抗转铁蛋白受体单抗的杂交瘤细胞株中扩增出了无功能的ＶＫ序列。经分析和ＧｅｎＢａｎｋ数据库比较，该序列虽与ＢＡＬＢ／ｃＶＫ２１－Ｅ细胞株分泌的抗体轻链有９８％同源性，但是在Ｖ／Ｊ连接区内有４个碱基对缺失，导致后续阅读框架移位，因而出现终止密码子而致     

nm23基因在前列腺癌中的表达与癌转移的关系

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学染色方法，研究转移抑制基因ｎｍ２３表达产物二磷酸核苷激酶（ＮＤＰＫ）在前列腺癌中的表达及其意义。结果表明，ＮＤＰＫ／ｎｍ２３在前列腺癌中有较高的表达，阳性率为５００％（２０／４０）。无前列腺癌转移者其阳性率为６６７％（１２／１８），有前列腺癌转移者其阳性率为３６４％（８／２２），两者比较差异有显著性（Ｐ＜００５），并与前列腺癌分化程度和临床分期有显著相关。因此，ｎｍ２３基因可能在前列腺癌形成及转移过程中起不同的调节作用，其表达程度与前列腺癌转移呈负相关，有可能成为评价前列腺癌病人预后的一项新指标。