蓝萼香茶菜中蓝萼甲素提取工艺研究

目的：考察蓝萼香茶菜中蓝萼甲素提取工艺。方法：采用L9（34）正交试验法优选甲醇回流提取时间、提取次数、固/液比;采用HPLC测定蓝萼甲素含质量。结果：蓝萼香茶菜甲醇提取的最佳工艺条件为（A2B2C3）,即提取时间为1.5h,回流提取2次,固/液比为1：15时,测得的蓝萼甲素含质量最高。结论：该法提取与测定蓝萼甲素含质量准确,数据可靠,适用于蓝萼香茶菜中蓝萼甲素含质量测定。     

亲水作用色谱-蒸发光散射检测器联用法同时测定巴戟天中5种低聚糖的含量

目的:采用亲水作用色谱-蒸发光散射检测器联用法同时测定巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1 F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素5种低聚糖的含量.方法:采用Waters XBridgeTM Amide(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)亲水性作用色谱柱;以乙腈(A)-0.2％三乙胺溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速0.8 mL·min;柱温40℃;以Waters 2424 ELSD检测,漂移管温度90℃,气压275.79 kPa.结果:5种低聚糖分别在2.128 ～21.28 μg(r=0.999 3),1.864～18.64 μg(r=0.999 6),1.92 ～19.2μg(r=0.999 8),1.912～19.12 μg (r=0.999 5),2.368 ～ 23.68 μg(r=0.999 4)线性关系良好,其回收率在92.81％～102.8％ (n =6).结论:该方法简单、准确,具有良好的重复性,为有效评价巴戟天药材的质量提供了分析方法.     

蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及凋亡的影响

目的:研究蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。方法:MTT法测定蓝萼香茶菜乙素对AGZY的细胞毒作用;PI染色、流式细胞术观察蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:蓝萼香茶菜乙素对AGZY细胞的IC50为0.11mmol/L,且随着蓝萼香茶菜乙素剂量增加对AGZY细胞抑制作用增强;蓝萼香茶菜乙素可以降低AGZY细胞G2/M期细胞数量,阻止细胞分裂。结论:蓝萼香茶菜乙素可阻滞AGZY细胞的生长,阻滞细胞进入G2/M期,并诱导AGZY细胞凋亡。     

基于翻转肠囊法的巴戟甲素吸收机制的实验研究

目的 研究巴戟甲素(DFM)在大鼠小肠不同肠段中的吸收差异.方法 在不同肠段的肠管外翻模型中加入DFM 1 mg/mL的Krebs液,在不同时间点取样并以HPLC-ELSD法测定囊内药物浓度,比较各小肠段对DFM吸收的差异性.结果 DFM在不同肠段均有吸收,其吸收速度常数(ka)分别按照回肠、十二指肠、空肠的顺序下降.结论 DFM在大鼠小肠各个肠段的吸收无显著性差异(P>0.05).     

蓝萼香茶菜根化学成分研究

目的：分离鉴定蓝萼香茶菜根化学成分。方法：乙醚提取,硅胶及ODS柱色谱分离;IR,NMR,MS方法确定结构。结果：分离得到4个化合物,为蓝萼甲素、齐墩果酸、乌苏酸和胡萝卜苷。结论：齐墩果酸和胡萝卜苷为首次在该植物根中分离得到。     

蓝萼香茶菜化学成分研究Ⅱ

 目的 分离鉴定蓝萼香茶菜化学成分。方法 95%乙醇提取,硅胶及ODS柱层析分离,IR,NMR,MS方法确定结构。结果 分得5个化合物Ⅰ～Ⅴ分别鉴定为蓝萼甲素(glaucocalyxin A)、蓝萼乙素(glaucocalyxin B)、蓝萼丁素(glaucocalyxin D)、胡萝卜苷(daucosterol)、芦丁(rutin)。结论 分得的5个化合物中芦丁和胡萝卜苷为首次从该植物中分离得到。     

蓝萼香茶菜总二萜对实验性兔心肌缺血相关蛋白的影响

目的:探讨蓝萼香茶菜总二萜(total diterpenes of cycalyx herb,TD)对实验性兔心肌缺血/再灌注损伤相关蛋白的保护作用。方法:将健康日本大耳白兔18只分为3组,A:假手术(Sham)组;B:缺血/再灌注(I/R)组;C:TD组。光镜和电镜下观察3组兔心肌细胞结构变化情况;检测再灌注180 min时3组兔血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及心肌MDA、SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和Caspase 3活性变化情况;WB法检测3组兔心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的含量;评价TD预处理对在体兔心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)动物模型的保护作用。结果:TD组与I/R组相比:血清MDA、心肌MDA和Caspase 3下降(P0.05),血清SOD、心肌SOD和GSH-Px增加(P0.05),Bax蛋白表达下降(P0.05),Bcl-2蛋白表达增加(P0.05)。结论:TD能减少实验性兔MI/RI的促凋亡蛋白Bax的表达,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,提示该药对心肌细胞凋亡有保护作用。     

蓝萼香茶菜化学成分及抗肿瘤活性研究

目的研究药用植物蓝萼香茶菜的化学成分,为进一步研究其抗肿瘤活性提供依据。方法蓝萼香茶菜叶的70%丙酮提取物的乙酸乙酯萃取部分,应用反复硅胶柱层析、重结晶等方法分离纯化,并用波谱分析方法鉴定分离得到的化合物的结构;用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测评价了其中7个二萜化合物的体外抗肿瘤活性,并用荧光显微镜观察了化合物1对肿瘤细胞的形态学影响。结果从蓝萼香茶菜叶中分离鉴定了12个已知化合物,其中7个化合物为对映-贝壳杉烷类二萜:蓝萼香茶菜甲素(1)、蓝萼香茶菜乙素(2)、蓝萼香茶菜丁素(3)、蓝萼香茶菜戊素(4)、毛叶醇(5)、对映-贝壳杉-3β,16β-二醇(6)和16R-甲基-3α,7α,14β-三羟基-对映-贝壳杉-15-酮(7);2个化合物为三萜:2α-羟基乌苏酸(8)和齐墩果酸(9);1个黄酮类化合物:胡麻素(10);2个有机酸:正十四烷酸(11)和正十六烷酸(12)。MTT法检测结果发现,化合物1、2和3对人肝癌Hep G2细胞和人宫颈癌Hela细胞显示较强的体外抗肿瘤活性;化合物1处理Hep G2细胞后荧光倒置显微镜下观察到细胞凋亡现象。结论河南辉县产药用植物蓝萼香茶菜富含有抗肿瘤活性的对映-贝壳杉烷类二萜,是一类具有前景的抗肿瘤先导化合物。化合物1通过诱导细胞凋亡抑制肿瘤细胞增殖。     

HPLC法同时测定胃复春片中蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丁素

目的建立HPLC法同时测定胃复春片(红参、香茶菜、枳壳)中蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丁素成分定量方法。方法胃复春片甲醇提取物采用kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-甲醇(B)-水(C),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长232 nm。结果蓝萼甲素、蓝萼乙素及蓝萼丁素分别在48.68～2 434 ng,32.96～1 648 ng,30.56～1 528 ng,范围呈现良好的线性关系,r均为1.000 0;平均加样回收率在98.3%～100.7%之间;蓝萼甲素、蓝萼乙素、蓝萼丁素的重复性试验RSD均小于2%。结论本方法可靠稳定,可以很好地用于胃复春片中蓝萼甲素、蓝萼乙素以及蓝萼丁素的定量测定。     

基于MTT法的波棱瓜子抗肝纤维化用量初步研究

目的制定波棱瓜子质量控制标准含量上下限,以此确定波棱瓜子用于肝纤维化治疗的合理用量范围。方法本文采用中压制备色谱收集不含波棱甲素(herpetrione,PEDX)的阴性样品,加入不同剂量的PEDX,制备不同浓度梯度的PEDX系列样品溶液,建立PEDX系列样品HPLC指纹图谱,四甲基偶氮唑盐(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法观察PEDX系列样品溶液对人肝星状细胞系LX-2细胞增殖的影响,并比较PEDX系列样品溶液与波棱瓜子提取物溶液的抑制率差异。结果 (1)指纹图谱结果显示,不同浓度梯度的PEDX系列样品相似度良好;(2)PEDX系列样品能抑制LX-2细胞增殖,加入样品的剂量M与细胞抑制率I值呈现一定的"量—效"关系,确定了波棱瓜子中药效成分PEDX的最小有效用量为0.68 mg,最大有效用量为8.2 mg。结论波棱瓜子用于肝纤维化治疗的合理用量范围为3.27~39.42 mg。