TRPV1对H9c2心肌细胞缺氧复氧后凋亡的影响及机制

目的 探讨瞬时受体电位阳离子通道V亚族成员1(TRPV1)对H9c2心肌细胞缺氧复氧后凋亡的保护作用及可能机制。 方法 将H9c2心肌细胞随机分为对照组、模型组(缺氧/复氧组)、辣椒素(TRPV1激活剂)组(缺氧/复氧+辣椒素组)、辣椒素+LY组[缺氧/复氧+辣椒素+LY294002(PI3k抑制剂)组]。采用CCK-8法测定心肌细胞存活率，采用流式细胞仪测定各组心肌细胞凋亡率，采用Western blot法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组细胞caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)水平。 结果 与对照组比较，模型组、辣椒素组、辣椒素+LY组心肌细胞存活率和Bcl-2水平降低(均P<0.05)，细胞凋亡率和caspase-3、Bax、p-Akt水平升高(均P<0.05)；与模型组比较，辣椒素组心肌细胞存活率和Bcl-2、p-Akt水平升高(均P<0.05)，细胞凋亡率和caspase-3、Bax水平降低(均P<0.05)；模型组与辣椒素+LY组各指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。 结论 TRPV1可抑制缺氧复氧后H9c2心肌细胞凋亡，其机制可能与TRPV1激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3k)/Akt信号通路有关。      

人源瞬时受体电位M2型通道Nudix水解酶9同源结构域的提取和纯化

摸索人源瞬时受体电位M2型通道（TRPM2）羧基端Nudix水解酶9（NUDT9）同源结构域（NUDT9-H）的蛋白提取和纯化方法。 异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta（DE3）大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后,将收集到的上清液与GST磁珠结合并用还原型谷胱甘肽洗脱以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白,浓缩离心后再经分子排阻色谱层析纯化,最后经凝血酶酶切并与GST磁珠结合即得NUDT9-H蛋白。 含有0.5%的十二烷基-β-D-麦芽糖苷（DDM）裂解溶液体系和0.025%的DDM分子排阻层析色谱溶液体系能够提高GST-NUDT9-H融合蛋白的稳定性,再按每2 mg融合蛋白加入1 U凝血酶切割24 h,即获得高纯度NUDT9-H蛋白。 NUDT9-H蛋白稳定性较差,提取和纯化体系中需添加DDM以稳定其构象从而提高目的蛋白的产量和纯度。      

瞬时受体电位M8型离子通道选择性滤器的三维结构计算建模

构建瞬时受体电位M8型（TRPM8）离子通道选择性滤器结构域的三维结构模型。 在Rosetta计算结构生物学工具包中,使用基于运动回路闭合算法的从头计算,对TRPM8离子通道选择性滤器结构域进行多轮计算建模。 经过9轮计算得到了能量最低且结构收敛的TRPM8通道选择性滤器结构域的三维结构模型,发现D918位点的侧链并不指向离子流过的孔区中心,而Q914、D920和T923位点的侧链指向孔区中心;糖基化位点N934位于孔区外侧,其侧链指向胞外水环境。 构建了TRPM8通道选择性滤器结构域的三维结构模型,为理解该通道的离子选择性及相关机制提供了较为可靠的结构信息。      

事件相关电位P300在神经疾病伴认知功能障碍中的应用价值

目的探讨P300联合MMSE、MoCA量表评定神经疾病伴认知功能障碍病人认知功能的敏感性及P300检查的优越性。方法对33例神经科器质性疾病（如脑梗死、高血压、帕金森病等）病人和21名正常健康人行P300检测,同时使用MMSE和MoCA量表评估其认知情况,比较神经科器质性疾病病人和正常健康人P300的潜伏期和波幅;并比较2组神经心理量表评分结果与P300的潜伏期和波幅的相关性。结果对照组MMSE量表评分、MoCA评分高于观察组（P < 0.05和P < 0.01）;对照组P300潜伏期明显低于观察组（P < 0.01）,2组波幅比较差异无统计学意义（P>0.05）。P300潜伏期与MMSE评分、MoCA评分呈负相关（P < 0.05）;P300波幅与MMSE评分呈弱正相关（P < 0.05）,与MoCA评分无相关（P>0.05）。结论P300可以作为评估神经疾病伴认知功能障碍的生物指标,采用P300联合MoCA量表可以更敏感的检测出病人的早期认知功能障碍,值得在临床进一步应用。     

阅读障碍与注意缺陷多动障碍儿童的形似同音错字词组的N400研究

目的本研究拟结合当前汉语阅读障碍的研究趋势,设计词形、词义、词音的识别任务,并在执行任务同时记录在中央脑区(CZ脑区)的N400波形,比较探讨四组儿童N400脑电生理指标的异同。方法宁波市区某小学经前期筛查、后期复核诊断注意缺陷多动障碍(ADHD)21例、阅读障碍(RD)19例、ADHD+RD 17例及正常对照组19例(均为小学三至五年级学生)。使用SNAP-Ⅳ问卷(父母版)评估ADHD症状;儿童汉语阅读障碍量表评估阅读成绩。比较四组儿童在执行形似同音错字词组识别任务时应答反应时间及正确率,及中央脑区N400(波幅和潜伏期)波形差异在组间效应。结果平均反应时及正确应答率,正常对照组均优于其他三组;与RD组相比,ADHD组、ADHD+RD组的平均反应时略长,而正确率方面三组差异无显著性;ADHD组与ADHD+RD组在平均反应时及正确率方面比较差异无显著性。与对照组相比,ADHD组、RD组及ADHD+RD组潜伏期均延迟,而ADHD组、RD组及ADHD+RD组之间两两比较,差异均无显著性;而波幅方面,四组两两相比,差异均无显著性。结论 ADHD本身亦存在言语加工障碍,RD亦存在注意缺陷方面的问题,两者共病并未表现出更严重的言语加工障碍。     

基于“气道神经源性炎症-TRP通路”探讨慢性咳嗽发病机制及中医治疗

咳嗽临床常见，尤其是胸部影像学无明显异常的慢性咳嗽，病因复杂、易误诊误治，逐渐受到重视，国内外相继颁发相关指南，目前认为咳嗽高敏感性是其重要的病理生理机制。中医将慢性咳嗽归于"久咳""久嗽"范畴，在病因病机、治法方药上积累了丰富的临床经验，史利卿教授团队针对该病开展了专项临床及基础研究15年，根据传统中医理论及其突出临床症状提出"风邪伏肺"病机，应用祛风宣肺法治疗效果显著。文章结合西医学相关咳嗽机制研究进展及既往研究结果，初步探讨祛风宣肺法治疗该病的疗效机制，丰富慢性咳嗽风邪伏肺致咳相关学术理论的科学内涵，有利于提高中医药防治慢性咳嗽学术水平。     

老年慢性心力衰竭患者血清TRPC1和PCSK9的表达及临床意义

目的 探讨老年慢性心力衰竭患者血清瞬时受体电位通道1(TRPC1)和前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)的表达及临床意义。方法 选取2020年10月至2022年6月期间诊治的老年慢性心力衰竭患者共计80例为观察组,另选取同期健康体检者共计50例为对照组。对比观察组与对照组以及不同心功能分级患者各项生化指标水平,并分析各生化指标之间的相关性,采用多因素logistic回归分析老年慢性心力衰竭患者死亡的危险因素。比较未发生不良心血管事件组和发生不良心血管事件组患者血清TRPC1、PCSK9水平。结果 观察组血清TRPC1、PCSK9、脑钠肽N端前体蛋白、左心室舒张末期内径均高于对照组,左心室射血分数低于对照组(P<0.05)。心功能Ⅳ级患者血清TRPC1、PCSK9、脑钠肽N端前体蛋白、左心室舒张末期内径均高于心功能Ⅲ级和心功能Ⅱ级患者,且心功能Ⅲ级患者各项指标高于心功能Ⅱ级患者(P<0.05),心功能Ⅳ级患者左心室射血分数低于心功能Ⅲ级和心功能Ⅱ级患者,且心功能Ⅲ级患者低于心功能Ⅱ级患者(P<0.05)。老年慢性心力衰竭患者血清TRPC1和PCSK9与脑钠肽N端前体蛋...     

糖尿病肾病患者血清TRPM7、Sirtuin-1与钙磷代谢、颈动脉钙化的相关性

目的 探讨糖尿病肾病（DN）患者血清瞬时受体电位通道7(TRPM7)、沉默调节蛋白-1(Sirtuin-1)与钙磷代谢、颈动脉钙化的相关性。方法 选取2020年12月—2022年11月成都大学附属医院收治的97例DN患者作为DN组,另取同期在该院就诊的120例2型糖尿病患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清TRPM7的表达,酶联免疫吸附试验检测血清Sirtuin-1水平。采用Pearson法分析DN患者血清TRPM7、Sirtuin-1水平与钙磷代谢的相关性,并通过多因素Logistic逐步回归模型分析DN患者颈动脉钙化的危险因素。结果 DN组血肌酐、尿素氮、血清TRPM7、血磷、颈动脉钙化率高于对照组（P <0.05）。DN组Sirtuin-1、血钙低于对照组（P <0.05）。Pearson相关性分析结果显示,DN患者血清TRPM7与血钙呈负相关（r=-0.247,P=0.000）,与血磷呈正相关（r=0.415,P=0.000）;DN患者血清Sirtuin-1与血钙呈正相关（r=0.367,P=0.000）,与血磷呈负相关（r=-0.505,P=0.00...     

事件相关电位的临床应用与操作规范上海专家共识

事件相关电位是一种特殊的脑诱发电位,可以客观反映大脑认知加工过程。因其成分受实验任务范式、同步脑电信号采集和分析参数、幅值和潜伏期定量提取方法等多种因素影响,亟须建立事件相关电位临床应用与操作规范,促进其辅助临床诊疗的作用。上海市医学会脑电图与临床神经生理专科分会就事件相关电位在主要神经和精神疾病中的应用价值及其操作报告规范提出专家共识,以促进该临床技术的规范应用。     

APETx2对感染后肠易激综合征小鼠内脏敏感性的作用及机制

目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法 采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁回撤反射(AWR)评分评估小鼠内脏敏感性;免疫组织化学法检测结肠组织中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白表达;通过实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、CGRP mRNA表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测脑组织中酸敏感离子通道3(ASIC3)、CGRP、瞬时受体电位香草素1(TRPV1)蛋白表达。结果 与对照组比较,PI-IBS组首次排黑便时间显著降低,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著升高,结肠组织中CGRP蛋白表达显著升高,BDNF、CGRP mRNA显著升高,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著升高;与PI-IBS组比较,APETx2组首次排黑便时间显著延长,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著降低,结肠组织中CGRP蛋白表达显著降低,BDNF、CGRP m...