虫草素对高糖诱导脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用研究

目的探讨虫草素对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用及其机制。方法原代培养HUVECs,实验分为空白对照组、模型组、对照组、抑制剂A组、抑制剂B组、干预A组、干预B组和低、中、高浓度虫草素组。空白对照组给予正常糖浓度(5.5 mmol·L^-1);模型组给予40 mmol·L^-1高糖孵育48 h;对照组给予10μmol·L^-1白藜芦醇+高糖;低、中、高浓度虫草素组分别给予1,10,20μmol·L^-1虫草素+高糖;抑制剂A组给予1μmol·L^-1 CLI-095+高糖;抑制剂B组给予100 nmol·L^-1西罗莫司+高糖;干预A组给予1μmol·L^-1 CLI-095+20μmol·L^-1虫草素+高糖;干预B组给予100 nmol·L^-1西罗莫司+20μmol·L^-1虫草素+高糖。用5-溴脱氧尿嘧啶核苷-酶联免疫吸附法检测光密度值观察细胞增殖能力,用Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)mRNA的表达水平,用Western Blot检测SIRT1蛋白的表达水平。结果模型组、对照组和低、中、高浓度虫草素组以及干预A组、干预B组的增殖能力(光密度值)分别为(1.38±0.11),(1.86±0.06),(1.44±0.03),(1.60±0.05),(1.70±0.08),(1.85±0.04)和(1.85±0.06),细胞凋亡率分别为(6.72±1.00)%,(0.56±0.37)%,(3.86±0.16)%,(2.64±0.23)%,(2.16±0.15)%,(1.57±0.28)%和(0.86±0.20)%,SIRT1 mRNA表达相对倍数分别为(0.24±0.05),(2.97±0.41),(0.62±0.07),(1.37±0.18),(2.14±0.35),(3.45±0.76)和(3.02±0.79)。模型组、对照组、高浓度虫草素组、抑制剂B组和干预B组的SIRT1蛋白表达分别为(0.82±0.11),(1.14±0.29),(0.98±0.13),(0.74±0.19)和(1.30±0.20)。对照组和高浓度虫草素组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。干预A组和干预B组的细胞增殖力及SIRT1 mRNA表达水平与高浓度虫草素组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。干预B组细胞凋亡率与高浓度虫草素组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干预B组SIRT1蛋白表达与抑制剂B组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虫草素可能通过促进SIRT1表达,从而起到保护高糖损伤的内皮细胞作用。     

虫草素对人肝癌细胞迁移及侵袭的机制研究

目的 研究虫草素对人肝癌细胞Bel-7402迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法 以人肝癌细胞Bel-7402为研究对象,虫草素处理Bel-7402细胞。MTT法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移能力;侵袭小室实验检测细胞侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测MMP-2和MMP-9 mRNA 表达情况;Western blotting实验检测MMP-2、MMP-9、ERK、p-ERK、EGFR及p-EGFR蛋白表达水平。结果 虫草素在0～80?μmol/L时对细胞活力无明显影响;而在80～640?μmol/L时,细胞活力出现下降;在320和640?μmol/L时显著降低（P?<0.05）。40和80?μmol/L虫草素均能显著抑制细胞迁移和侵袭活动（P?< 0.05）。与空白对照组比较,虫草素（40和80?μmol/L）处理Bel-7402细胞48?h后,MMP-2和MMP-9 mRNA 及蛋白表达均下降（P?<0.05）。与空白对照组比较,虫草素（40和80?μmol/L）处理明显下调p-ERK和p-EGFR蛋白表达（P?<0.05）。结论 虫草素可能通过EGFR-ERK通路介导MMP-2和MMP-9表达下调,从而调控人肝癌细胞Bel-7402的迁移和侵袭活动。     

蛹虫草富锗胞外多糖对大鼠长期毒性研究

<正>蛹虫草(Cordyceps militaris)含有虫草多糖和虫草素等重要的生物活性成分,具有抗真菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、增强免疫力等多方面的药理作用[1-3]。有机锗是一种生物活性很高的物质,具有诱发自身干扰素,增加NK细胞活性,活化巨噬细胞,抗脂质过氧化,抗肿瘤,抗病毒,降血脂,清除自由基等多重医疗保健功能;同时对骨质疏松、高血压、糖尿病等也有一定疗效,含锗食物和药物被认为是治疗癌症和艾滋病的主要药品之一[4-8]。     

冬虫夏草：想说爱你不容易

我们先来看一段广告语：“冬虫夏草被称为‘百药之冠’,被古代多部药典称之为‘仙草’。它对于各种心脑血管病、早衰等慢性病有很好的效果,但由于其昂贵的价格让普通患者消费不起。某野生冬虫夏草研究与开发中心经过10年的技术革新,推出一款虫草胶囊,是任何人都能接受的‘白菜价’,业内人士都说,这不是免费送吗？     

北虫草提取物抗衰老作用的初步研究

目的探讨北虫草提取物抗衰老的作用,为新资源食品的有效利用提供科学依据。方法昆明种小鼠70只,随机分为对照组、衰老模型组和3个剂量北虫草提取物组(3.3、10、30 g/kg)。建立D-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型,以称质量法测定胸腺和脾指数,对-二甲氨基苯甲醛显色法测定小鼠皮肤中羟脯氨酸含量,荧光分光光度法测定肝组织中脂褐质含量。结果北虫草提取物低剂量组的胸腺指数和脾指数分别为51.3±4.5和27.6±3.6,明显高于模型组(分别为45.6±4.8和23.6±3.6)(P0.05,P0.01);中、高剂量组的上述2个指数也同样明显高于模型组(P0.05,P0.01)。北虫草提取物3个剂量组皮肤羟脯氨酸的含量均明显高于模型组(P0.05,P0.01),北虫草小分子肽低、中2个剂量组肝组织中脂褐质的含量明显低于模型组(P0.01)。结论北虫草提取物能促进衰老模型小鼠的皮肤羟脯氨酸生成,降低其肝组织脂褐质含量,并提高其胸腺指数和脾指数,提示北虫草提取物可能具有抗衰老的生物作用。     

蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用

目的研究蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用。方法采用真空冷冻干燥的方法将蛹虫草液体发酵产物制成干粉并对冻干粉主要成分进行分析测定,通过DPPH自由基清除实验和衰老小鼠模型验证蛹虫草发酵产物冻干粉的抗氧化活性,通过小鼠急性肝损伤实验研究冻干粉的保肝作用,采用急性毒性试验验证冻干粉的安全性。结果蛹虫草发酵产物冻干粉含丰富的粗纤维、粗多糖、粗三萜及黄酮类物质。蛹虫草发酵产物冻干粉对DPPH自由基的半数有效浓度（EC50）为8．12mg／mL,在16mg／mL时对DPPH自由基的清除率为61．56％,与0．02mg／mL的维生素C（Vc）清除能力相当;蛹虫草发酵产物能显著提高衰老模型小鼠血清和肝脏中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活力水平,降低丙二醛（MDA）含量,高剂量组的抗衰老效果与阳性药Vc组的抗氧化能力相当。小鼠急性肝损伤试验结果显示,冻干粉能有效降低模型组小鼠血液中门冬氨酸氨基转移酶（AST）与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平（P〈0．05）。冻干粉的半数致死量（LD50）远大于国家无毒标准15g／kg,属于无毒级别。结论蛹虫草发酵产物具有良好的抗氧化活性和保肝作用,且安全无毒。     

虫草菌丝对实验性大鼠非酒精性脂肪肝的疗效观察及其分子机制探讨

目的观察虫草菌丝对实验性大鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）的治疗效果．探讨其可能的分子机制。方法高脂饮食建立大鼠NAFLD模型．同时设正常饮食对照组（Bαsic diet．B组）．模型对照组（单纯性非酒精性脂肪肝组．NAFL组）．病理对照组（非酒精性脂肪性肝炎组．NASH组）．虫草菌丝治疗组（CS组）。HE染色法观察肝脏病理改变;ELISA测定血清TNFα;免疫组织化学染色观察肝组织TNFα。解耦联蛋白2（UCP2）表达情况;逆转录PCR检测肝组织UCP2 mRNA;鲎试剂法测血清内毒素。结果（1）NAFL组肝组织广泛脂肪变性．脂质沉积;UCP2表达增加．而TNFα、血清内毒素水平均无显著变化;（2）NASH组肝组织广泛弥漫脂肪变性,炎性细胞浸润、坏死,局部纤维组织增生;UCP2、TNFα、血清内毒素水平均显著升高;（3）CS组肝组织广泛脂肪变性．仅有轻微炎性细胞浸润．未见坏死灶及纤维组织增生;UCP2、TNFα、血清内毒素水平均显著下降。结论早期UCP2表达上调．可能是机体的适应性反应．而晚期UCP2过度表达、TNFα水平升高以及内毒素血症共同诱导或加剧脂肪性肝病向脂肪性肝炎．甚至向脂肪性肝纤维化发展。虫草菌丝能发挥有效的护肝作用．可能通过上调UCP2．减轻内毒素血症．下调TNFα等多靶点、多途径发挥治疗作用。     

关山产香棒虫草药用成分与影响因素分析

关山产香棒虫草为2007年在甘肃省关山境内华亭段修建铁路时发现的一种稀有真菌。为探寻该物种的药用价值、成分含量等,2021年慕程等人申请平凉市科技资助项目,经实地考察、收集样本,于2022年6月由西安国联检测公司以菌核、孢子束2种方式对其中所含成分进行检测,从生长土壤、寄主、生长海拔、伴生植物等方面对影响关山产香棒虫草药用成分的因素进行了分析。     

雪峰虫草子座不同生长发育时期的转录组研究

目的：挖掘调控雪峰虫草生长发育的相关通路和基因,揭示其子座生长发育的内在分子机制。方法：采用转录组测序技术（RNA-Seq）对雪峰虫草子座菌丝体（MD1）、子座原基（PD2）和子座（SD3）生长发育3个不同阶段进行测序;数据通过非冗余蛋白（NR）、Swiss-Prot、Pfam、京都基因与基因组百科全书（KEGG）、真核生物相邻类的聚簇（KOG）、基因本体（GO）数据库进行功能注释。利用EdgeR软件进行差异表达基因分析,挖掘调控雪峰虫草子座生长发育的相关通路和基因。结果：测序结果显示,MD1、PD2、SD3分别获得了8.15、7.51、6.87 GB分析数据,拼接分析数据共获得34 218个转录本,平均长度为5502 bp,组装及去冗余后获得10 511条unigenes,平均长度为2470 bp。KOG功能注释和GO富集分析显示,细胞和细胞组分、新陈代谢过程、信号转导及碳代谢是雪峰虫草子座发育过程中的关键基因类别。对子座不同生长发育时期的基因进行差异表达分析发现,PD2和SD3相比差异表达基因最多,其中上调基因1073个,下调基因1036个,MD1和SD3相比差异表达基因最少,上调...     

金水宝胶囊生产过程中质量控制方法的建立

目的:完善金水宝胶囊生产过程中的质量控制体系,为该制剂的后续研究与应用提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),腺苷、鸟苷、尿苷含量测定的色谱条件为流动相甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~14 min,100%~99%B;14~19 min,99%~89%B;19~39 min,89%~85%B),流速0.4 m L·min^-1,柱温30℃,进样量10μL,检测波长260 nm。麦角甾醇含量测定的色谱条件为流动相甲醇-水(98∶2),流速1 m L·min^-1,柱温25℃,进样量10μL,检测波长283 nm。结果:发酵虫草菌粉不同生产阶段样品的指纹图谱中主要色谱峰差异性较小。腺苷、鸟苷、尿苷的线性关系良好(R2均>0.999);三者的加样回收率分别为106.06%,101.25%,105.88%,RSD均<3.0%。于2016-2018年各抽取的20批样品中腺苷、麦角甾醇的含量均符合2015年版《中国药典》的要求,鸟苷、尿苷的质量分别为0.97~1.36,0.67~1.38 mg/粒。结论:市面所售金水宝胶囊质量较为稳定。建立的方法可用于检测金水宝胶囊的质量,且操作简便、稳定可靠,可为发酵虫草菌粉类产品的检测提供参考。