化合物构效关系的模糊极小极大神经网络识别研究

应用模糊极小极大神经网络研究了化合物复杂结构和性能（QSAR）之间的关系，用该法进行几组化合物致癌的识别，结果优于线性回归的方法，对此作出一些分析。     

hEGF和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定

目的:将人表皮生长因子(hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的C端连接,构建出既可与肝素结合,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白,并在大肠杆菌中高效表达。方法:将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF5端的231bp的片段连接,克隆到表达载体pJN,构建出含融合基因的表达质粒pJRH。将pJRH转化BL21(DE3)表达菌株,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL)。Westernblot检测表达产物免疫学活性。表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化。结果:融合蛋白表达产量为30%,融合蛋白不仅能与肝素结合,而且具有促细胞增殖的活性。Westernblot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性。融合蛋白的等电点为5.2。结论:本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性。作为一个新的活性因子,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础。     

甘丙素在急性心肌梗塞发病学中的意义

本文测定了３１例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血浆甘丙素（ＧＡＬ）的放免活性，结果显示ＡＭＩ患者急性期各次血浆ＧＡＬ水平明显高于对照组，伴高血压、糖尿病和心功能不全者升高更显著，ＧＡＬ与内皮素（ＥＴ）、血糖水平均呈正相关。实验性心肌梗塞大鼠血浆ＧＡＬ、血清肌酸激酶（ＣＫ）、ＣＫ同功酶（ＣＫ－ＭＢ）、丙二醛（ＭＤＡ）含量亦明显高于对照大鼠。用ＧＡＬ抗血清治疗心肌梗塞大鼠，减少坏死面积４５．４％和缩小了梗塞范围４７．１％，亦明显降低了血浆ＧＡＬ水平，抑制血清ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ、ＭＤＡ活性，提示早期阻断ＧＡＬ的生物学效应，对防治ＡＭＩ有重要意义。     

细胞周期蛋白E对乳腺癌细胞MCF-7生长及周期相关基因的影响

观察细胞周期蛋白（ｃｙｃｌｉｎ）Ｅ的表达对乳腺癌细胞ＭＣＦ－７生长及其他周期相关基因的影响。方法构建正义和反义ｃｙｃｌｉｎ Ｅ ｃＤＮＡ真核表达载体,并采用ｌｉｐｏｆｅｃｔ ＡＭＩＮＥ转染,将其导入ＭＣＦ－７细胞,获得稳定表达正义及反义ｃｙｃｌｉｎＥ的细胞系,经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测有外源性片片段的插入及表达,并作细胞生长曲线、四甲偶氮唑盐（ＭＴＴ）法和流式细胞计数分析;用     

大鼠肝缺血再灌注损伤对心脏能量代谢和结构的影响及其机制

目的：探讨肝缺血再灌注损伤对心脏能量代谢和结构的影响及其可能的发生机制。方法：健康雄性Wistar大鼠48只，随机分为对照组、缺血30 min组（I组）及缺血30 min再灌注即刻组、2 h组、4 h组和6 h组（I/R组、I/R 2 h组、I/R 4 h组和I/R 6 h组），每组8只。用偶氮显色法测定血清中的内毒素，用放射免疫法测定心肌组织胰岛素和胰岛素抗体，取心肌制备组织匀浆测丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO），乳酸含量。 结果：在肝缺血再灌注损伤过程中，内毒素在I组和I/R组达到高峰，随着再灌注时间的延长逐渐下降，但仍高于对照组（P<0.05）。I组及I/R各组MDA的含量明显高于对照组，在I/R 2 h组、I/R 4 h组、I/R 6 h组差别更为明显（P＜0.05）；再灌注各组MPO活性明显高于对照组、I组（P＜0.05）；随着再灌注时间的延长，心肌组织中乳酸含量明显增加（P＜0.05），但在I/R 6 h组呈下降趋势（P＜0.05）；胰岛素的含量在I/R 4 h组和I/R 6 h组明显下降（P＜0.05）；而胰岛素抗体在各组间无显著差异（P＞0.05）。结论：肝缺血再灌注损伤过程中，肠源性内毒素吸收入血及肝脏解毒功能的降低所致的内毒素血症可能是引起心脏能量代谢和结构改变的始动环节。     

慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗前PBMC细胞因子的研究

目的 研究准备抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者的免疫特点.方法 将30例慢性丙型肝炎患者和10例正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的浓度.结果 (1)慢性丙型肝炎患者PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P＜0.05),没有检测到IL-2、IL-4、IL-12的基础分泌.(2)不同病情患者间的细胞因子的分泌水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性丙型肝炎患者体内TH2型细胞因子的分泌占优势.提示通过调整TH1/TH2失衡可能达到抗病毒治疗目的.     

格林—巴利综合征相关空肠弯曲菌脂多糖抗原初步分析

用格林－巴利综合征相关性空肠弯曲菌复制动物模型成功后的动物免疫血清对河北省格林－巴利综合征病人分离株空肠弯曲菌、动物来源株空肠弯曲菌及北京对照用人源株空肠弯曲菌及其脂多糖抗原性进行分析。结果显示，发生了典型的格林－巴利综合征样疾病的动物已产生了明显的抗格林－巴利综合征相关性空肠弯曲菌的免疫反应，其抗脂多糖抗体与当地其它来源株空肠弯曲菌有部分交叉反应，与北京分离株空肠弯曲菌无明显交叉反应。说明格林－巴利综合征相关性空肠弯曲菌脂多糖具有其独持的抗原性。支持某些特殊血清型的空肠弯曲菌参与格林－巴利综合征的致病过程。     

肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B 的构建及表达

目的：构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野 生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7B cDNA的肝脏特异 性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B，并检测其表达情况。方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子Alb序列及野生和突变的ATP7B cDNA依次亚克隆至转基因载体Kbpala上，得到可在肝脏特异性表达的正常及突变型人 ATP7B的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B。将其 短暂转染BRL细胞及BHK细胞，通过Western blotting检测其蛋白表达情况。结果:经酶切鉴定及定点测序证实，转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B 构建成功；Western blotting显示仅在肝脏细胞实现表达。结论:带 有人类ATP7B cDNA的野生及常见致病突变型的转基因载体Kbpala/Alb -ATP7B构建成功并在肝脏细胞特异性表达。     

载脂蛋白(a)5'调控区(TTTTA)n基因多态性与冠心病及其血清脂质的关系

目的:研究载脂蛋白(a)五核苷酸重复序列(PNR)基因多态性在湖北地区汉族人群冠心病(CHD)患者中的分布特点,进一步探讨其与血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了153例健康人及88例冠心病患者的apo(a)PNR基因型,并测定其血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoAⅠ、ApoB及脂蛋白(a)的浓度进行分析。结果:CHD患者LP(a)、TC、TG、LDL-C水平明显高于对照组,HDL-C水平明显低于对照组(P<0.01);ApoAⅠ、ApoB两组间无显著差异;CHD组apo(a)PNR(TTTTA)_5/8基因型频率(0.181)和(TTTTA)₅等位基因频率(0.107)分别显著高于对照组(P＜0.05);(TTTTA)_5/8基因型者血清LP(a)水平高于(TTTTA)_8/8、(TTTTA)_8/9基因型者。结论:apo(a)PNR(TTTTA)₅等位基因可能是湖北地区汉族人群冠心病的危险因子之一。     

柳氮磺胺吡啶对溃疡性结肠炎患者血清IFN-γ、IL-4及黏膜炎症的影响

目的： 探讨柳氮磺胺吡啶（SASP）对溃疡性结肠炎（UC）患者血清干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL-4)和黏膜炎症的影响。方法： 活动期中度UC患者50例，口服SASP 1 g，每日3次，共6周，应用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-4，组织学检测黏膜炎症。结果： 患者治疗前血清IFN-γ为（31.6±4.3) ng/L，显著高于治疗后的(22.3±5.6) ng/L（P<0.05），治疗前IFN-γ明显高于对照组的(17.5±5.9) ng/L（P<0.01）；治疗前IL-4为(4.6±1.8) ng/L，显著低于治疗后的(8.9±2.0) ng/L（P<0.05），治疗前IL-4明显低于对照组的(10.9±2.7) ng/L（P<0.01）。治疗前后嗜酸性粒细胞浸润率分别为100.0%和90.0%（P<0.05），隐窝脓肿分别为48.0%和13.3%（P<0.01），黏膜组织学分级分别为（2.49±0.84）级和（1.31±0.75）级（P<0.01）。结论： SASP能明显逆转中度活动期UC患者的Th1和Th2细胞的失衡状态和UC炎症黏膜的隐窝脓肿，减少中性白细胞和嗜酸性粒细胞的浸润，从而促进炎症黏膜的愈合。