毛乳头细胞凝集性生长与细胞DNA合成的研究

目的 了解毛乳头细胞凝集性生长状态对细胞DNA合成的影响。方法 通过培养的毛乳头细胞诱导形成凝集性生长状态后,进行~3H—TdR掺入,放射显影观察细胞DNA合成情况。结果 细胞凝集性生长区DNA合成功能较非凝集性生长区明显增强。结论 毛乳头细胞呈凝集性生长后,其增殖能力增强,活性增加。     

P物质对培养的大鼠睾丸细胞睾酮分泌的影响

目的　研究P物质 (SP)对睾丸细胞分泌睾酮 (T)的影响。方法　应用细胞培养技术和放谢免疫测定法研究不同浓度的P物质对睾丸细胞分泌睾酮是否有直接作用。结果　实验组 (加入SP)的培养液T的含量比对照组 (未加SP)明显减少。实验组分别与对照组进行两两比较 (t -test)并采用单因素方差分析 ,P均 <0 0 1差异有高度的显著性。结论　P物质对培养的大鼠睾丸细胞分泌T有直接抑制作用 ,且随着浓度增加 ,抑制作用增强     

脐带血清与细胞因子在造血细胞培养中的效应比较

目的：比较人脐带血清（CBS）与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法：在体外人骨骨CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM、CAFC、LTC－IC培养体系中,加入CBS或／和细胞因子,观察所形成的集落。结果：与细胞因子比,CBS中含有较高的GM－CSF、EPO、SCF、IL－3、IL－6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论：CBS内的造血刺激活性能刺激CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM的生长,使CAFC、LTC－IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。     

HCV细胞培养系统及其在中草药提取物抗HCV研究中的应用

应用中草药治疗丙型肝炎报道较多,然而这些研究大多采用中药复方制剂进行临床治疗,疗效局限。由于一种中药含有多种活性物质,某些物质之间在体内甚至有相互拮抗的作用,因此,对于治疗结果的作用机理很难阐述清楚。简述了HCV假病毒、复制子和全长细胞培养系统的研究现状,并对应用HCV RNA细胞模型研究中药单体或有效成分进行抗HCV实验研究的相关进展进行了综述,为中药治疗丙型肝炎研究提供新思路。     

柳州地区6876例产前诊断羊水细胞染色体核型分析

目的分析妊娠中期进行产前诊断的高危孕妇羊水细胞染色体核型,了解此期异常核型出现的频率及类型。方法6887例具备产前诊断指征的妊娠妇女,在知情选择的情况下行羊膜腔穿刺术及染色体核型检测。结果6876例羊水细胞培养成功,成功率为99．84％（6876／6887）。在6876例羊水细胞培养成功的染色体核型中,检出异常核型107例,异常率为1．56％,常见核型为三体型,占异常核型47．66％。结论羊水细胞学检查作为一项产前诊断技术对于指导优生优育,降低缺陷儿的出生具有重要意义。     

人工神经网络预测东北红豆杉愈伤组织生长的研究

运用人工神经网络技术对东北红豆杉愈伤组织的培养条件进行预测，探讨将植物增素（包括２，４－Ｄ、ＮＡＡ、ＫＴ、６－ＢＡ及ＧＡ３）的均匀设计实验数据构筑神经网络的训练样本，建立了东北红豆杉愈伤组织生长状况的的预报模型。结果表明：在满足一定精度的前提下，采用均匀设计构筑神经网络的训练样本能够有效地减少训练样本数量、缩短训练时间；此外，与回归方法相比，人工神经网络的预测结构与实验结果吻合得更好。利用神经网络     

骨髓间充质干细胞移植对小型猪急性心肌梗死模型治疗作用的初步研究

目的 观察自体骨髓间充质干细胞(MSC)心肌内移植对小型猪急性心肌梗死(AMI)的治疗效果。方法 30只小型猪制备AMI模型,实验组22只取骨髓分离MSC,体外培养扩增后注入至缺血坏死心肌周围,对照组8只输注等量生理盐水,1个月后比较两组的生存率、存活心肌来源和功能性蛋白质的表达。结果实验组存活率100％,存活心肌增加并检测到5溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记物,心肌钙蛋白I(cTnI)等心肌功能性蛋白质的表达。结论 AMI小型猪自体骨髓MSC心肌内移植后,梗死区出现MSC来源的新生心肌,并具有正常心肌工作特性。     

热和紫外线照射对丙型肝炎病毒JFH-1株灭活效果的研究

目的 应用HCV JFH-1株细胞培养系统,研究热和紫外线照射对HCV的灭活效果.方法 感染性滴度为2.5×104 Ffu/ml的丙型肝炎病毒JFH-1株(HCV JFH-1 strain)原液,经56℃水浴或紫外线照射不同时间后,感染Huh7-25-CD81细胞系,应用间接免疫荧光法测定病毒感染性滴度的动态变化.若被感染的细胞经旨传3代后,用问接免疫荧光法检测为阴性,则判定病毒原液已被完全灭活.结果 感染性滴度为2.5×104 FFU/ml的HCV JFH-1株原液,经56℃水浴孵育10 min、20 min、30 min后,其细胞的感染性滴度分别降至1.6×103FFU/ml、3.1×102FFU/ml和3.3×10FFU/ml;该HCV JFH-1株原液暴露于紫外灯下(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm2)30 cm处照射15 s、30 s、45 s后,其细胞的感染性滴度分别降至1.0×103FFU/ml、1.1×102FFU/ml和2.7×10FFU/ml.经56℃水浴孵育40 min或紫外灯下照射(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm2)1 min后,应用间接免疫荧光法检测为阴性,被感染的细胞经盲传3代后,间接免疫荧光法检测仍为阴性,证明该病毒液已被完全灭活.结论 HCV JFH-1株对热和紫外线照射较为敏感,56℃下40 min或紫外线照射(波长253.7 nm,辐照强度≥60 μW/cm2,距离30 cm)1 min,可完全灭活HCV JFH-1株.     

双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞

OBJECTIVE: To establish a method for purifying and culturing human multipotent adult progenitor cells (MAPCs) in vitro. METHODS: Mononuclear cells were separated from the bone marrow of healthy adult volunteers by density gradient centrifugation and cultivated in adherent culture. The plastic-adherent cultured bone marrow cells were isolated by magnetic-activated cell sorting with CD45 and GlyA magnetic microbeads, and the purity of CD45-/GlyA- cells evaluated by flow cytometry. Phase-contrast microscopy was used to detect morphological changes of the cells in different stages of culture. RESULTS: Approximately (5-10)x10(4)/ml MAPCs could be separated from every 1x10(6)/ml bone marrow mononuclear cells by magnetic- activated cell sorting. The viability of the cells before and after separation was (96.7+/-1.7)% and (96.0+/-2.4)%, respectively. The isolated MAPCs grew well in a self-prepared culture medium till the16th passage. The purity of CD45-/GlyA- separated from the bone marrow was more than 98% as examined by flow cytomety even till the 12th passage. CONCLUSIONS: MAPCs derived from adult human bone marrow can be purified by magnetic-activated cell sorting with CD45 and GlyA microbeads and retain the undifferentiated state for a long time. The self-prepared culture medium is appropriate for MAPCs cultures in vitro.     

分离培养汗腺导管部细胞的新方法

目的 探讨建立汗腺导管部细胞分离的新技术.方法 成人仞厚皮片和薄中厚皮片标本(n=10)剪碎后用Ⅱ型胶原酶消化12 h,吸取并转移汗腺导管到培养皿中贴壁培养.应用流式细胞仪、免疫组织化学染色和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以及蛋白印迹(Western Blot)分析检测培养细胞的汗腺特异标志CEA、CK8、CK18、CK19抗原表达,并用膜片钳技术检测培养细胞膜上阿米洛利(amiloride)敏感Na~+离子通道,用t检验比较分析两组间实验数据.结果 汗腺导管贴壁48 h后,围绕汗腺导管出现单层扁平的上皮细胞,生长2～4周融合成片.流式细胞学检查示原代培养汗腺导管细胞与原代培养汗腺细胞在癌胚抗原(CEA)阳性率[(90.26±1.12)%vs.(89.70±1.43)%]和细胞角蛋白8(CK8)阳性率[(94.41±1.84)%vs.(93.65±1.63)%]上,差异无统计学意义(P>0.05).形态学染色汗腺导管细胞抗CEA、CK8、CK18、CK19染色均为阳性.RT-PCR表明原代培养汗腺导管细胞表达CEA、CK8、CK18、CK19基因,Western Blot清晰显示CEA条带,CK8、CK18、CK19蛋白条带.膜片钳检测表明原代培养汗腺导管细胞膜上存在amiloride敏感Na~+离子通道.无血清表皮细胞EpiLife培养基在汗腺导管细胞生长过程中抑制成纤维细胞生长.结论 从仞厚皮片和中厚皮片分离培养汗腺导管部细胞的方法较传统的分离方法具有简便快速的优点,EpiLife培养基可抑制培养过程中成纤维细胞的生长,可以在体外建立最佳汗腺导管细胞模型.