昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞向胰岛样细胞的诱导分化

目的研究正常昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞向胰岛样细胞分化的诱导条件。方法取正常成年昆明小鼠胰腺导管上皮进行原代培养,利用细胞贴壁时间的差异在培养24、48、72 h连续换液除去腺体细胞,在含2%胎牛血清的培养条件下除去成纤维细胞,使可以在无血清培养基中生长的胰腺导管上皮样细胞形成优势生长。在此条件下培养并传代。取第三代细胞以无血清诱导培养基促使其分化。取诱导后3、5、7、14 d的细胞进行免疫细胞化学染色鉴定。ELISA检测诱导生成的胰岛样细胞在高糖刺激下分泌胰岛素的功能。结果经过无血清诱导培养基诱导7 d后,胰腺导管上皮样细胞开始向胰岛素分泌细胞分化,胰岛素抗体染色阳性。14 d胰岛素抗体染色阳性细胞明显增多。该细胞在高糖刺激下可以分泌胰岛素。结论昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞经过无血清培养基诱导可以向胰岛样细胞方向分化。并且该胰岛样细胞在高糖刺激下具有分泌胰岛素的功能。     

胰岛干细胞研究进展

胰岛干细胞移植是治疗糖尿病的一条新途径，它可避免胰岛移植治疗糖尿病所面临的胰腺供体匮乏及长期使用免疫抑制剂而产生严重副作用的问题。本文将对有关胚胎干细胞及成体干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞，胰岛干细胞的分子标志，及胰岛干细胞的临床应用做一简要概述。     

人胰岛微血管和A细胞的微机三维重建

采用微机辅助三维重建的方法重建了人胰岛的微血管的A细胞，结果表明，所使用的软件重建速度快，图像速真，清晰度高，视觉效果好，可对重建物体进行多角度，多轴旋转，也可进行任何部位的切割，以便能进一步了解胰岛内各结构的详细情况，为进一步研究胰岛内微血管和细胞的立体位置关系提供方法学基础。     

恶性胰岛细胞瘤肝转移一例

患者女性 ,6 2岁 ,胰岛细胞瘤切除术后 6年 ,因腹胀、消瘦、发现上腹部巨大包块于 1998年 7月入院。ＣＴ检查见肝内多发低密度灶 ,疑诊转移性病变 ,但定性诊断困难。超声检查见全肝为大小不等的囊肿占据 ,囊壁薄而规整 ,未见实性占位 (图 1)。经超声引导分别对 3个囊肿穿刺抽液行细胞组织活检。从 1个囊内抽出黄色混浊液 ,病理检查为泡沫细胞 ,蛋白浆液 ;另 2个囊内抽出暗红色混浊液 ,内可见间皮细胞 ,少数腺上皮细胞及中性粒细胞。在肝及囊壁取活检 ,组织学检查见肝细胞 ,部分细胞有异型性。以上检查均未见肿瘤细胞 ,诊断仍然不明确。 1周…     

实验性急性胰腺炎大鼠胰岛微血管的电镜观察

目的 :了解实验性急性胰腺炎大鼠早期胰岛微血管的超微结构变化 ,并探讨其与急性胰腺炎的关系。方法 :采用皮下注射超大剂量雨蛙素诱发大鼠急性水肿性胰腺炎 ,用扫描电镜和透射电镜观察急性胰腺炎早期胰岛微血管的形态和变化。结果 :①在透射电镜下 ,胰岛毛细血管内皮细胞肿胀 ,管腔狭窄、不规则 ,内皮细胞“窗孔”数量增加。②在扫描电镜下 ,胰岛毛细血管外形不规则 ,与外分泌部毛细血管之间的吻合明显减少 ;毛细血管表面可见铸型剂形成的泡状物。结论 :急性胰腺炎早期即有胰岛微血管损伤的表现 ,推测其与胰腺炎的进展密切相关。     

猫胰岛细胞的分离纯化和培养

目的：建立猫胰岛细胞分离纯化和体外培养的方法。方法：在自制玻棒持续振荡下常规分离胰岛细胞,进行单层细胞培养和组织块培养。采用差速贴壁法、碘乙酸法、消化时间差法去除培养中的成纤维细胞。动态收集单层细胞培养液,分别用放射免疫法和比色法检测胰岛素和淀粉酶含量。光镜下观察5-30d细胞生长情况。分别对培养第5、15、21天的细胞进行葡萄糖负荷试验、组织块培养的细胞进行透射电镜检查。结果：猫胰岛细胞在体外培养可保持良好的生物学活性3周或3周以上（组织培养）。结论：在国内首次建立的猫体外胰岛细胞培养方法可行可靠,体外培养第7-25d的细胞形态和功能良好,是进行实验研究的极好材料。     

内毒素对大鼠胰岛细胞凋亡及其意义的研究

目的：探讨内毒素对大鼠胰岛细胞凋亡作用的意义。方法：采用单细胞凝胶电泳和DNA凝胶电泳技术,分析外源NO供体（硝普钠）和LPS对离体胰岛细胞的凋亡及胰岛素合成与分泌的影响。结果：体外试验显示,外源NO明显引起胰岛细胞DNA断裂,出现慧星尾和凋亡梯状带,并呈剂量依赖关系,高浓度NO（60mmol/L,SNP)可引起胰岛细胞DNA随机降解,外源NO强裂抑制葡萄糖刺激β－细胞的胰岛素合成与分泌,LPS离体条件下,对胰岛细胞凋亡作用不明显。结论：LIPS通过整体作用诱导炎症细胞和胰岛细胞iNOS表达,产生NO介导胰岛细胞凋亡,从而抑制胰岛素合成与分泌。     

成年猪胰岛分离方法的改进

目的 :开发成年猪胰岛分离方法。方法 :取成年猪胰腺体尾部 ,胰管内注入冷 0 .1 %胶原酶消化液 ,在 38.5℃水浴箱中消化后 ,放入 4℃ Hanks液中分离并用 60 0μm的滤过网过滤回收。残留的组织重新悬浮在冷 Hanks液中 ,并放入 Ricordi′s chamber内振荡 5min后再次过滤回收。用Ficoll不连续密度液梯度离心法进行胰岛纯化。结果 :纯化前、后胰岛收获量分别为 ( 850 5± 3349)g-1〔IEQ:( 4 2 53± 2 732 ) g-1)、( 2 334± 1 2 2 3) g-1〕,纯度 >80 %。胰岛收获量与消化后的消化液胰蛋白酶活性显示了弱的负相关 ( r=- 0 .44,P=0 .1 3) ,胰岛收获量≥ 80 0 0 g-1组的消化后消化液胰蛋白酶活性明显低于胰岛收获量 <80 0 0 g-1( 78.3± 2 6.7vs1 37.5± 48.4BAEEU,P<0 .0 5)。结论 :我们采用的胰岛分离方法能够获得大量的猪胰岛细胞 ;胰蛋白酶活性影响胰岛收获量。     

琼脂糖微囊化成猪胰岛异种移植实验研究

目的观察实验性糖尿病大鼠腹腔内移植琼脂糖微囊化成猪胰岛治疗效果。方法以琼脂糖作为制备微囊的材料,用相分离方法包被成猪胰岛,将18只糖尿病大鼠随机分为3组对照组、未微囊化胰岛移植组、微囊化胰岛移植组,分别进行腹腔内胰岛移植。结果移植前3组血糖水平无显著差异,移植后7天时,3组血糖分别为(22.67±1.15)mmol／L,(18.58±2.62)mmol／L和(12.38±2.68)mmol/L,微囊化胰岛移植组与前2组相比均有显著差异,且生存期明显长于前2组。结论琼脂糖微囊化成猪胰岛可存活于糖尿病大鼠体内,并且具有生物活性。     

ICA在糖尿病诊疗中的应用研究

用免疫酶法分析了糖尿病患者及甲状腺疾病患者血清中胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）的水平。结果为经胰岛素吸收后,ＩＤＤＭ组阳性率为４６．７％（最高）,ＮＩＤＤＭ组阳性率为１３．３％,甲状腺疾病组（其中１例Ｇｒａｖｅｓ’病伴糖尿病ＩＣＡ阳性）阳性率为４％,健康组０。统计学分析,Ｐ〈０．０５,具有显著性差异,表明ＩＣＡ是Ⅰ型糖尿病的特异性免疫标志物,ＩＣＡ检测作为对ＩＤＤＭ与ＮＩＤＤＭ的鉴别诊断,特别是对ＬＡＤＡ