姜黄素抑制K562细胞增殖的机制

用不同浓度的姜黄素处理人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,采用MTT法测定姜黄素对K562细胞增殖的抑制作用,应用MDC荧光染色观察自噬的发生,免疫组化法观察自噬特异性蛋白LC3的表达,流式细胞仪观察细胞线粒体膜电位变化.发现姜黄素可显著抑制K562生长,且此作用呈明显的时间剂量依赖性和一定的剂量依赖性;姜黄素给药后3 h可诱导K562细胞发生自噬.认为自噬特异性蛋白LC3表达增加和细胞线粒体膜电位下降可能是姜黄素诱导K562细胞自噬的重要途径.     

Down-modulation of heat shock protein 70 and up-modulation of Caspase-3 during schisandrin B-induced apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells

AIM: To investigate the effect of schisandrin B (Sch B) on proliferation and apoptosis of human hepatoma SMMC-7721 cells in vitro and regulation of Hsp70 and Caspases-3, 7, 9 expression by Sch B. METHODS: Human hepatoma cell line SMMC-7721 was cultured and treated with Sch B at various concentrations. Growth suppression was detected with MTT colorimetric assay. Cell apoptosis was confirmed by DNA ladder detection and flow cytometric analysis. The expression of Hsp70, Caspases-3, 7, 9 were analyzed by Western blot analysis. RESULTS: Sch B inhibited the growth of hepatoma SMMC-7721 cells in a dose-dependent manner, leading to a 50% decrease in cell number (LC50) value of 23.50 mg/L. Treatment with Sch B resulted in degradation of chromosomal DNA into small internucleosomal fragments, evidenced by the formation of a 180-200 bp DNA ladder on agarose gels. FCM analysis showed the peak areas of subdiploid at the increased concentration of Sch B. The results of Western bolt analysis showed that Hsp70 was down-regulated and Caspase-3 was up-regulated, while the activity of Caspases-7, -9 had no significant change. CONCLUSION: Sch B is able to inhibit the proliferation of human hepatoma SMMC-7721 cells and induce apoptosis, which goes through Caspase-3-dependent and Caspase-9-independent pathway accompanied with the down-regulation of Hsp70 protein expression at an early event.     

转染不同基因的NIT细胞体外抗细胞毒T细胞杀伤作用

目的　研究转染FADD缺失突变体(FADDdel)和WeelHu/GFP的胰岛β细胞株(NIT细胞)抵抗细胞毒T细胞的杀伤作用及其分泌胰岛素与细胞增殖所受的影响。方法　采用免疫磁珠法测量转染WeelHu基因的NIT细胞培养上清中的胰岛素水平及观察其增殖速度。将分别转染空载体pUC-pIC、pCMV和转染pFADDdel、pCMV-WeelHu、pCMV-WeelHu/GFP的NIT细胞与活化的淋巴细胞共培养,利用51Cr释放试验检测淋巴细胞对NIT细胞的杀伤作用。结果　转染WeelHu基因与未转染的NIT细胞胰岛素的分泌和生长速度没有明显变化(P>0.05)。转染pCMV-WeelHu/GFP或pCMV-WeelHu的NIT细胞其抗淋巴细胞杀伤能力明显高于转染空载体的NIT细胞(P<0.01),表达WeelHu或WeelHu/GFP融合蛋白的胰岛细胞之间抗凋亡能力差异无统计学意义,转染FADDdel在低剂量效靶比时对胰岛β细胞有一定保护作用(P <0.05),但在高剂量效靶比时与转染空载体比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论表达WeelHu或FADDdel的胰岛细胞可抵抗T细胞的杀伤,且对胰岛素的分泌及细胞增殖元明显影响。     

不同转移潜能人肝癌细胞系酪氨酸磷酸化蛋白质差异分析

目的研究不同转移潜能人肝癌细胞系中酪氨酸磷酸化蛋白质表达的差异并筛查与肝癌转移相关的酪氨酸磷酸化蛋白质分子。方法应用双电泳(2-D E)、免疫印迹法及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析,对三种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep 3B、MHCC97L和MHCC97H进行酪氨酸磷酸化蛋白质组分析。结果对照2-DE胶和免疫印迹发光胶片,Hep3B检测到10个点,MHCC 9 7L检测到19个点, MHCC97H检测到17个点。经质谱鉴定,得到膜连蛋白Ⅰ等19个差异点。结论细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的表达差异与肝癌的侵袭转移有关。     

心肌梗死前有无心绞痛对心肌损害程度的影响

目的:探讨心肌缺血预适应和炎症在急性心肌梗死（AMI）中的关系。方法:根据AMI发作前24h内有无心绞痛分为实验组和对照组,使用美国Beckman公司生产的IMMAGE特种类型蛋白分析仪,测定血清C反应蛋白（CRP）浓度;放免法测定其血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量;冠状动脉造影判断血管再通的前向血流。结果:不同的时间点CRP浓度在两组间无显著差异;不同时间点的AngⅡ水平在两组之间均存在显著性差异,有梗死前心绞痛组显著低于对照组;不同的时间点测得的LVEF两组之间亦分别存在显著性差异,有梗死前心绞痛组显著高于对照组。住院期间病死率和心力衰竭发生率有梗死前心绞痛组显著低于对照组。结论:梗死前心绞痛对AMI有类似心肌缺血预适应的保护作用;低水平AngⅡ可能在心肌缺血预适应的心肌保护中起重要作用。炎症和心肌缺血预适应在AMI中未发现关联。     

油用牡丹籽蛋白质的制备及理化性质研究

目的对油用牡丹籽蛋白质的制备工艺以及理化性质进行初步研究。方法在单因素实验基础上,采用碱提酸沉的方法进行提取并以正交试验优化牡丹籽蛋白质的提取工艺。结果牡丹籽蛋白质提取的最佳工艺条件为pH 10.5,提取40 min,液料比25∶1(ml/g),提取温度40℃。牡丹籽蛋白质的分子量主要集中在66.2~18.4 kDa。结论采用碱提酸沉的方法对牡丹籽蛋白质进行提取方便快速,可为牡丹籽蛋白质的开发与利用提供基础。     

G6PD活性水平与地中海贫血相关性分析

目的探讨分析葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性与地中海贫血(地贫)之间的关系。方法选取行血红蛋白电泳检测结果为阳性的150例患者作为地贫组,另选取同期接受血红蛋白电泳检测结果显示正常的150例患者作为对照组。两组均进行血常规、G6PD活性、血红蛋白电泳检测。比较地贫组与对照组G6PD活性,对照组不同血常规MCV值的G6PD活性。结果地贫组患者根据检测结果分为血红蛋白H(HbH)病组(33例)、轻型地贫组(95例)、重型地贫组(22例)。HbH病组、轻型地贫组、重型地贫组的G6PD活性分别为(5207.00±555.75)、(3397.47±686.85)、(5298.60±736.46),均高于对照组的(2567.21±615.76),差异均具有统计学意义(P<0.05)。HbH病组与重型地贫组G6PD活性均高于轻型地贫组,差异均具有统计学意义(P<0.05);但HbH病组与重型地贫组G6PD活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组患者根据血常规MCV值分为MCV异常组(50例,血常规MCV值小于正常参考值)和MCV正常组(100例,血常规MCV值在正常参考值范围内)。MCV异常组患者经地中海贫血基因检测确诊为地中海贫血患者或地中海贫血基因携带者。MCV异常组的G6PD活性(2775.57±584.59)高于MCV正常组的(2119.05±227.20),差异有统计学意义(P<0.05)。结论G6PD活性水平可作为辅助诊断地中海贫血及分型的辅助依据。