NLRP3/IL-1β通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制

目的：探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/白介素-1β(IL-1β)通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制。

方法：收集2015-09/2018-03我院眼科收治的增殖性糖尿病视网膜病变患者49例49眼(研究组)和特发性黄斑裂孔患者41例41眼(对照组)。检测研究组患者视网膜增殖前膜与对照组患者黄斑前膜中NLRP3蛋白表达情况、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)水平与超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定两组患者玻璃体中IL-1β与IL-18浓度。

结果：研究组患者视网膜增殖前膜中NLRP3蛋白阳性表达率明显高于对照组患者黄斑前膜(90% vs 5%,P<0.05),且研究组患者视网膜增殖前膜中ROS与MDA水平明显升高,而SOD活性明显降低。研究组患者玻璃体中IL-1β、IL-18浓度(30.84±7.15、97.61±15.73pg/mL)均明显高于对照组(4.63±0.92、52.07±11.38pg/mL)。

结论：NLRP3与IL-1β在增殖性糖尿病视网膜病变组织中呈高表达,NLRP3/IL-1β通路可上调炎性因子与氧化因子表达水平,促进疾病发展。     

破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达

目的：把RAW264.7和人外周血CD14+ 诱导成破骨样细胞,检测破骨细胞在成熟过程中钠氢转运蛋白2（Na+-H+ An－tiporter 2,NHA2）的转录表达情况,并定位其表达位置。方法：细胞因子RANKL、M-CSF在体外诱导RAW264.7和人外周血CD14+细胞发育成破骨样细胞;RT-PCR检测NHA2在诱导过程中转录水平上所发生的变化;Western blot检测诱导前后此蛋白表达情况;细胞原位荧光染色对其表达进行细胞精确定位。结果：RAW264.7和人外周血CD14+ 细胞被RANKL、M-CSF诱导成破骨样细胞;RT-PCR结果显示NHA2随着破骨细胞的分化成熟转录水平不断加强;Western blot结果显示此蛋白只表达于成熟的破骨细胞中;细胞原位荧光染色结果显示这个蛋白主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中。结论：NHA2作为盐离子载体主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中,通过控制线粒体盐离子的代谢平衡来影响破骨细胞的发育分化     

Bmal1对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其相关机制

目的探讨Bmal1对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其相关机制。方法选择健康雄性清洁级SD大鼠65只, 采用数字表法随机纳入非糖尿病假手术组(N-S组)10只、非糖尿病缺血再灌注组(N-I/R组)10只、非糖尿病+SR8278缺血再灌注组(NS-I/R组)10只;剩余35只采用高脂饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素方法制备2型糖尿病模型, 取造模成功的大鼠30只, 采用数字表法随机分为糖尿病假手术组(DM-S组)、糖尿病缺血再灌注组(DM-I/R组)、糖尿病+SR8278缺血再灌注组(DMS-I/R组), 每组10只。6组大鼠按观察项目不同随机分为A、B亚组, 每组5只。各组大鼠制备心肌缺血再灌注模型, 其中N-S组和DM-S组仅模拟手术过程, 不结扎前降支;NS-I/R组、DMS-I/R组大鼠于心肌缺血再灌注模型制备前7天开始腹腔注射孤儿核受体Rev-erbα拮抗剂SR8278(50 mg/kg), 每天1次×7 d。心肌缺血再灌注模型成功后维持灌注24 h, 取各组A亚组大鼠, 分离出左心室行病理染色检查和心肌超微结构透射电镜观察, 分离左心室后的心脏制备病理切片进行心肌梗死灶体积的...     

癌蛋白YAP1在宫颈癌中的研究现状与进展

Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)是Hippo信号通路下游中的一个转录共激活因子,既可参与细胞生长、发育及DNA修复,也可作为癌基因促进细胞异常增殖及恶性转化。YAP1表达与宫颈癌临床分期和淋巴结转移关系密切,可作为宫颈癌预后的独立影响因素。本文对YAP1在宫颈癌中的研究现状与进展作一综述,探讨YAP1作为治疗靶点在宫颈癌患者预后及治疗中的意义。     

丝氨酸蛋白酶Omi/HtrA2与细胞凋亡

Omi/HtrA2是一种定位于线粒体膜间隙的丝氨酸蛋白酶,是一种凋亡调节因子,释放到线粒体外参与细胞凋亡.它有双重功能:一方面阻止X染色体连锁凋亡抑制蛋白,促进caspase级联反应;另一方面作为丝氨酸蛋白酶诱导非caspase依赖的细胞凋亡.该文介绍了Omi/HtrA2的结构、体内分布以及参与细胞凋亡的机制和在相关疾病中的作用.     

全肠外营养诱导线粒体应激介导的肝细胞凋亡的研究

目的探讨全肠外营养诱导新生乳猪线粒体应激介导的肝细胞凋亡的作用机制。方法以肠内营养乳猪作为对照,建立全肠外营养新生乳猪实验动物模型,喂养7d后获取肝脏组织,分离原代肝细胞,部分肝组织应用琼脂糖凝胶电泳检测肝细胞DNA凋亡条带,通过凋亡蛋白活性测定、免疫组织化学、Western blot印迹法等检测全肠外营养诱导肝细胞发生凋亡的蛋白表达。结果全肠外营养组乳猪肝细胞活率为（49±21）％,明显低于肠内营养组的（88±14）％（P〈0．05）。全肠外营养乳猪肝组织DNA电泳呈现典型梯形凋亡条带,细胞凋亡ELISA检测发现细胞凋亡定量高达对照组的2．6倍,半胱天冬氨酸蛋白酶（caspase）-3活性也明显升高,与肠内营养相比增高9．9倍,但ATP酶活性下降了24％。Westernblot显示全肠外营养组肝组织中相关凋亡蛋白酶PARP、caspase-9和-7蛋白酶原被活化,Bcl-2蛋白表达量下调,Bax蛋白量表达上调;同时线粒体内细胞色素C释放至胞浆内,使胞浆内细胞色素C表达水平升高。免疫组织化学也显示全肠外营养组Bax表达上调。结论全肠外营养可以损伤肝组织,并通过线粒体应激信号传导通路诱导肝细胞凋亡。     

尿苷胞苷激酶2调控肺腺癌发生发展的机制研究

背景 尿苷-胞苷激酶2(uridine-cytidine kinase 2,UCK2)在多种类型癌组织中过表达,其在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用及其调控机制研究较少。目的 研究UCK2对LUAD发生发展的影响并探究其可能作用机制。方法 利用TCGA数据库中LUAD的RNA-seq数据,通过单因素独立预后分析筛选差异基因,与临床数据结合,筛选与LUAD分期和预后相关的基因。CCK-8和划痕试验验证UCK2对LUAD细胞的影响。通过GSEA分析UCK2对LUAD生长调控的可能分子机制,免疫印迹实验验证UCK2对LUAD细胞中mTOR通路的调控作用。糖摄取、乳酸和ATP测定验证UCK2通过mTOR通路对LUAD细胞糖酵解的影响。结果 对TCGA数据库的分析显示UCK2对LUAD患者预后具有较高预测价值。细胞实验结果显示,与对照组比较,过表达UCK2组A549和Calu3细胞增殖能力、迁移能力显著增加(P<0.001)。GSEA分析显示UCK2在LUAD中正向调控mTOR通路。进一步Western blot实验显示UCK2在A549细胞中可上...     

姜黄素通过TGF-β1信号通路抑制人肺泡横纹肌肉瘤细胞株PLA-802的机制研究

目的：观察姜黄素对人横纹肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma,RMS)细胞株PLA-802的抑制作用,以及对细胞内TGF-β1/Smad 4的表达的影响,探索姜黄素抑制RMS细胞生长的机制。方法：体外培养人RMS细胞株PLA-802,并用不同浓度的姜黄素作用不同的时间。用MTT检测姜黄素对PLA-802细胞生长情况的影响,用流式细胞术检测细胞周期的变化情况,RT-PCR和Western blot分别检测细胞内TGF-β1和Smad 4的mRNA和蛋白水平的表达。结果：MTT结果显示姜黄素显著降低了PLA-802细胞的存活率（P<0.05)。流式细胞结果表明姜黄素明显降低了S期而增加了G1期(P<0.05)。而TGF-β1和其下游因子Smad4的mRNA和蛋白水平的表达也明显受到姜黄素的抑制,且这种抑制作用呈浓度-时间依赖性(P<0.05)。结论：姜黄素发挥其抑制PLA-802细胞的作用可能是通过抑制TGF-β1信号通路,这将为临床治疗肺泡RMS提供新的思路。